Sperman ja munanjohtimen vuorovaikutus

Fertilisaatio tapahtuu munanjohtimen erikoistuneella alueella, jota kutsutaan ampullaksi, jossa siittiöt tunkeutuvat munasolun solunulkoisiin kuoriin (cumulussolut ja zona pellucida). Munasolun ja siittiöiden saapuminen munatorveen ei ole aina synkronoitu tapahtuma, sillä joillakin lajeilla (esim. koira) munasolu vapautuu kaksi tai kolme päivää ennen hedelmöittymistä, kun taas toisilla lajeilla (esim. lepakot) siittiöitä on naaraan sukuelimissä jopa kuusi kuukautta ennen ovulaatiota (Holt, 2011). Näin ollen munanjohtimen ympäristö tarjoaa oletettavasti hyvän ympäristön sukusolujen selviytymiselle ja kypsymiselle.

Munanjohdin pystyy suorittamaan erilaisia toimintoja, koska siinä on erilaisia anatomisia alueita (kuva 2) ja monimutkainen munanjohtimen neste, joka on dynaaminen johtuen muutoksista, joita tuotetaan oestroussyklin aikana (Yañiz ym., 2006; Leese ym., 2008; Avilés ym., 2010). Tätä monimutkaisuutta on viime aikoina alettu ymmärtää tehokkaiden analyysivälineiden kehittämisen ansiosta. Esimerkiksi useita satoja proteiineja (pilkkuja) voidaan tunnistaa, kun munanjohdinnestettä analysoidaan biokemiallisesti (kuva 3). Kaksiulotteisen elektroforeesin avulla saadaan kvalitatiivista ja kvantitatiivista tietoa eri proteiineista (täplien lukumäärä ja määrä), joita oviductanesteessä on. Tällaisella analyysillä voidaan havaita proteiineissa tapahtuvat hienovaraiset muutokset (esim. fosforylaatio), jotka riippuvat estroosisyklistä tai sukusolujen läsnäolosta. Yllättäviä tuloksia ovat muun muassa muutokset, joita tapahtuu munatorven transkriptomissa sukusolujen tai alkioiden läsnäolon vuoksi (Fazeli ym., 2004; Georgiou ym., 2007; Almiñana ym., 2012). Vielä spesifisempiä muutoksia havaittiin alkion kehitysvaiheesta riippuen (nelisoluinen alkio tai blastokysta), mikä sai aikaan kohdussa vaikuttavien immuniteettiin liittyvien geenien alasääntelyn jo ennen alkion saapumista tähän elimeen (Almiñana ym., 2012). Lisäksi muutoksia havaittiin myös X- tai Y-kromosomilla varustettujen siittiöiden läsnäollessa (Almiñana ym., 2014). Geenien (transkriptomi) ja proteiinien (proteomi) ilmentyminen munatorvessa on yhteistä useille lajeille, mutta ne eivät ole identtisiä, mikä viittaa siihen, että jotkin toiminnot ovat konservoituneita; näyttää kuitenkin siltä, että jotkin muut erityisominaisuudet ovat ainutlaatuisia kullekin lajille (Bauersachs ym., 2003, 2004; Tone ym., 2008; Mondéjar ym., 2012). Tämä olisi otettava huomioon kehitettäessä spesifisiä laimennusaineita ja viljelymedioita eri lajeille.

Gamettien suojaaminen ja eloonjääminen

On raportoitu, että munatorven nesteen läsnäololla on positiivinen vaikutus siittiöiden elinkelpoisuuteen (Killian, 2011) ja että munatorvi tarjoaa munasolujen eloonjäämisen kannalta välttämättömiä ravintoaineita ja oksidansseja ehkäiseviä entsyymejä munatorven nesteessä (Leese ym, 2008; Avilés ym., 2010). Nämä entsyymit ovat erityisen tärkeitä siittiöille, koska ne vaurioituvat helposti altistuessaan reaktiivisille happilajeille (ROS), jotka muuttavat plasmakalvoa (proteiinien ja lipidien peroksidaatio), mikä voi johtaa DNA-katkoksiin (Aitken ja Luliis, 2010). Lisäksi siittiöitä pidetään naisen sukuelimissä vierassoluina, mikä vaikuttaa siittiöiden selviytymiseen immunologisen valvonnan vuoksi (Kawano ym., 2014). Se, miten tätä prosessia säädellään, on vielä selvittämättä, mutta kiistatonta on, että oviductusympäristö suojelee siittiöitä. Tätä tukevana todisteena voidaan pitää sitä, että siittiöt voivat selviytyä munatorvessa yhdestä tai kahdesta päivästä lehmien tai emakoiden tapauksessa aina 6 kuukauteen lepakoiden tapauksessa (Holt, 2011).

Oosyytin kypsyminen munatorvessa

Oosyytin eliniän munatorvessa on raportoitu olevan ihmisellä noin 24 tuntia, mikä on samanlainen useimmilla tähän mennessä analysoiduilla lajeilla. Koira on kuitenkin erikoinen, koska munasarjasta ovulaation yhteydessä vapautuva munasolu on kypsymätön ja sen on oleskeltava munatorvessa 2-3 d kypsyäkseen ennen hedelmöittymistä (Tsutsui ym., 2009). Joillakin lajeilla koeputkihedelmöityksen (IVF) tehokkuus on edelleen alhainen, mikä johtuu pääasiassa ART-tekniikoiden riittämättömästä standardoinnista (Mondéjar ym., 2012). Kaksi hypoteesia, jotka liittyvät munasolun kypsymiseen munanjohtimessa, voidaan kuitenkin ottaa huomioon selittämään in vivo ja in vitro -hedelmöitystehon eroja: (i) Munatorvessa tapahtuvat tapahtumat eivät ole perustavanlaatuisia, mutta koska niitä ei tapahdu in vitro -menetelmien aikana, vain korkealaatuisimmat munasolut jäävät eloon. Tämä olisi syy pienempään onnistumisprosenttiin ART:ssä verrattuna in vivo -tapahtumiin. (ii) In vitro -menetelmissä käytettävät munasolut ovat heikompilaatuisia kuin ne, jotka fysiologisesti oviductuksessa ovuloituvat ja hedelmöittyvät, mikä johtaa alkioihin, joilla on muutoksia ei-välttämättömissä mutta aikuisiän terveyden kannalta tärkeissä ominaisuuksissa, kuten epigeneettisissä merkeissä (El Hajj ja Haaf, 2013). Useat munatorven nesteessä olevat proteiinit voivat sitoutua munasolun solunulkoiseen vaippaan, jota kutsutaan zona pellucidaksi (ZP), ja muuttaa sekä sen proteiini- että hiilihydraattikoostumusta. Niinpä ovidukti-spesifisen glykoproteiinin (OVGP1), osteopontinin, lipokaliinityyppisen prostaglandiini-D-syntaasin ja laktoferriinin osoitettiin assosioituvan eri lajien ZP:hen (Goncalves, ym., 2008). OVGP1 on tutkituin ZP:hen assosioituva proteiini, ja sen rooli hedelmöittymistä edeltävässä ZP:n kovettumisessa, joka vähentää polyspermiaa sialla, on osoitettu (Coy ym., 2008).

Monia siittiöiden ja ZP:n väliseen sitoutumiseen ja yleiseen hedelmöittymisprosessiin osallistuvia mekanismeja (jotka säätelevät polyspermian mahdollisuutta) moduloidaan munanjohtimessa. Hedelmöitystä edeltävän ZP:n kovettumisen osalta koesarja, jossa käytettiin yhdeksän lajin munasoluja ja viiden lajin oviductal-nestettä, osoitti, että munasolun lyhyt inkubointi oviductal-nesteen kanssa saa aikaan selvän muutoksen ZP:n vastustuskyvyssä entsyymin sulatusta vastaan (Mondéjar ym., 2013). Saadut tulokset eivät kuitenkaan olleet identtisiä, mikä viittaa tietynasteiseen spesifisyyteen, joka voi johtua i) oviductaalinesteen erilaisista proteiinikoostumuksista tai jopa erilaisesta proteiinisekvenssistä, jota ortologinen geeni koodaa, kuten OVGP1:n osalta osoitettiin (Avilés ym., 2010), tai ii) erilaisesta ZP:n koostumuksesta (proteiini ja hiilihydraatti; Stetson ym., 2012). Osa lajien välisistä eroista voi johtua jopa proteiinin puuttumisesta, kuten OVGP1:n tapauksessa hevosella ja rotalla. Lisäksi hevosella siittiö ei pysty hedelmöittämään munasolua in vitro; kun munasolua kuitenkin inkuboidaan sian oviductaalinesteellä tai oviductaaliproteiinilla DMBT1, hedelmöittymisnopeus kasvaa huomattavasti (Ambruosi et al., 2013), mikä osoittaa munatorven merkityksen tässä lajissa.

Spermat munatorvessa

Spermat tarttuvat munatorven epiteeliin istukan alueella. Tämä sitoutuminen on vastuussa siittiöiden varaston muodostumisesta odottamaan ovulaation ajankohtaa. Tällainen sitoutuminen ei ole tärkeää ainoastaan siittiöiden elinkelpoisuuden säilyttämiseksi vaan myös ennenaikaisen kapasitaation estämiseksi, mikä vaarantaisi tai jopa estäisi hedelmöittymisen. Siittiöiden vapautumista tästä säiliöstä näyttävät välittävän eri tekijät, mukaan lukien cumulus-oocyte-kompleksin (COC) välittämät signaalit, siittiöiden sitoutumista muuttavat oviductan komponentit sekä muutokset progesteroni- ja estradiolipitoisuuksissa ja siittiöiden hyperaktivaatiomotiliteetti (Suarez, 2006, 2008; Kölle ym., 2006, 2008), 2009; Talevi ja Gualtieri, 2010; Coy ym., 2012).

Ejakulaation yhteydessä vapautuvat siittiöt eivät pysty hedelmöittämään munasolua, vaan niiden on oleskeltava naisen sukuelimissä, ennen kuin ne saavat kyvyn viedä hedelmöittymisprosessin loppuun. Erilaiset biologiset muutokset, jotka siittiöt käyvät läpi naisen sukuelinkanavassa, tunnetaan kapasitaatioksi, jonka Austin (1951) ja Chang (1951) löysivät itsenäisesti käyttäen kania eläinmallina. Tähän prosessiin liittyvää yksityiskohtaista molekyylimekanismia ei vielä tunneta, mikä johtuu pääasiassa siitä, että on vaikea selvittää, mitä munanjohtimen sisällä todella tapahtuu. Siittiöissä havaitut muutokset voivat johtua proteiinien uudelleen jakautumisesta tai vapautumisesta, vaikka myös muut tekijät voivat olla osallisina (Yanagimachi, 1994; Florman ja Ducibella, 2006). On raportoitu, että siittiöt muuttuvat sitoutumalla erilaisiin oviductan proteiineihin (osteopontin ja OVGP1), jotka yleisesti ottaen lisäävät siittiöiden elinkelpoisuutta, liikkuvuutta ja kapasitaatiota useilla lajeilla (Kan ym., 2006; Killian, 2011). OVGP1 ei siis ainoastaan kykene sitomaan ZP:tä ja siittiöitä, vaan se pystyy myös lisäämään siittiöiden proteiinifosforylaatiota, joka liittyy siittiöiden kapasitaatioon (Kan ym., 2006). Muut naudan ja sian siittiöiden kapasitaatioon liittyvät mekanismit liittyvät erilaisten glykosidaasien läsnäoloon munatorven nesteessä (Carrasco ym., 2008) ja munatorven epiteeleissä (Ma ym., 2012). Lisäksi hiljattain kuvattiin sialidaasin vapautuminen siittiöiden plasmakalvosta kapasitaation aikana (Ma ym., 2012). Nämä glykosidaasit voivat moduloida siittiöiden sitoutumista oviductan epiteeliin ja siten niiden vapautumista siittiöiden säiliöstä. Aivan äskettäin kuvattiin ensimmäistä kertaa uuden mekanismin olemassaolo, joka vastaa pienten vesikkelien (eksosomien) välittämistä spesifisistä muutoksista siittiöiden kulkiessa munatorven läpi (Al-Dossary ym., 2013). Viimeaikaiset tutkimukset, joissa on käytetty geneettisesti muunneltuja hiiriä, ovat antaneet vahvaa näyttöä naaraan sukupuolielinten merkityksestä siittiöiden hedelmällisyyteen (Kawano ym., 2010; Turunen ym., 2012). Tällaiset muunnetut hiiret ovat subfertiilejä tai eivät kykene hedelmöittämään munasolua IVF-tekniikalla. Nämä geneettisesti muunnetut uroshiiret ovat kuitenkin hedelmällisiä in vivo. Todettiin, että niiden siittiöt pystyvät hedelmöittämään munasolun IVF-tekniikalla, kun niitä inkuboidaan kohdun eritteiden kanssa, ja tämä prosessi saattaa olla edellä kuvatun mukaisesti eksosomien välittämä (Kawano ym., 2010). Naisen sukuelinten eritteitä voitaisiin käyttää parantamaan siittiöiden hedelmöityskykyä in vitro sellaisten urosten kohdalla, joilla on tärkeää geneettistä arvoa mutta muutoin heikko hedelmällisyys.

Gamettien ja alkioiden kuljetus munatorvessa

Gamettien ja alkioiden on oltava oikeassa paikassa oikeaan aikaan; näin ollen munatorvella on merkittävä osuus tässä prosessissa. Siittiöiden on päästävä munatorven ampulliin hedelmöittääkseen munasolun. Hedelmöityksen jälkeen zygootti ja varhaiset alkiot on kuljetettava kohtuun, jotta blastokysta voi istua kohdun limakalvoon. Tähän liittyvä mekanismi ei kuitenkaan ole niin yksinkertainen kuin oletetaan.

Oosyyttien ja alkioiden kuljetus

Oosyytit ja alkiot ovat liikkumattomia. Munasoluja ympäröi suuri määrä soluja (cumulus-soluja) ovulaation aikaan, jolloin ne muodostavat cumulus oophorus -nimisen rakenteen, jonka infundibulum vangitsee (kuva 2). Niillä ei ole kykyä liikkua kuten siittiöillä, ja ne on kuljetettava passiivisesti. On raportoitu, että pienet muutokset cumuluksen laajenemisessa vaikuttavat cumulus-oocyytti-kompleksien alustavaan kiinnittymiseen infundibulumin epiteeliin, mikä vaikeuttaa niiden kuljetusta eteenpäin (Suarez, 2006). Munasolun kuljetukseen hedelmöittymispaikalle osallistuu kaksi olennaista osatekijää: sileiden lihassolujen (myosalpinx eli lihaskerros) koordinoitu supistuminen munanjohtimen pituussuunnassa ja epiteelisolujen sädekehän lyönti (kuva 4). Jos munatorven supistukset muuttuvat, munasolu ei pääse hiirillä hedelmöityskohtaan (Dixon ym., 2009). Alkioita ja munasoluja kuljetetaan eri nopeudella tamman ja rotan munatorvessa (Suarez, 2006). Näin ollen alkioiden tuottama prostaglandiini E2 osallistuu tähän prosessiin. Hiljattain raportoitiin, että alkiot aiheuttavat muutoksia oviductuksen geeniekspressiossa ja voivat näin ollen muokata omaa ympäristöään (Almiñana ym., 2012).

Sperman kuljetus

Huolimatta siemensyöksyn aikana vapautuvien siittiöiden suuresta määrästä (yli 40 miljoonaa ja 37.5 miljardia ihmisellä ja villisialla), vain harvat siittiöt pääsevät ampulliin (100-1000 ja 5000 ihmisellä ja villisialla), ja suuri osa heitetään pois (Harper, 1994; Hunter, 2012a; Suarez, 2006). Siittiöiden vähäisen määrän läsnäolo hedelmöityskohdassa tarkoittaa, että munasolun ja siittiöiden suhde on lähes 1:1. Tämä on tärkeää, koska lukuisat siittiöt lisäisivät polyspermiaa, joka on nisäkkäiden alkioille tappava (Hunter, 2012a). Mekanismia, jolla siittiöt löytävät munasolut, ei vielä tunneta. Viimeaikaiset tutkimukset viittaavat siihen, että siittiöt saavuttavat hedelmöittymispaikan kemotaksis- ja/tai termotaksismekanismin ansiosta (Eisenbach ja Giojalas, 2006; Hunter, 2012b), prosessien, jotka olisivat vastuussa siittiöiden ohjaamisesta munatorven yläosaan. On ehdotettu, että asiaan liittyy kemiallinen gradientti, jota välittää kumulussolujen tuottama progesteroni (Eisenbach ja Giojalas, 2006; Coy ym., 2012; Guidobaldi ym., 2012). Hiiret, jotka tuottavat denudoituneita munasoluja, eivät hedelmöity in vivo; nämä munasolut voidaan kuitenkin hedelmöittää in vitro, mikä viittaa tämän rakenteen merkitykseen in vivo -tilanteeseen (Zhuo ym., 2001). Nämä tutkimukset osoittavat cumulus oophoruksen merkityksen ja muistuttavat meitä siitä, että in vitro -mallien avulla saadut tiedot edellyttävät huolellista tulkintaa; lisäksi ne korostavat tarvetta tarkempiin in vitro -malleihin, jotka jäljittelevät in vivo -ympäristöä tarkemmin. Tähän mennessä edistyminen tällä rintamalla on ollut hidasta. Olisi odotettavissa, että siittiöiden pääsy munanjohtimeen olisi suhteellisen yksinkertainen prosessi, joka riippuisi kohdun lihasten supistumisesta ja siittiöiden liikkuvuudesta kemo- tai termotaksiksen ohjaamana. On kuitenkin osoitettu, että siittiöt eivät kykene ylittämään kohdun munanjohtimen risteystä, kun jokin siittiöiden proteiineista (esim. ADAM3) on muuntunut (Okabe, 2013). Jää vielä selvittämättä, mikä spesifinen molekulaarinen vuorovaikutus on olemassa siittiöiden ja munanjohtimen välillä, joka mahdollistaa siittiöiden pääsyn munanjohtimeen.

Munanjohtimen ympäristön vaikutus alkion kehitykseen

Tieto siitä, että alkioita voidaan saada in vitro ja että luovuttajat, joilla ei ole omia alkioita kohdussa, pystyvät saamaan alkionsiirron jälkeen raskauden aikaiseksi, kylläkin kylläkin kylläkin kylläkin kylläkin kylläkin, horjuttaa munanjohtimen roolia. Eri lajeilla on kuitenkin osoitettu, että munatorvessa viljeltyjen alkioiden jälkeen saatu blastokysta on laadultaan parempi kuin in vitro tuotetut alkiot, ainakin morfologian, geeniekspression, kryotoleranssin ja siirron jälkeisen tiinehtymisprosentin osalta (Rizos ym., 2007; 2010a; Mondéjar ym., 2012; Van Soom ym., 2014). Tämä osoittaa, että munanjohtimet eivät ole elin, joka pelkästään kuljettaa zygootin/varhaisen alkion kohdun läpi, vaan että niiden välillä on kommunikaatiota. Alkion kehityksen ensimmäiset vaiheet tapahtuvat munatorvessa, jossa alkio viettää noin 4-5 vuorokautta riippumatta siitä, että munatorven pituudessa on havaittu suuria eroja useilla lajeilla (vertaa kuvat 1 ja 2b; Suarez, 2006; Wang ja Dey, 2006). Tänä aikana tapahtuu useita merkittäviä tapahtumia, joista ensimmäinen on pilkkoutumisprosessi ja siirtyminen äidin genomista alkion genomiin. Kaikki viljely-ympäristön muutokset, jotka vaikuttavat johonkin näistä prosesseista, voivat vaikuttaa merkittävästi blastokystan laatuun (Lonergan ym., 2003a). Hiljattain raportoitiin, että viljelyolosuhteiden muuttaminen in vivo -olosuhteista in vitro -olosuhteisiin tai päinvastoin alkion varhaiskehityksen tietyssä vaiheessa, joko ennen tai jälkeen alkion genomin aktivoitumisen, vaikuttaa ratkaisevasti tuloksena syntyvien blastokystien geeniekspressiomalleihin (Gad ym., 2012). Lisäksi alun perin havaittiin, että alkion pilkkoutuminen (solujen jakautuminen) estyy (kahden solun vaihe hiirillä ja kahdeksan solun vaihe lehmällä), kun in vitro -viljelyolosuhteet eivät ole optimaaliset. Hiirillä alkionkehityksen estyminen saatiin ohitettua sen jälkeen, kun munasarjaproteiinia OVGP1 lisättiin elatusaineeseen (Yong ym., 2002). Useat kokeelliset tutkimukset ovat osoittaneet, että eri lajien oviductilla on samanlaiset biologiset ominaisuudet, mikä on yhdenmukaista samanlaisten transkriptomisten ja proteomisten profiilien kanssa (Mondéjar ym., 2012). Näin ollen tietyn lajin munatorvea voidaan käyttää parantamaan toisen lajin alkionkehitystä prosessissa, jota kutsutaan hetorologiseksi kokeeksi. Naudan, hiiren, kanin ja lampaan munanjohtimia on käytetty alkioiden viljelyyn heterologisissa tai homologisissa in situ munanjohtimissa parempilaatuisten alkioiden tuottamiseksi monista lajeista (Rizos ym., 2002a, 2010a; Lazzari ym., 2010). Kaikki munatorven ja alkion väliset yhteydet ovat tarkoin säädeltyjä; esimerkiksi naudoilla vain yksi alkio kehittyy in vivo, kun taas in vitro alkioiden viljely ryhmissä on välttämätöntä, jotta blastokystien kehitysnopeus olisi korkeampi (Goovaerts ym., 2009).

Tulevaisuuden näkymät: Basic Science Will Improve the Efficiency of Assisted Reproductive Techniques

Voidaan olettaa, että ART:n tehokkuus paranee yhtä nopeasti kuin tietomme in vivo -prosessista lisääntyvät. Tietämyksemme in vitro -ympäristöistä perustuu suurelta osin kokeiluihin ja erehdyksiin eikä niinkään täsmälliseen tietämykseen sukusolujen ja alkioiden tarpeista; siksi ART tarjoaa väistämättä suboptimaalisen ympäristön, mikä johtaa biokemiallisten signaalien epäyhtenäiseen repertuaariin. Munanjohtimen erityskomponenttien tuntemus tarjoaa hyödyllistä tietoa eri ART-tekniikoiden parantamiseksi, millä on merkittäviä taloudellisia ja terveyteen liittyviä seurauksia. Näin ollen joitakin hedelmättömyyden ja perimän säilymisen kattavia lajien säilytysprotokollia parannetaan väistämättä. ART:n kehittyminen on tapahtunut eriasteisesti eri lajeissa, mikä osoittaa, että hedelmöittymisprosessi on samanlainen mutta ei identtinen kaikissa lajeissa (Mondéjar ym., 2012; Van Soom ym., 2014), joten suositellaan tulevaa tutkimusta eri eläinmalleissa. Munatorvi on äärimmäisen tärkeä munasoluille, siittiöille ja alkioille. In vivo munatorvi edistää siittiöiden suojelua ja kypsymistä. Tieto siitä, miten tätä prosessia säädellään, mahdollistaa näiden havaintojen ekstrapoloinnin sellaisten erilaisten siemennesteen laimentimien (ns. pidennysaineiden) parantamiseen, jotka parantavat siittiöiden elinvoimaisuutta ja laatua siemennesteen varastoinnissa, kryosäilytyksessä, keinosiemennyksessä, IVF:ssä ja sukupuolilajittelussa. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että oviductaalisten proteiinien lisääminen siittiöiden laimennusaineisiin parantaa sukupuolilajiteltujen siittiöiden hedelmöityskykyä ja eloonjäämistä (Klinc ja Rath, 2007; Lloyd ym., 2012). Oviductan biologian yksityiskohtainen tutkimus edistää ymmärrystämme oviductan kautta tapahtuvasta munasolujen kypsymisestä ja tarjoaa uusia välineitä eloonjäämisen ja meioosikompetenssin parantamiseen, polyspermian hallintaan ja siittiöiden tunkeutumiseen. Lopuksi tarjoamme todisteita oviductuksen merkityksestä kehitettäessä parempia elatusaineita alkioiden kehitystä ja selviytymistä varten kryosäilytyksen jälkeen. Yhteenvetona voidaan todeta, että vuosikymmeniä kestäneet munatorven fysiologiaan liittyvät tieteelliset perustutkimukset ovat antaneet tärkeää tietoa in vivo -hedelmöityksestä ja auttaneet saavuttamaan tavoitteita, joita harva olisi voinut kuvitellakaan. Olemme vakuuttuneita siitä, että lähitulevaisuudessa uusi tieto, joka on tuotettu oviductuksen sukusoluihin ja alkioihin tuottamasta vaikutuksesta, parantaa ART:n tehokkuutta, mistä on ilmeistä terveydellistä ja taloudellista hyötyä.

Pahoittelemme, että emme ole tilan rajallisuuden vuoksi ottaneet mukaan kaikkia niitä asiaankuuluvia artikkeleja, jotka ovat myötävaikuttaneet tämän alan kehitykseen. Haluamme kiittää kaikkia laboratorioidemme jäseniä heidän tieteellisestä panoksestaan näiden vuosien aikana. Kirjoittajat kiittävät tohtori Alejandro Torrecillasia ja Omar Salvador Acuñaa kuvien 3 ja 4 laatimisesta. Espanjan talous- ja kilpailukykyministeriö ja Euroopan komissio (FEDER/ERDF) tukivat D. Rizosin (AGL2012-37510), P. Coyn (AGL2012-40180-C03-01) ja M. Avilésin (AGL2012-40180-C03-02) tutkimusta. M. Avilésia tukee myös Fundación Séneca de la Región de Murcia (0452/GERM/06).

Manuel Avilés on apulaisprofessori solubiologian ja histologian laitoksella Murcian yliopiston lääketieteellisessä ja hoitotieteellisessä tiedekunnassa (Espanja). Hän väitteli tohtoriksi vuonna 1997 Murciassa tutkimalla munasolun solunulkoista vaippaa nimeltä zona pellucida ja sen muutoksia hedelmöityksen jälkeen. Hän kehitti tutkimustoimintaa Queen’s Universityssä (Kingston, Kanada), Emory Universityssä (Atlanta, Yhdysvallat) ja Lehigh Universityssä (Bethlehem, Yhdysvallat). Hänen pääasialliset tutkimusintressinsä keskittyvät molekyylimekanismeihin, jotka liittyvät siittiöiden ja munasolun välisen tunnistamisen spesifisyyteen, sekä siihen, miten munanjohtimet vaikuttavat sukusolujen kypsymiseen.

Dimitrios Rizos väitteli tohtoriksi vuonna 2002 University College Dublinista (Irlanti) ja toimi sen jälkeen post doc -tutkijana. Vuonna 2004 hän sai viisivuotisen tutkijanviran eläinten lisääntymisosastolta (INIA, Madrid, Espanja), ja vuodesta 2006 lähtien hän on ollut vanhempi tutkija ja preimplantaatioembryologian laboratorion johtaja. Hän keskittyy nisäkkäiden varhaiseen alkionkehitykseen in vivo ja in vitro sekä alkion laatuun, emon ja alkion vuorovaikutusta ohjaaviin mekanismeihin, lypsylehmien hedelmättömyyttä aiheuttaviin tekijöihin sekä strategioihin, joilla voidaan vähentää alkionmenetyksiä ja lisätä tiineyksiä. Hän on julkaissut yli 70 vaikuttavaa artikkelia, yli 100 tiivistelmää, useita tutkimushankkeita ja tehnyt kansainvälistä yhteistyötä.

Pilar Coy on lisääntymisfysiologian professori eläinlääketieteellisessä tiedekunnassa Murcian yliopistossa Espanjassa. Hän väitteli tohtoriksi vuonna 1990 in vitro -hedelmöityksestä sioilla Murcian yliopistossa. Hän on tehnyt väitöskirjaa edeltävää ja sen jälkeistä tutkimustyötä Bolognan yliopistossa (Italia), Kalifornian Davisin yliopistossa (Yhdysvallat), Babraham-instituutissa Cambridgessa (Iso-Britannia), Tennesseen yliopistossa (Yhdysvallat) ja Institute of Zoology -instituutissa (Lontoo, Iso-Britannia). Hänen tärkeimmät tutkimustavoitteensa keskittyvät munatorven fysiologisen ympäristön tutkimiseen hedelmöityksen aikana ja sukusolujen vuorovaikutukseen vaikuttavien munatorvitekijöiden tunnistamiseen.

Viitattu kirjallisuus

.