Diagnózu Valley Fever lze potvrdit:

• mikroskopickou identifikací houbových kuliček v infikovaném vzorku tkáně, sputa nebo tělní tekutiny
• pěstováním kultury kokcidioidů spp. ze vzorku tkáně, sputa nebo tělní tekutiny
• detekce protilátek (sérologické testy speciálně pro horečku v údolí) proti houbě v krevním séru nebo jiných tělních tekutinách

Diagnóza kokcidioidomykózy je podezřelá pouze tehdy, pokud je známo, že pacient byl vystaven onemocnění v důsledku cestování nebo pobytu v endemické oblasti.

Je-li sérologický test na protilátky proti údolní horečce pozitivní, laboratoř následně provede stanovení titru.

• Titr je měření množství nebo koncentrace protilátek, které pacient vytváří proti houbě
• Protilátka je bílkovina, kterou produkuje imunitní systém pacienta v reakci na antigen (houbu)
• Protilátka je schopna se spojit s antigenem a neutralizovat ho

Titr se získá zdvojnásobením ředění pozitivní krve (1. ředění):4, 1:8, 1:16, 1:32 . . .), dokud není test negativní. Titr, který je hlášen lékaři, je poslední pozitivní ředění.

Přestože pozitivní sérologické výsledky téměř vždy znamenají, že pacient má údolní horečku, třetina nebo více pacientů s údolní horečkou může mít ve skutečnosti negativní výsledky. Proto může být nutné sérologický test pravidelně opakovat.

Kožní testy na údolní horečku (kokcidioidin nebo sferulin)

ukazují předchozí expozici houbě, ale vzhledem k tomu, že reaktivita je celoživotní, nejsou kožní testy nijak zvlášť užitečné při diagnostice současné infekce. Kožní testy jsou od července 2014 opět komerčně dostupné.

Rutinní rentgenové vyšetření hrudníku

běžně odhalí dutiny po údolní horečce u osoby, která nemá žádné příznaky a která si nemusí být vědoma toho, že údolní horečku prodělala.