Popisují se základní požadavky na enzymové testy a diskutují se často se vyskytující chyby a úskalí, jakož i možnosti jejich odstranění. Hlavními faktory, které je třeba při analýze enzymů zohlednit, jsou teplota, pH, iontová síla a správné koncentrace základních složek, jako jsou substráty a enzymy. Standardizace těchto parametrů by byla žádoucí, ale různorodost vlastností různých enzymů brání sjednocení podmínek analýzy. Nicméně mnoho enzymů, zejména těch ze savčích zdrojů, má pH optimum blízké fyziologickému pH 7,5 a tělesná teplota přibližně 37 °C může sloužit jako teplota testu, ačkoli z experimentálních důvodů se často dává přednost teplotě 25 °C. V mnoha případech však zvláštní vlastnosti jednotlivých enzymů diktují zvláštní podmínky stanovení, které se mohou značně lišit od doporučených podmínek.

Kromě toho nelze uvést přesné hodnoty koncentrací složek stanovení, jako jsou substráty a enzymy, pokud nelze uvést obecná pravidla závislá na relativním stupni nasycení. Jsou diskutována pravidla pro provádění enzymového testu, vhodné zacházení, metodické aspekty, příprava analytických směsí a slepých vzorků, volba doby testu a jsou uvedeny návrhy, jak se vyhnout častým a triviálním chybám. Jsou zváženy zvláštnosti složitějších enzymových testů, včetně reverzibilních reakcí a spojených testů.

Nakonec je popsáno zpracování experimentálních dat pro odhad enzymové aktivity. Je uveden postup stanovení počáteční enzymové rychlosti a její transformace na definované enzymové jednotky a návrhy na dokumentaci výsledků.