Kasviöljyjen potentiaali Candida albicansin kasvun estäjinä

Abstract

Minimi-inhibiittoriset pitoisuudet (MIC-pitoisuudet) ja minimaaliset fungisidiset pitoisuudet (MFC-pitoisuudet) määritettiin 38:lle kasviperäiselle öljylle Candida albicansia vastaan. Tässä tutkimuksessa käytettiin neljää kantaa, mukaan lukien yksi standardikanta. Positiivisina kontrolleina käytettiin sienilääkkeitä, flukonatsolia ja amfoterisiini B:tä. Tässä tutkimuksessa käytetyn vakiokannan (ATCC10231) todettiin olevan erittäin resistentti flukonatsolille: Flukonatsolia tarvittiin 3000 μg ml-1 tämän kannan kasvun osittaiseen estämiseen, eikä täydellistä estoa saavutettu. Muut Candida-kannat olivat herkkiä 5 μg ml-1 flukonatsolille. Kaikki käytetyt kannat olivat herkkiä amfoterisiini B:lle. Testatuista 38 öljystä 23 todettiin tehokkaiksi ja 15 tehottomiksi. Tehokkaat öljyt luokiteltiin niiden MFC-arvojen perusteella kolmeen luokkaan. Seitsemän öljyä, joilla oli fungisidinen vaikutus alle 0,15 prosentin öljypitoisuudella, luokiteltiin tehokkaimpaan luokkaan. Öljyt, joiden MFC oli välillä 0,16-1,5 %, katsottiin kohtalaisen tehokkaiksi. Yhdeksän öljyä, jotka vaativat yli 1,5 prosentin pitoisuuden, katsottiin vähemmän tehokkaiksi. Flukonatsolille vastustuskykyinen kanta (MTCC 227) oli herkkä ainakin 23 kasviöljylle. Tämän tutkimuksen tulokset osoittavat, että kasviperäisiä öljyjä voidaan käyttää potentiaalisina anti-Candida-aineina.

1 Johdanto

Amphotericn B ja flukonatsoli ovat kaksi tärkeää ainetta, joita käytetään sienilääkehoidossa ihmisen patogeenisiä sieniä vastaan . Amfoterisiini B:tä käytetään ensisijaisena lääkkeenä kuolemansairaille potilaille . Atsolilääke flukonatsolia määrätään laajalti erilaisia Candida albicans -infektioita vastaan. Vaikka näillä lääkkeillä on laajalti kiitosta niiden tehokkuudesta, niillä tiedetään olevan sivuvaikutuksia . Flukonatsoli on luonteeltaan fungistaattinen, ja C. albicansin kliinisissä isolaateissa on raportoitu esiintyvän flukonatsoliresistenssiä. Näin ollen C. albicansin aiheuttamia infektioita vastaan tarvitaan parempia, uusia sienilääkkeitä, jotka ovat tehokkaita ja joilla on vähemmän sivuvaikutuksia.

Monia luonnollisia aineita, kuten kasviperäisiä tuotteita, kuten uutteita, öljyjä jne. käytetään perinteisesti erilaisiin vaivoihin. Jotkut kasviperäiset tuotteet ovat tehokkaita sieni- ja bakteeri-infektioita vastaan . Eteerisiä öljyjä, kuten teepuuöljyä, sitruunaruohoöljyä, sitronellaöljyä, palmaroshaöljyä ja joitakin niiden ainesosia on testattu C. albicansin in vitro -kasvua vastaan.

Testasimme 38 kasviöljyn in vitro -tehoa neljää C. albicansin isolaattia vastaan. Tehokkaiden öljyjen pienimmät estävät pitoisuudet (MIC) ja pienimmät fungisidiset pitoisuudet (MFC) on raportoitu. Tehon (MFC) perusteella öljyt on luokiteltu kolmeen luokkaan.

2 Materiaalit ja menetelmät

2.1 Kemikaalit ja kannat

Tässä tutkimuksessa käytettiin vakiokantaa, tyyppikantaa ATCC10231 (MTCC 227/CA IV), joka on amfoterisiini B:n määritykseen ehdotettu vertailukanta, ja kolmea kliinistä C. albicans -isolaattia. Kolme kliinistä C. albicans -isolaattia, nimittäin SRTCC I (CA I), SRTCC II (CA II) ja SRTCC III (CA III), saatiin SRTCC-kulttuurikokoelmakeskuksesta, School of Life Sciences, SRTM University, Nanded (MS). Intia. Standardikanta ostettiin The Institute of Microbial Technology (IMTECH), Chandigarh, Intia.

Tässä tutkimuksessa käytettiin 38 kasviöljyä. Osa öljyistä saatiin ystävällisesti Central Institute of Medicinal and Aromatic Plants (CIMAP), Lucknow, Intia, ja loput öljyt sekä sienilääkkeet, amfoterisiini B ja flukonatsoli, ostettiin paikallisilta markkinoilta.

2.2 Inokulaation valmistaminen

Kaikki tässä tutkimuksessa käytetyt C. albicans -kannat kasvatettiin 30 °C:n lämpötilassa 24 tunnin ajan ravistelevassa inkubaattorissa käyttäen Yeast Extract Peptone mediumia ja Sabouraud Dextrose mediumia. Solut kerättiin sentrifugoimalla, suspendoitiin steriiliin tislattuun veteen ja käytettiin välittömästi. Solujen lukumäärä määritettiin hemosytometrillä ja säädettiin 5 × 106 cfu ml-1.

2.3 Kasviöljyjen anti-Candida-aktiivisuuden seulonta levydiffuusiomäärityksellä

38 kasviöljyn anti-Candida-aktiivisuus testattiin standardoidulla levydiffuusiomäärityksellä. Sabouraud Dextrose Agar -levyt valmistettiin ja kylvettiin 5 × 106 cfu ml-1:llä käyttäen edellä kuvatulla tavalla valmistettuja Candida-kantojen inokuloita. Aseptisesti 5 μl kasviöljyjä tiputettiin 5 mm:n suodatinpaperilevyille (Whatman nro 1). Nämä levyt siirrettiin sitten kylvettyjen levyjen keskelle. Jokaista konsentraatiota varten käytettiin kolme levyä, joita inkuboitiin 30 ± 2 °C:ssa. Inhibitiovyöhykkeen halkaisija mitattiin 48 tunnin inkuboinnin jälkeen.

2.4 Kasviöljyjen pienimmän estävän pitoisuuden (MIC) määrittäminen agar-laimennusmenetelmällä

Kasviöljyjen pienimmät estävät pitoisuudet (MIC) määritettiin agar-laimennusmenetelmällä (23) Agar-levyt valmistettiin lisäämällä YPD-agariin kasviöljyjä, jotka sisälsivät kasviperäisiä öljyjä erilaisina pitoisuuksina (ts. 0,03-3 % v/v). Tween 20 0,5 % (v/v) lisättiin öljyn liukoisuuden parantamiseksi. Näille levyille inokuloitiin 103 cfu:ta käyttäen edellä kuvatulla tavalla valmistettuja Candida-kantojen inokuloita. Levyjä säilytettiin kolminkertaisina kutakin pitoisuutta varten. Kontrollina käytettiin levyjä, joissa oli Tween 20:tä mutta ei lainkaan kasviöljyä. Kaikkia näitä levyjä inkuboitiin 30 ± 2 °C:ssa. Levyjä tarkkailtiin ja pesäkkeiden lukumäärä laskettiin 48 tunnin inkuboinnin jälkeen. MIC-arvot määritettiin pienimmäksi öljyn pitoisuudeksi, joka esti Candida-kantojen näkyvän kasvun.

2.5 Kasviöljyjen pienimmän sienitautia aiheuttavan konsentraation (MFC) määrittäminen Broth-makrolaimennusmenetelmällä

Kasviöljyjen pienin sienitautia aiheuttava konsentraatio (MFC) määritettiin Broth-makrolaimennusmenetelmällä (NCCLS:n makrolaimennusmääritys NCCLS:n makrolaimennusmääritys M27-A, referenssimenetelmä suositeltava menetelmä hiivasienienien herkkyystutkimuksiin). Kasviöljyjä valmistettiin eri pitoisuuksina (0,03-3 % v/v) YPD-liemialustaan pulloissa. Tween 80:tä lisättiin loppupitoisuutena 0,001 % (v/v) öljyn liukoisuuden parantamiseksi. Jokaiseen kolviin istutettiin 5 × 105 cfu ml-1 Candida-kantaa. Tween 20:tä sisältäviä pulloja, joissa ei ollut kasviöljyä, käytettiin kontrollina. Pulloja inkuboitiin 30 ± 2 °C:ssa orbitaalisessa ravisteluhautomossa (100 rpm) 48 tuntia. Jokaisesta pullosta inokuloitiin 5 μl viljelmää YPD-levyille ja inkuboitiin 30 ± 2 °C:ssa 48 tuntia. Levyjä tarkkailtiin ja MFC määritettiin pienimmäksi Candida-kantojen kasvua täysin estävän kasviöljyn pitoisuudeksi.

3 Tulokset

3.1 Kasviöljyjen seulonta Candida-vastaista aktiivisuutta varten

Testatut C. albicans -isolaatit osoittivat erilaista herkkyyttä öljyille. Suurin osa öljyistä todettiin kuitenkin tehokkaiksi ja osoittivat huomattavaa aktiivisuutta hyvin pieninä pitoisuuksina. Testatuista 38 öljystä 25 aiheutti 1-30 mm:n estovyöhykkeen (ZOI). Seitsemäntoista öljyä aiheutti 10-20 mm:n ZOI:n. Kuusi öljyä osoitti 1-9 mm:n ZOI:n kaikkia neljää testattua kantaa vastaan. Jasmiini- ja laventeliöljy eivät estäneet Candida-kantojen kasvua CA IV:tä lukuun ottamatta. (Taulukko 1). (13 öljyä ei estänyt C. albicans -kantojen kasvua 5 μl:n annoksilla.)

1

Kasviöljyjen seulonta anti-Candida-aktiivisuus

.

Kasviöljyt CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Sitruunaruohoöljy 30.0 (±0) 30.0 (±0) 27.3 (±2.51) 30.3 (±2.51)
Nelkanlehtiöljy 27.0 (±1.0) 30.0 (±4.35) 22.0 (±3.0) 20.3 (±0.57)
Kaneliöljy 25.0 (±0) 24.3 (±4.93) 26.3 (±2.3) 24.0 (±3.6)
Japanilainen minttuöljy 20.0 (±0) 21.0 (±1.0) 20.3 (±2.51) 26.6 (±3.51)
Geraaniöljy 20.0 (±0) 20.3 (±0.57) 18.0 (±3.0) 19.0 (±1.73)
Motiaroshaöljy 21.3 (±0.57) 20.3 (±3.05) 14.0 (±2.0) 13.6 (±2.88)
Appelsiiniöljy 29.0 (±3.60) 23.0 (±4.35) 23.0 (±2.0) 25.3 (±1.52)
Ylang-ylang öljy 24.0 (±1.0) 21.6 (±0.57) 13.3 (±0.57) 16.0 (±1.0)
Inkivääriöljy 20.0 (±4.35) 25.3 (±2.51) 18.3 (±0.57) 16.0 (±3.60)
Piparminttuöljy 15.0 (±0) 15.3 (±0.57) 10.3 (±2.51) 15.6 (±0.57)
Ocimumöljy 19.3 (±0.57) 17.3 (±0.57) 10.6 (±4.04) 16.6 (±0.57)
Sitruunaöljy 13.3 (±0.57) 17.6 (±0.57) 16.3 (±0.57) 17.6 (±2.08)
Kampferöljy 13.0 (±1.0) 11.0 (±2.64) 13.3 (±2.08) 16.3 (±3.21)
Rosmariiniöljy 8.3 (±0.57) 10.0 (±2.64) 8.3 (±1.52) 12.3 (±2.51)
Tulsiöljy 12.6 (±4.04) 12.0 (±0) 10.3 (±1.52) 12.0 (±0)
Bergamottiöljy 16.0 (±1.0) 22.3 (±2.51) 17.3 (±2.08) 19.3 (±1.52)
Teepuuöljy 17.0 (±1.0) 24.0 (±1.0) 11.0 (±1.73) 14.6 (±2.51)
Clarysage oil 11.6 (±0.57) 12.0 (±1.0) 8.3 (±2.51) 12.3 (±0.57)
Eukalyptusöljy 7.0 (±0) 9.0 (±1.0) 6.3 (±0.57) 10.0 (±1.0)
Sitronellaöljy 7.3 (±0.57) 9.0 (±1.0) 8.0 (±1.0) 6.6 (±1.52)
Juniper öljy 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0)
Inkivääriöljy 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0)
Ruusuöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0)
Jasmiiniöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Laventeliöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Chandan öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Setriöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jyotishmati-öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jojobaöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Oliiviöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Orpaöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Walnut oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Manteliöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Khusöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Neem-öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Vehnänalkioöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Chaulmoograöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Cadeöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Kasviöljyt CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Lemongrass oil 30.0 (±0) 30.0 (±0) 27.3 (±2.51) 30.3 (±2.51)
Nelkanlehtiöljy 27.0 (±1.0) 30.0 (±4.35) 22.0 (±3.0) 20.3 (±0.57)
Kaneliöljy 25.0 (±0) 24.3 (±4.93) 26.3 (±2.3) 24.0 (±3.6)
Japanilainen minttuöljy 20.0 (±0) 21.0 (±1.0) 20.3 (±2.51) 26.6 (±3.51)
Geraaniöljy 20.0 (±0) 20.3 (±0.57) 18.0 (±3.0) 19.0 (±1.73)
Motiaroshaöljy 21.3 (±0.57) 20.3 (±3.05) 14.0 (±2.0) 13.6 (±2.88)
Appelsiiniöljy 29.0 (±3.60) 23.0 (±4.35) 23.0 (±2.0) 25.3 (±1.52)
Ylang-ylang öljy 24.0 (±1.0) 21.6 (±0.57) 13.3 (±0.57) 16.0 (±1.0)
Inkivääriöljy 20.0 (±4.35) 25.3 (±2.51) 18.3 (±0.57) 16.0 (±3.60)
Piparminttuöljy 15.0 (±0) 15.3 (±0.57) 10.3 (±2.51) 15.6 (±0.57)
Ocimumöljy 19.3 (±0.57) 17.3 (±0.57) 10.6 (±4.04) 16.6 (±0.57)
Sitruunaöljy 13.3 (±0.57) 17.6 (±0.57) 16.3 (±0.57) 17.6 (±2.08)
Kampferöljy 13.0 (±1.0) 11.0 (±2.64) 13.3 (±2.08) 16.3 (±3.21)
Rosmariiniöljy 8.3 (±0.57) 10.0 (±2.64) 8.3 (±1.52) 12.3 (±2.51)
Tulsiöljy 12.6 (±4.04) 12.0 (±0) 10.3 (±1.52) 12.0 (±0)
Bergamottiöljy 16.0 (±1.0) 22.3 (±2.51) 17.3 (±2.08) 19.3 (±1.52)
Teepuuöljy 17.0 (±1.0) 24.0 (±1.0) 11.0 (±1.73) 14.6 (±2.51)
Clarysage oil 11.6 (±0.57) 12.0 (±1.0) 8.3 (±2.51) 12.3 (±0.57)
Eukalyptusöljy 7.0 (±0) 9.0 (±1.0) 6.3 (±0.57) 10.0 (±1.0)
Sitronellaöljy 7.3 (±0.57) 9.0 (±1.0) 8.0 (±1.0) 6.6 (±1.52)
Juniperöljy 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0)
Inkivääriöljy 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0)
Ruusuöljy 0 (±0) 0 (±0) 2.0 (±0)
Jasmiiniöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Laventeliöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Chandan oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Cedar oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jyotishmatiöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jojoba-öljy-öljy öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Oliiviöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±140> 0 (±2)
0 (±0)
Rypsiöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Vaalpähkinäöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Manteliöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Khus öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Neem-öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Neem oil 0 (±0)
Neem oil
Vehnänalkioöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Chaulmoograöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Cadeöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)

ZOI: Hengitysvyöhyke. Suluissa olevat arvot ilmaisevat keskihajonnan.

1

Kasviöljyjen seulonta anti-Candida-aktiivisuus

.

Kasviöljyt CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Sitruunaruohoöljy 30.0 (±0) 30.0 (±0) 27.3 (±2.51) 30.3 (±2.51)
Nelkanlehtiöljy 27.0 (±1.0) 30.0 (±4.35) 22.0 (±3.0) 20.3 (±0.57)
Kaneliöljy 25.0 (±0) 24.3 (±4.93) 26.3 (±2.3) 24.0 (±3.6)
Japanin minttuöljy 20.0 (±0) 21.0 (±1.0) 20.3 (±2.51) 26.6 (±3.51)
Geraaniöljy 20.0 (±0) 20.3 (±0.57) 18.0 (±3.0) 19.0 (±1.73)
Motiarosha-öljy 21.3 (±0.57) 20.3 (±3.05) 14.0 (±2.0) 13.6 (±2.88)
Appelsiiniöljy 29.0 (±3.60) 23.0 (±4.35) 23.0 (±2.0) 25.3 (±1.52)
Ylang-ylang-öljy 24.0 (±1.0) 21.6 (±0.57) 13.3 (±0.57) 16.0 (±1.0)
Inkiväärinurmikkaöljy 20.0 (±4.35) 25.3 (±2.51) 18.3 (±0.57) 16.0 (±3.60)
Piparminttuöljy 15.0 (±0) 15.3 (±0.57) 10.3 (±2.51) 15.6 (±0.57)
Ocimumöljy 19.3 (±0.57) 17.3 (±0.57) 10.6 (±4.04) 16.6 (±0.57)
Sitruunaöljy 13.3 (±0.57) 17.6 (±0.57) 16.3 (±0.57) 17.6 (±2.08)
Sitruunaöljy 13.3 (±0.57) 13.0 (±1.0) 11.0 (±2.64) 13.3 (±2.08) 16.3 (±3.21)
Rosmariiniöljy 8.3 (±0.57) 10.0 (±2.64) 8.3 (±1.52) 12.3 (±2.51)
Tulsiöljy 12.6 (±4.04) 12.0 (±0) 10.3 (±1.52) 12.0 (±0)
Bergamottiöljy 16.0 (±1.0) 22.3 (±2.51) 17.3 (±2.08) 19.3 (±1.52)
Teepuuöljy 17.0 (±1.0) 24.0 (±1.0) 11.0 (±1.73) 14.6 (±2.51)
Clarysageöljy 11.6 (±0.57) 12.0 (±1.0) 8.3 (±2.51) 12.3 (±0.57)
Eukalyptusöljy 7.0 (±0) 9.0 (±1.0) 6.3 (±0.57) 10.0 (±1.0)
Sitronellaöljy 7.3 (±0.57) 9.0 (±1.0) 8.0 (±1.0) 6.6 (±1.52)
Juniper öljy 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0)
Inkivääriöljy 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0)
Ruusuöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0)
Jasmiiniöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Laventeliöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Chandan oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Setriöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jyotishmati-öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jojobaöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Oliiviöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Orpaöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Walnut oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Manteliöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Khusöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Neem oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Neem oil 0 (±0)
Neem oil
Vehnänalkioöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Chaulmoograöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Cadeöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Kasviöljyt CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Lemongrass oil 30.0 (±0) 30.0 (±0) 27.3 (±2.51) 30.3 (±2.51)
Nelkanlehtiöljy 27.0 (±1.0) 30.0 (±4.35) 22.0 (±3.0) 20.3 (±0.57)
Kaneliöljy 25.0 (±0) 24.3 (±4.93) 26.3 (±2.3) 24.0 (±3.6)
Japanin minttuöljy 20.0 (±0) 21.0 (±1.0) 20.3 (±2.51) 26.6 (±3.51)
Geraaniöljy 20.0 (±0) 20.3 (±0.57) 18.0 (±3.0) 19.0 (±1.73)
Motiaroshaöljy 21.3 (±0.57) 20.3 (±3.05) 14.0 (±2.0) 13.6 (±2.88)
Appelsiiniöljy 29.0 (±3.60) 23.0 (±4.35) 23.0 (±2.0) 25.3 (±1.52)
Ylang-ylang öljy 24.0 (±1.0) 21.6 (±0.57) 13.3 (±0.57) 16.0 (±1.0)
Inkivääriöljy 20.0 (±4.35) 25.3 (±2.51) 18.3 (±0.57) 16.0 (±3.60)
Piparminttuöljy 15.0 (±0) 15.3 (±0.57) 10.3 (±2.51) 15.6 (±0.57)
Ocimumöljy 19.3 (±0.57) 17.3 (±0.57) 10.6 (±4.04) 16.6 (±0.57)
Sitruunaöljy 13.3 (±0.57) 17.6 (±0.57) 16.3 (±0.57) 17.6 (±2.08)
Kampferöljy 13.0 (±1.0) 11.0 (±2.64) 13.3 (±2.08) 16.3 (±3.21)
Rosmariiniöljy 8.3 (±0.57) 10.0 (±2.64) 8.3 (±1.52) 12.3 (±2.51)
Tulsiöljy 12.6 (±4.04) 12.0 (±0) 10.3 (±1.52) 12.0 (±0)
Bergamottiöljy 16.0 (±1.0) 22.3 (±2.51) 17.3 (±2.08) 19.3 (±1.52)
Teepuuöljy 17.0 (±1.0) 24.0 (±1.0) 11.0 (±1.73) 14.6 (±2.51)
Clarysage oil 11.6 (±0.57) 12.0 (±1.0) 8.3 (±2.51) 12.3 (±0.57)
Eukalyptusöljy 7.0 (±0) 9.0 (±1.0) 6.3 (±0.57) 10.0 (±1.0)
Sitronellaöljy 7.3 (±0.57) 9.0 (±1.0) 8.0 (±1.0) 6.6 (±1.52)
Juniper öljy 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0) 5.0 (±0)
Inkivääriöljy 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0) 2.0 (±0)
Ruusuöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0>
Ruusuöljy 0 (±0) 1.0> 0.0 (±0)
Jasmiiniöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Laventeliöljy 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Chandan oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Cedar oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jyotishmatiöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jojoba öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Oliiviöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±140> 0 (±2)
0 (±0)
Rypsiöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Valjapähkinäöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Manteliöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Khus öljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Neem oil 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Vehnänalkioöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Chaulmoograöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Cadeöljy 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)

ZOI: Hengitysvyöhyke. Suluissa olevat arvot ilmaisevat standardipoikkeaman.

3.2 Kasviöljyjen MIC-arvojen määrittäminen C. albicansia vastaan

MIC-arvot 23 tehokkaalle öljylle ja kahdelle laajalti käytetylle lääkkeelle, flukonatsolille ja amfoterisiini B:lle, määritettiin neljää C. albicans -isolaattia vastaan. Öljyt osoittivat pitoisuusriippuvaista kasvun estoa. Muutamissa tapauksissa testatut kannat osoittivat erilaista herkkyyttä, mutta MIC-arvoissa ei ollut merkittävää eroa (taulukko 2).

2

Kasviöljyjen MIC- ja MFC-arvot neljää Candida albicans -isolaattia vastaan

.

Kasviöljyt/lääkkeet CA I CA II CA III CA IV
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MIC (%) . MFC (%) MIC (%) MFC (%) MFC (%)
Sitruunaruohoöljy 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0.12
Nelkanlehtiöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Japaniöljy 0.06 0.12 0.12 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06
Geraaniöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Kaneliöljy 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03
Motiarosha-öljy 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0.12
Appelsiiniöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 1.0 1.0
Ylang-ylang öljy 0.5 1.0 0.25 1.0 0.25 1.0 0.5 1.0
Inkivääriöljy 0.12 0.12 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.12
Piparminttuöljy 0.25 0.25 0.25 0.25 0.30 0.30 0.25 0.25
Ocimumöljy 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Sitruunaöljy 0.5 1.0 1.0 2.0 1.0 2.0 0.5 1.0
Kamferiöljy 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0
Rosmariiniöljy 1.0 2.0 1.0 3.0 1.0 3.0 1.0 2.0
Tulsiöljy 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.25 0.25
Bergamottiöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0
Teepuuöljy 0.12 0.25 0.25 0.5 0.25 0.5 0.12 0.25
Clarysageöljy 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0
Eukalyptusöljy 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5
Sitronellaöljy 1.0 2.0 0.8 2.0 0.5 2.0 1.0 2.0
Juniper öljy 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Inkivääriöljy 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Ruusuöljy 1.0 3.0 1.0 3.0 2.0 3.0 1.0 3.0
Fluconazolea 5.0 5.5 5.0 5.5 2.0 2.5 3000 >3000
Amphotericin Ba 2.5 2.5 3.0 3.0 3.0 3.0 2.5 2.5
Kasviöljyt/-lääkkeet CA I CA II CA III CA IV
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MIC (%) MIC (%) MFC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%)
Sitruunaruohoöljy 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0.12
Nelkanlehtiöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Japaniöljy 0.06 0.12 0.12 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06
Geraaniöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Kaneliöljy 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03
Motiarosha-öljy 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0.12
Appelsiiniöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 1.0
Ylang-ylang öljy 0.5 1.0 0.25 1.0 0.25 1.0 0.5 1.0
Inkivääriöljy 0.12 0.12 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.12
Piparminttuöljy 0.25 0.25 0.25 0.25 0.30 0.30 0.25 0.25
Ocimumöljy 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Sitruunaöljy 0.5 1.0 1.0 2.0 1.0 2.0 0.5 1.0
Kamferiöljy 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0
Rosmariiniöljy 1.0 2.0 1.0 3.0 1.0 3.0 1.0 2.0
Tulsiöljy 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.25 0.25
Bergamottiöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0
Teepuuöljy 0.12 0.25 0.25 0.5 0.25 0.5 0.12 0.25
Clarysageöljy 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0
Eukalyptusöljy 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5
Citronellaöljy 1.0 2.0 0.8 2.0 0.5 2.0 1.0 2.0
Juniperunan öljyä 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Inkivääriöljy 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Ruusuöljy 1.0 3.0 1.0 3.0 2.0 3.0 1.0 3.0
Fluconazolea 5.0 5.5 5.0 5.5 2.0 2.5 3000 >3000
Amphotericin Ba 2.

2

Kasviöljyjen MIC- ja MFC-arvot neljää Candida albicans -isolaattia vastaan

.

Kasviöljyt/lääkkeet CA I CA II CA III CA IV.
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%)
Lemongrass oil 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0.12
Nelkanlehtiöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Japanilainen öljy 0.06 0.12 0.12 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06
Geraaniöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Kaneliöljy 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03
Motiaroshaöljy 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0.12
Appelsiiniöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 1.0
Ylang-ylang öljy 0.5 1.0 0.25 1.0 0.25 1.0 0.5 1.0
Inkivääriöljy 0.12 0.12 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.12
Piparminttuöljy 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.30 0.30 0.25 0.25
Ocimumöljy 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Sitruunaöljy 0.5 1.0 1.0 2.0 1.0 2.0 0.5 1.0
Kamferiöljy 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0
Rosmariiniöljy 1.0 2.0 1.0 3.0 1.0 3.0 1.0 2.0
Tulsiöljy 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.25
Bergamottiöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0
Teepuuöljy 0.12 0.25 0.25 0.5 0.25 0.5 0.12 0.25
Clarysage oil 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0
Eukalyptusöljy 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5
Citronellaöljy 1.0 2.0 0.8 2.0 0.5 2.0 1.0 2.0
Juniperöljy 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Inkivääriöljy 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Ruusuöljy 1.0 3.0 1.0 3.0 2.0 3.0 1.0 3.0
Fluconazolea 5.0 5.5 5.0 5.5 2.0 2.5 3000 >3000
Amphotericin Ba 2.5 2.5 3.0 3.0 3.0 3.0 2.5 2.5
Kasviöljyt/-lääkkeet CA I CA II CA III CA IV
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%)
Lemongrass oil 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0.12
Nelkanlehtiöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Japanilainen öljy 0.06 0.12 0.12 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06
Geraaniöljy 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Kaneliöljy 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03
Motiaroshaöljy 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0.12
Appelsiiniöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0
Ylang-ylang öljy 0.5 1.0 0.25 1.0 0.25 1.0 0.5 1.0
Inkivääriöljy 0.12 0.12 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.12
Piparminttuöljy 0.25 0.25 0.25 0.25 0.30 0.30 0.25 0.25
Ocimumöljy 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Sitruunaöljy 0.5 1.0 1.0 2.0 1.0 2.0 0.5 1.0
Kamferiöljy 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0
Rosmariiniöljy 1.0 2.0 1.0 3.0 1.0 3.0 1.0 2.0
Tulsiöljy 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.25 0.5 0.25 0.25
Bergamottiöljy 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0
Teepuuöljy 0.12 0.25 0.25 0.5 0.25 0.5 0.12 0.25
Clarysage oil 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0
Eukalyptusöljy 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 1.5 2.5 1.5 2.5
Sitronellaöljy 1.0 2.0 0.8 2.0 0.5 2.0 1.0 2.0
Juniper öljy 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Inkivääriöljy 3.0 >3.0 3.0 >3.0 >3.0 >3.0
Ruusuöljy 1.0 3.0 1.0 3.0 2.0 3.0 1.0 3.0
Fluconazolea 5.0 5.5 5.0 5.5 2.0 2.5 3000 >3000
Amphotericin Ba 2.5 2.5 3.0 3.0 3.0 3.0 2.5 2.5
a

Arvot μg ml-1.

Kaikki neljä isolaattia osoittautuivat herkiksi amfoterisiini B:lle. 2,5 μg ml-1 -pitoisuus amfoterisiini B:tä riitti estämään kanta CAI:n ja kanta CA IV:n (ATCC10231) kasvun kokonaan. Kannat CA II ja CA III tarvitsivat 3 μg ml-1 amfoterisiini B:tä kasvun täydelliseen estämiseen (taulukko 2).

Vasteen flukonatsolille todettiin olevan erilainen. Kanta Ca III oli herkin, ja vain 2 μg ml-1 flukonatsolipitoisuus riitti täydelliseen kasvun estoon. Kannat CA I ja CA II tarvitsivat 5 μg ml-1 flukonatsolia () täydelliseen kasvun estoon (taulukko 2). Kanta CA IV oli erittäin resistentti flukonatsolille: Osittaiseen kasvun estoon tarvittiin 3000 μg ml-1 eli 1500-kertainen MIC-kantaan CA III verrattuna. Täydellistä kasvun estoa ei saavutettu tässä kannassa edes hyvin suurella pitoisuudella.

Kaneliöljyn 0,01 %:n pitoisuus riitti estämään kaikkien neljän isolaatin kasvun täydellisesti. Jasmiini- ja laventeliöljyt aiheuttivat vain lievän kasvun eston eivätkä estäneet kasvua kokonaan. Seitsemän öljyä esti C. albicans -kantojen kasvun kokonaan pitoisuusalueella 0,03-0,15 %. Yhdentoista öljyn MIC-arvo vaihteli 0,16 prosentista 1,0 prosenttiin Viisi öljyä vaati yli 1,0 prosentin pitoisuuden (taulukot 2 ja 3).

3

Kasviöljyjen luokittelu minimifungisidisen pitoisuuden perusteella

.

.

Ryhmä Öljyt MFC MIC ZOI
Tehokkain (0.01-0.15%) Kaneliöljy 0.03 0.01 24.0 (±3.60)
Sitruunaruohoöljy 0.12 0.16 30.3 (±2.50)
Nelsiiniöljy 0.12 0.12 20.3 (±0.50)
Japanilainen minttuöljy 0.06 0.06 26.6 (±3.50)
Geraaniöljy 0.12 0.12 19.0 (±1.73)
Motiaroshaöljy 0.12 0.09 13.6 (±2.88)
Inkivääriöljy 0.12 0.15 16.0 (±3.50)
melko tehokas (0,16-1,0 %) Piparminttuöljy 0,25 0.25 15.6 (±0.50)
Tulsiöljy 0.25 0.25 12.0 (±0.00)
Teepuuöljy 0.25 0.12 14.6 (±2.50)
Kamferiöljy 1.0 0.5 16.3 (±0.50)
Ocimumöljy 1.0 1.0 16.6 (±0.50)
Sitruunaöljy 1.0 0.5 17.6 (±2.08)
Ylang-ylang öljy 1.0 0.5 16.0 (±1.00)
Oranssiöljy 1.0 1.0 25.3 (±1.52)
Vähemmän tehokas (>1.0 %) Bergamottiöljy 2.0 1.0 19.3 (±1.52)
Rosmariiniöljy 2.0 1.0 12.3 (±2.51)
Eukalyptusöljy 3.0 2.0 10.0 (±1.00)
Sitronellaaliöljy 2.0 1.0 06.1 (±1.50)
Ruusuöljy 3.0 1.0 02.0 (±0.00)
Clarysage oil 3.0 2.0 12.3 (±0.50)
Juniper oil >3.0 3.0 05.0 (±0.00)
Inkivääriöljy >3.0 3.0 02.0 (±0.00)
Ei tehoa Chandanöljy 00
Cedripuuöljy 00
Jyotishmati-öljy 00
Jojobaöljy 00
Oliiviöljy 00
Jasmiiniöljy 00
Laventeliöljy 00
Orpl-öljy 00
Manteliöljy 00
Manteliöljy 00
Khusöljy. 00
Neem oil 00
Vehnänalkioöljy 00
Chaulmoograöljy 00
Kadeksen öljyä 00

– –

Ryhmä Ölit MFC MIC ZOI
Tehokkain (0.01-0.15%) Kaneliöljy 0.03 0.01 24.0 (±3.60)
Sitruunaruohoöljy 0.12 0.16 30.3 (±2.50)
Nelsiiniöljy 0.12 0.12 20.3 (±0.50)
Japanin minttuöljy 0.06 0.06 26.6 (±3.50)
Geraniumöljy 0.12 0.12 19.0 (±1.73)
Motiaroshaöljy 0.12 0.09 13.6 (±2.88)
Inkivääriheinäöljy 0.12 0.15 16.0 (±3.50)
Melko tehokas (0.16-1.0%) Piparminttuöljy 0.25 0.25 15.6 (±0.50)
Tulsiöljy 0.25 0.25 12.0 (±0.00)
Teepuuöljy 0.25 0.12 14.6 (±2.50)
Kamferiöljy 1.0 0.5 16.3 (±0.50)
Ocimumöljy 1.0 1.0 16.6 (±0.50)
Sitruunaöljy 1.0 0.5 17.6 (±2.08)
Ylang-ylang-öljy 1.0 0.5 16.0 (±1.00)
Appelsiiniöljy 1.0 1.0 25.3 (±1.52)
Vähemmän tehokas (>1.0%) Bergamottiöljy 2.0 1.0 19.3 (±1.52)
Rosmariiniöljy 2.0 1.0 12.3 (±2.51)
Eukalyptusöljy 3.0 2.0 10.0 (±1.00)
Sitronellaaliöljy 2.0 1.0 06.1 (±1.50)
Ruusuöljy 3.0 1.0 02.0 (±0.00)
Clarysage oil 3.0 2.0 12.3 (±0.50)
Juniper oil >3.0 3.0 05.0 (±0.00)
Inkivääriöljy >3.0 3.0 02.0 (±0.00)
ei tehoa Chandanöljy 00
Sedripuuöljy 00
Jyotishmati-öljy 00
Jojoba-öljy
Oliiviöljy – Jasmiiniöljy
Laventeliöljy 00
Valpähkinäöljy 00
Manteliöljyn valmistusasteet: 1,5 %. 00
Khusöljy 00
Neemöljy 00
Vehnänalkioöljy 00
Khaulmoograöljy 00
Cade-öljy 00

-, tarkoittaa, että se ei ole tehokas.

3

Kasviöljyjen luokittelu pienimmän sienitautia aiheuttavan pitoisuuden perusteella

.

.

Ryhmä Öljyt MFC MIC ZOI
Tehokkain (0.01-0,15 %) Kaneliöljy 0,03 0,01 24,0 (±3.60)
Sitruunaruohoöljy 0.12 0.16 30.3 (±2.50)
Kynsiöljy 0.12 0.12 20.3 (±0.50)
Japanin minttuöljy 0.06 0.06 26.6 (±3.50)
Geraaniöljy 0.12 0.12 19.0 (±1.73)
Motiaroshaöljy 0.12 0.09 13.6 (±2.88)
Inkivääriheinän öljy 0.12 0.15 16.0 (±3.50)
Kohtalaisen tehokas (0.16-1.0 %) Piparminttuöljy 0.25 0.25 15.6 (±0.50)
Tulsiöljy 0.25 0.25 12.0 (±0.00)
Teepuuöljy 0.25 0.12 14.6 (±2.50)
Kamferöljy 1.0 0.5 16.3 (±0.50)
Ocimumöljy 1.0 1.0 16.6 (±0.50)
Sitruunaöljy 1.0 0.5 17.6 (±2.08)
Ylang-ylang-öljy 1.0 0.5 16.0 (±1.00)
Appelsiiniöljy 1.0 1.0 25.3 (±1.52)
Vähemmän tehokas (>1.0%) Bergamottiöljy 2.0 1.0 19.3 (±1.52)
Rosmariiniöljy 2.0 1.0 12.3 (±2.51)
Eukalyptusöljy 3.0 2.0 10.0 (±1.00)
Sitronellaaliöljy 2.0 1.0 06.1 (±1.50)
Ruusuöljy 3.0 1.0 02.0 (±0.00)
Ruusuöljy 3.0 2.0 12.3 (±0.50)
Juniper öljy >3.0 3.0 05.0 (±0.00)
Inkivääriöljy >3.0 3.0 02.0 (±0.00)
Ei tehoa Chandanöljy 00
Cedripuuöljy 00
Jyotishmati-öljy 00
Jojobaöljy 00
Oliiviöljy 00
Jasmiiniöljy 00
Laventeliöljy 00
Orpl-öljy 00
Manteliöljy 00
Manteliöljy 00
Khusöljy. 00
Neem oil 00
Vehnänalkioöljy 00
Chaulmoograöljy 00
Kadeksen öljyä 00

– –

Ryhmä Ölit MFC MIC ZOI
Tehokkain (0.01-0,15 %) Kaneliöljy 0,03 0,01 24,0 (±3.60)
Sitruunaruohoöljy 0.12 0.16 30.3 (±2.50)
Kynsiöljy 0.12 0.12 20.3 (±0.50)
Japanin minttuöljy 0.06 0.06 26.6 (±3.50)
Geraaniöljy 0.12 0.12 19.0 (±1.73)
Motiaroshaöljy 0.12 0.09 13.6 (±2.88)
Inkivääriheinän öljy 0.12 0.15 16.0 (±3.50)
Kohtalaisen tehokas (0.16-1.0 %) Piparminttuöljy 0.25 0.25 15.6 (±0.50)
Tulsiöljy 0.25 0.25 12.0 (±0.00)
Teepuuöljy 0.25 0.12 14.6 (±2.50)
Kampferöljy 1.0 0.5 16.3 (±0.50)
Ocimumöljy 1.0 1.0 16.6 (±0.50)
Sitruunaöljy 1.0 0.5 17.6 (±2.08)
Ylang-ylang-öljy 1.0 0.5 16.0 (±1.00)
Appelsiiniöljy 1.0 1.0 25.3 (±1.52)
Vähemmän tehokas (>1.0%) Bergamottiöljy 2.0 1.0 19.3 (±1.52)
Rosmariiniöljy 2.0 1.0 12.3 (±2.51)
Eukalyptusöljy 3.0 2.0 10.0 (±1.00)
Sitronellaaliöljy 2.0 1.0 06.1 (±1.50)
Ruusuöljy 3.0 1.0 02.0 (±0.00)
Ruusuöljy 3.0 2.0 12.3 (±0.50)
Juniper öljy >3.0 3.0 05.0 (±0.00)
Inkivääriöljy >3.0 3.0 02.0 (±0.00)
ei tehoa Chandanöljy 00
Setripuuöljy 00
Jyotishmati-öljy 00
Jojoba-öljy
Oliiviöljy – Jasmiiniöljyä
Laventeliöljy 00
Valpähkinäöljy 00
Manteliöljyn valmistusasteet: 1.1.1. 00
Khusöljy 00
Neemöljy 00
Vehnänalkioöljy 00
Khaulmoogra öljy 00
Cade-öljy 00

-, tarkoittaa, että se ei ole tehokas.

3.3 Kasviöljyjen MFC:n määrittäminen C. albicansia vastaan

Minimi fungisidinen konsentraatio (MFC) määritellään pienimmäksi öljypitoisuudeksi, joka johtaa 99,9 %:n inokulumin kuolemaan. Kaikki kasvua estävät öljyt osoittivat sienitautia ehkäisevää aktiivisuutta lukuun ottamatta jasmiini- ja laventeliöljyjä. Yleisesti havaittiin, että sienitoksellinen pitoisuus oli korkeampi kuin MIC-arvo, lukuun ottamatta muutamia tapauksia, kuten piparminttuöljyä, geraniumöljyä, ocimumöljyä, neilikkaöljyä ja inkiväärinurmikkaöljyä, jotka aiheuttivat 99,9 %:n inokulumin kuoleman MIC-arvolla. Tehokkaat öljyt voitiin luokitella kolmeen luokkaan niiden MFC:n perusteella ATCC10231:tä vastaan. Tehokkaimpina (ME) pidetään öljyjä, jotka aiheuttivat fungisidisen vaikutuksen 0,03-0,15 prosentin pitoisuudessa. Öljyt, jotka vaativat 0,15-1,0 prosentin pitoisuuden, kuuluvat kohtalaisen tehokkaaseen ryhmään (MoE). Yli 1,0 %:n pitoisuudessa sienitautia aiheuttaviksi todettuja öljyjä pidetään vähemmän tehokkaina (LE).

Seitsemän öljyä todettiin tehokkaimmiksi (ME) (taulukot 2 ja 3). Kaneliöljy oli paras, sillä sillä oli sienitautia ehkäisevä vaikutus 0,03 %:n pitoisuudessa kaikkiin neljään C. albicans -isolaattiin. Kynsienkynsiöljy oli fungisidinen 0,12 prosentin pitoisuudessa, eikä MIC- ja MFC-arvojen välillä ollut eroa. Suurimmalla osalla ME-öljyistä sienitautia aiheuttavaan vaikutukseen tarvittiin 2-4-kertainen MIC-arvo. Candida-isolaattien vaste joihinkin tämän ryhmän jäseniin oli erilainen, eli kanta CA II japaninminttuöljyn ja inkiväärinruohoöljyn osalta, CA III sitruunaruohoöljyn osalta ja CA IV inkiväärinruohoöljyn osalta (taulukko 2).

Piparminttuöljy ja teepuuöljy olivat parhaita seitsemästä MoE-jäsenestä koostuvassa ryhmässä aiheuttaen sienitautia aiheuttavan vaikutuksen konsentraatiossa, joka oli 0,25 %:n pitoisuus (taulukko 3). Tulsiöljy oli sienitautia aiheuttava 0,5 %:n pitoisuudessa, 1 %:n pitoisuudessa Kampfer-, Sitruuna-, Ocimum- ja Ylang-ylang-öljyjen MFC. Herkkyyseroja havaittiin myös muutamien tämän ryhmän jäsenten osalta. Näiltä öljyiltä vaadittiin kaksinkertainen MIC-arvo lukuun ottamatta piparminttuöljyä ja Ocimum-öljyä (taulukko 2).

Yhdeksän öljyn todettiin olevan vähemmän tehokkaita (taulukko 3). Nämä öljyt vaativat yli 1,0 %:n pitoisuuden sienitautia ehkäisevän vaikutuksen aikaansaamiseksi. Näiden öljyjen MFC vaihteli 1,0 %:sta 3 %:iin lukuun ottamatta jasmiini-, inkivääri- ja katajanmarjaöljyä, jotka eivät olleet fungisidisiä 3 %:n pitoisuuteen asti. CA II ja CA III osoittivat erilaista herkkyyttä (taulukot 2 ja 3).

4 Pohdinta

Joidenkin eteeristen öljyjen, kuten teepuuöljyn, anti-candida-aktiivisuus on hyvin tunnettu . Monet C. albicansin aiheuttaman emättimen kandidiaasin torjuntaan käytetyt valmisteet sisältävät aktiivisena aineosana teepuuöljyä . Useita kasviperäisiä öljyjä on ehdotettu käytettäväksi vaihtoehtoisissa lääkkeissä mikrobiologisia infektioita vastaan, mukaan lukien kandidiaasi ja ientulehdus . Atsoliset sienilääkkeet ja niiden johdannaiset ovat kuitenkin edelleen vallitsevassa asemassa Candida-infektioiden ensisijaisina lääkkeinä paikallisina sovelluksina tai suun kautta otettavina lääkkeinä . Teepuuöljyä lukuun ottamatta, jota on käytetty Australiassa yli 80 vuotta, markkinoille ei ole tullut monia kasviperäisiä tuotteita. Joitakin rosmariiniöljyä sisältäviä tuotteita käytetään hilseilyä aiheuttavia sieniä vastaan. Eteeristen öljyjen, kuten teepuu-, sitruunaruoho-, sitronella-, piparminttu- ja palmarosaöljyjen in vitro -aktiivisuutta Candida-ihottumaa vastaan on raportoitu. Olemme tutkineet 38 kasviperäisen öljyn in vitro anti-Candida-aktiivisuutta neljää C. albicans -isolaattia vastaan (taulukot 1 ja 2). Ainakin 23 testatuista öljyistä osoittautui lupaaviksi tehoaineiksi. Nämä öljyt voitiin luokitella niiden tehon mukaan (taulukko 3). Yksi flukonatsolille resistentiksi todetuista isolaateista inhiboitui hyvin pienillä pitoisuuksilla kaikista tässä tutkimuksessa testatuista tehokkaista kasviperäisistä öljyistä (taulukko 2).

Kiekkodiffuusiomääritys on vakiomenetelmä, jota käytetään laajalti luontaistuotteiden nopeaan seulontaan sienilääkkeiden aktiivisuuden suhteen. Olemme seuloneet kasviöljyjä käyttämällä tätä erittäin kätevää määritysmenetelmää. Tämä tutkimus osoittaa, että varovaisuus on tarpeen, koska eri öljyillä voi olla erilainen diffuusionopeus agar-levyillä, ja tämä voi osaltaan vaikuttaa inhiboivien vyöhykkeiden vaihteluun, mikä johtaa virheellisiin johtopäätöksiin niiden antifungaalisesta aktiivisuudesta. Esimerkiksi jotkin öljyistä, joiden inhibitiovyöhykkeet olivat pienempiä kuin muiden, olivat erittäin tehokkaita Candida-kantoja vastaan NCCLS:n liemilaimennusmäärityksessä, johon ei liity diffuusiota. Esimerkiksi kaneliöljyn ZOI oli 24 mm levydiffuusiomäärityksessä, kun taas sitruunaruohoöljyn ZOI oli 30 mm. MFC-määrityksessä kaneliöljy (0,01 %) osoittautui kuitenkin sitruunaruohoöljyä (0,06 %) paremmaksi. Sienitautien torjunta-aktiivisuutta pidetään sienilääkkeiden toivottuna ominaisuutena, koska se voi poistaa sienen kokonaan kudoksista. Amfoterisiini B on fungisidinen, sen tiedetään olevan erittäin tehokas ihmisen patogeenisiä sieniä vastaan, ja sitä käytetään valintalääkkeenä systeemisissä sieni-infektioissa sen vakavista sivuvaikutuksista huolimatta. Flukonatsoli, laajalti määrätty sienilääke Candida-infektioita vastaan, on luonteeltaan fungistaattinen ja saattaa vaatia pitkäaikaista käyttöä .

On rohkaisevaa huomata, että suurin osa tässä tutkimuksessa käytetyistä öljyistä oli sienitautia aiheuttavia pieninä pitoisuuksina. Candida-kasvua estävien luontaistuotteiden vaikutustavasta ei ole paljon tietoa. Tuleviin tutkimuksiin on otettava mukaan enemmän flukonatsoli-/atsoliresistenttejä kantoja. Kasviöljyjä voitaisiin käyttää anti-Candida-aineina atsolille resistenttejä kantoja vastaan. Useimpia tässä tutkimuksessa käytetyistä öljyistä on käytetty pitkään elintarvikkeissa, makeisissa ja hajusteiden ainesosina. Jos niitä kuitenkin harkitaan käytettäväksi paikallisissa valmisteissa, on tutkittava huolellisesti niiden todennäköisiä ärsyttäviä ja muita ei-toivottuja vaikutuksia ihmisiin.

Kiitokset

Tekijät ovat kiitollisia tohtori S.A. Suryawanshille, kunniakkaalle varakanslerille, SRTM-yliopistolle, Nanded (MS), Intia, kannustuksesta.

Ibrahim
A.S.

Prasad
R.

Ghannoum
M.A.

(

1996

)

Antifungals

In: (

Prasad
R.

Ghannoum
M.A.

Eds.), pp.

235

252

.

CRC press

,

New York, Lontoo

.

Majumdar
M.K.

(

1998

)

Ykyiset tärkeät lääkkeet pinnallisten sieni-infektioiden hoidossa

.

Indian Drugs
36

,

1

13

.

Elewski
B.E.

(

1998

)

Onychomycosis: patogeneesi, diagnoosi ja hoito

.

Clin. Microbiol. Rev.
11

(

3

),

415

429

.

Stevens
D.A.

(

1998

)

Yhdistelmäimmunoterapia ja antifungaalinen solunsalpaajahoito

.

Clin.Infect. Dis.
26

,

1266

1269

.

Sheehan
D.J.

Hitchcock
C.A.

Sibley
C.M.

(

1999

)

Current and emerging azole antifungal agents

.

Clin. Microbiol. Rev.
12

(

1

),

40

79

.

Carrillo-Muñoz
A.J.

Quindos
G.

Tur
C.

Ruesga
M.

R.

Del Valle
O.

Rodriguez
V.

Arevalo
M.P.

Salgado
J.

Martin-Mazuelos
E.

Bornay-Llinares
F.J.

Del Palacio
A.

Cuetara
M.

Gasser
I.

Hernandez-Molina
J.M.

Peman
J.

(

2000

)

Comparative in vitro antifungaalinen aktiivisuus Amphotericin B lipidikompleksin, Amfoterisiini B:n ja flukonatsolin

.

Kemoterapia
46

,

235

244

.

Young
L.Y.

Hull
C.M.

Heitman
J.

(

2003

)

Distribution of ergosterol biosynthesis confers resistance to amphotericin B in Candida lusitaniae

.

Antimicrob. Agents Chemother.
47

,

2717

2724

.

Bodley
G.P.

(

1992

)

Azole antifungal agents

.

Clin.Infect. Dis.
14

(

1

),

S161

S169

.

Goa
K.L.

Barradell
L.B.

(

1995

)

Fluconazole, an update of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties and therapeutic use in major superficial and systemic mycoses in immunocompromised patients

.

Drugs
50

,

658

690

.

Kontoyiannins
D.P.

Tarrands
J.

Prince
R.

Samonis
G.

Rolston
K.V.

(

2001

)

Flukonatsolin vaikutus Candida albicansin

.

J. Med. Microbiol.
50

,

78

82

.

Sanglard
D.

Ischer
F.

F.

Parkinson

T.
Bille
J.

(

2003

)

Candida albicans mutations in the ergosterol biosynthetic pathway and resistance to several antifungal agents

.

Antimicrob. Agents Chemother.
47

,

2404

2412

.

Rex
J.H.

Rinaldi
M.G.

Pfaller
M.A.

(

1995

)

Resistance of Candida species to Fluconazole

.

Antimicrob. Agents Chemother.
39

,

1

8

.

Albertson
G.D.

Niimi
M.

Cannon
R.D.

Jenkinson
H.F.

(

1996

)

Multiple efflux mechanisms are involved in Candida albicans fluconazole resistance

.

Antimicrob. Agents Chemother.
40

,

2835

2841

.

(

2000

)

A novel multidrug efflux transporter gene of the major facilitator superfamily from Candida albicans (FLU1) conferring resistance to fluconazole

.

Microbiology
146

,

2743

2754

.

Mukherjee
P.K.

Chandra
J.

D.

(

2003

)

Mechanism of fluconazole resistance in Candida albicans biofilms: phase-specific role of efflux pumps and membrane sterols

.

Infection and Immunity
71

(

8

),

4333

4343

.

Deans
S.G.

(

1991

)

Eteeristen (haihtuvien) öljyjen mikrobilääkkeiden aktiivisuuden arviointi. Modern Methods of Plant Analysis, New Series

In:

Essential Oils and Waxes

(

Linskens
H.F.

Jackson
J.F.

Eds.), Vol. 12, pp.

309

318

.

Springer Verlag

,

Berliini

.

Chowdhary
A.R.

Tripathi
S.

(

2002

)

Eteeristen öljyjen soveltaminen lääketieteessä

.

J. Arom. Med. Pl. Sci.
22

(

Suppl. 1

).

Patra
M.

Shahi

S.K.

S.

(

2003

)

Utilization of pericarp of Citrus sinensis oil for the development of natural antifungal against nail infections

.

Curr. Sci.
84

,

1512

1515

.

Carson
C.F.

Riley
T.V.

(

1994

)

Propionibakteeri bacterium acnes:n herkkyys Melaleuca alternifolian eteeristen öljyjen vaikutuksille

.

Lett. Appl. Microbiol.
19

,

24

25

.

Carson
C.F.

Riley
T.V.

(

1995

)

Antimikrobinen aktiivisuus tärkeimpien ainesosien pääkomponentteihin eteerisen öljyn Melaleuca alternifolia

. ”J. J.”. Appl. Bacteriol.

78

,

264

269

.

Marti
J.

(

1995

)

Vaihtoehtoisen terveyden ja lääketieteen tietosanakirja

.

Gale International Inc.

,

Detroit, MI

.

Nenoff
P.

Haustein
U.F.

Brandt
W.

(

1996

)

Antifungal activity of the essential oils of Melaleuca alternifolia (Tea tree oil) against pathogenic fungi in vitro

.

Skin Pharmacol.
9

(

6

),

388

394

.

(

1998

)

Eteeristen öljyjen, erityisesti Melaleuca alternifolia (teepuu) öljyn ja teepuuöljytuotteiden in vitro aktiivisuus Candida sps:tä vastaan

.

J. Antimicrob. Chemother.
42

,

591

595

.

National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS)

(

1997

)

Julkaisu M27-A: Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts; Approved Standard

.

Wayne

,

PA: NCCLS

, vol. 17 (9), pp.

1

28

Hammer
K.A.

Carson
C.F.

Riley
T.V.

(

1999

)

Eteeristen öljyjen ja muiden kasviuutteiden antimikrobinen aktiivisuus

.

J. Appl. Microbiol.
86

,

985

990

.

Hammer
K.A.

Carson
C.F.

K.A.V.

(

2000

)

Melaleuca alternifolia (Teepuu) öljy estää Candida albicansin

itiöputkien muodostumista.

Med. Mycol.
38

,

355

362

.

Saikia
D.

Khanuja
S.P.S.

Kahol
A.
Kumar
S.

(

2001

)

Comparative antifungaalinen aktiivisuus eteeristen öljyjen ja ainesosien vertaileva aktiivisuus kolmesta eri genotyypistä peräisin olevista eteerisistä öljyistä ja ainesosista, jotka ovat peräisin kolmesta eri genotyypistä, jotka ovat peräisin lajista nimeltä: Cymbopogon spp

.

Curr. Sci.
80

,

1264

1266

. (

1996

)

Susceptibility of transient and commensal skin flora to the essential oil of Melaleuca alternifolia (Tea tree) oil

.

Am. J. Infection Control
24

,

186

189

.

Jain
S.K.

Agrawal
S.C.

(

2002

)

Fungistatic activity of some perfumes against otomycotic pathogens

.

Mycoses
45

,

88

90

.

Altman
P.M.

(

1995

)

Australialainen teepuuöljy

.

Aust. J. Pharmacy
69

,

276

278

.

Bauer
K.

Garbe
D.

Surburg
H.

(

1997

)

Luonnolliset raaka-aineet maku- ja hajusteollisuudessa

.In:

Common Fragrances and Flavor Materials

, pp.

167

226

.

Wiley-VCH

,

New York

.

Kokate
C.K.

Purohit
A.P.

Gokhale
S.B.

1999

) In: (

Furia
D.K.

, Ed.).

Nirali Prakashan

,

New Delhi

.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.