ReviewEnzyme assays☆

酵素アッセイに不可欠な要件を説明し、頻繁に起こるエラーや落とし穴とその回避について論じています。 酵素のアッセイに考慮しなければならない主な要因は、温度、pH、イオン強度、基質や酵素のような必須成分の適切な濃度である。 これらのパラメータを標準化することが望ましいが、酵素の性質が多様であるため、測定条件を統一することができない。 しかし、多くの酵素、特に哺乳類由来の酵素は、生理的なpHである7.5付近に至適pHを持ち、体温は37℃程度が測定温度となるが、実験上の理由から25℃が好まれることが多い。 また、基質や酵素の濃度は、飽和の度合いによる一般的な法則を示さない限り、正確な値を示すことはできない。 酵素アッセイを行うためのルール、適切な取り扱い、方法論、アッセイ混合物やブランクの調製、アッセイ時間の選択などが議論され、頻繁でつまらない誤りを避けるための提案がなされています。 可逆反応や結合試験など、より複雑な酵素アッセイの特殊性についても検討されている。

最後に、酵素活性を推定するための実験データの取り扱いについて説明されている。 酵素の初速を決定する手順と、それを定義された酵素単位に変換する手順、さらに結果の文書化のための提案も提示されている。

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