はじめに。 リツキシマブによる治療はB細胞前駆型ALL（B-ALL）患者の予後を改善しており、従来は白血病芽球のCD20発現量が20％以上の患者に限定されていた。 しかし、この任意のカットオフが生物学的に意味があるのか、あるいはCD20発現量の低い患者もリツキシマブ治療から利益を得られるのかどうかは分かっていません。 さらに、CD20の発現レベルは、異なるコンパートメント間で異なる可能性があり、早期治療中に変化する可能性があります。 そのため、現在のドイツ多施設共同急性リンパ性白血病（GMALL）08/2013試験では、導入期および早期地固め期のすべてのBCR-ABL1陰性B-ALL患者に対し、初期の血球CD20発現に関係なくリツキシマブが適用されます。 本研究では、診断時および5日間のデキサメタゾン前段階後の芽球のCD20発現を徹底的に調べ、リツキシマブ1回投与を含む導入Ⅰ後のMRD反応と相関させ、リツキシマブへの反応への影響を評価します

Methods: 診断時（血液、骨髄（BM））および前段階終了時（血液）にCD20発現量の比較定量を行い、早期リツキシマブ投与後の微小残存病変（MRD）反応との相関を検討した。 サンプルは、EuroFlow標準の染色、溶解、洗浄、装置設定の手順（van Dongen et al., 2012）に従い、マーカーCD45、CD20、CD10、CD66c、CD3、CD19、CD71、CD9、CD13+33、CD34、CD22、CD11a、CD38を含む3チューブ、8色パネルで染色されました。 CD20中央値蛍光強度（CD20-MFI）および全ブラスト中のCD20+ B-ALLブラストの割合（%CD20+）が測定された。 MRDは、クローン性免疫遺伝子再配列のリアルタイム定量PCRを用いて、導入I後22日目に定量化した。 導入後のMRD反応は10-4以下へのMRD減少、MRD持続は定量可能なMRD≧10-4の検出と定義した＜8676＞＜1039＞結果。 B-ALL患者84名，計166検体のFCM結果を評価した。 循環芽球のCD20発現は，36検体のペア末梢血コホートにおいて，common/pre-B-ALL（c/pre-B）では5日間の前段階を経て有意に増加したが，pro-B-ALLでは認められなかった（図1 A-B，n=8 pro-B-ALL，CD20-MFI と%CD20のペアt検定：p=.1016とp=.1660，図2 A-B，n=28 c/pre-B-ALL，p=.0029 とp=0.0060）． 興味深いことに、B-ALL芽球でのCD20発現の増加は、成熟した正常B細胞での発現とは対照的であり、6日目のpro-B-ALLおよびc/pre-B-ALLのサンプルでは減少していた（paired t-test: p=.0485 and p<.0001、それぞれ）（Fig.1A, 2A）。

24個の血液/BM前処理サンプルのペアにおいて、CD20+芽球の割合は、c/pre-B-ALLでは血液で有意に高かったが（n=19：paired t-test：p=.0009）pro-B-ALL（n=5：paired t-test：p=.095） （図1C, 2C）. CD20-MFIの比較では、一貫して有意水準には達しなかった。 しかし、3/24 (12.5%) の患者では、BMのCD20+ B-ALL芽球の割合が任意のカットオフ値20%に達しなかったが、診断用血液では達した。

最後に、54人の患者のBM 25検体と治療前の血液30検体、デキサメタゾン前処置後の血液38検体のCD20発現レベルを評価した（合計93検体）。 さらに計算では、リツキシマブ1回投与後のMRD反応値を、芽球のCD20発現量と相関させた。 詳細には、MRD反応者群の患者あたりの%CD20の最高測定値を、MRD残存者群の患者あたりの%CD20の最高測定値と比較した。 CD20の発現量は、MRD反応者21人と比較して、MRD持続者33人で有意に低かった（図3、p=0.0336）。 この差は、主にc/pre-B-ALLと比較してpro-B-ALLではMRD persisterの頻度が高いことに起因する（pro-B-ALLでは8/9（89%）に対してc/pre-B-ALLでは25/45（56%））

結論：MRD persisterは、c/pre-B-ALLと比較してMRD persistenceが多い。 従来のCD20標的治療の適格基準に挑戦したc/pre-B-ALL患者において，白血病芽球のCD20発現量の（i）治療前の血液とBM，（ii）治療前の血液と前段階後の血液で有意差を測定した。 MRD反応者はMRD残存者と比較してCD20発現量が高い傾向にありました。 この結果を確認するため、患者コホートの拡張を継続中です。 さらに、導入第II相試験後のリツキシマブ3回投与の影響を分析する予定です。

Ritgen：abbvie。 研究資金、ロシュ：謝礼、研究資金。 Viardot:ギリアドカイト。 コンサルタント、謝礼、ロシュ：コンサルタント、謝礼、ファイザー：コンサルタント、謝礼。 コンサルタント、謝礼、BMS:コンサルタント、謝礼、Amgen: コンサルタント業務。 Kneba:Roche:コンサルタント、謝礼、AbbVie:コンサルタント、謝礼。 Goekbuget:カイト/ギリアド。 コンサルタント;セルジーン。 Consultancy; Novartis: コンサルティング、その他。 トラベルサポート、研究資金；ファイザー。 コンサルティング、その他。 出張サポート、研究資金、Amgen: Consultancy, Other: 出張サポート、研究資金 Brüggemann:Incyte社。 コンサルティング; Amgen: Brüggann:Incyte社: コンサルティング、研究資金、スピーカーズビューロー、PRMA社: コンサルティング、Affimed社:研究資金。 研究資金; Regeneron: 研究資金; ファイザー: ロシュ：スピーカーズビューロー

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