Abstract
Minimalne stężenia hamujące (MICs) i minimalne stężenia grzybobójcze (MFCs) zostały określone dla 38 olejków pochodzenia roślinnego przeciwko Candida albicans. W badaniach wykorzystano cztery szczepy, w tym jeden szczep standardowy. Jako kontrolę pozytywną zastosowano środki przeciwgrzybicze: flukonazol i amfoterycynę B. Szczep standardowy (ATCC10231) użyty w badaniach okazał się wysoce oporny na flukonazol: 3000 μg ml-1 flukonazolu było wymagane do częściowego zahamowania wzrostu tego szczepu, a całkowitego zahamowania nie udało się osiągnąć. Inne szczepy Candida były wrażliwe na flukonazol w dawce 5 μg ml-1. Wszystkie użyte szczepy były wrażliwe na amfoterycynę B. Spośród 38 badanych olejków 23 uznano za skuteczne, a piętnaście za nieskuteczne. Na podstawie ich MFC, skuteczne olejki podzielono na trzy kategorie. Siedem olejków, które wywierały działanie grzybobójcze przy stężeniu olejków poniżej 0,15%, zaliczono do klasy najbardziej skutecznych. Oleje wykazujące MFC w zakresie 0,16-1,5% stężenia uznano za umiarkowanie skuteczne. Dziewięć olejków, które wymagały stężenia powyżej 1,5%, uznano za mniej skuteczne. Szczep oporny na flukonazol (MTCC 227) był wrażliwy na co najmniej 23 z olejków roślinnych. Wyniki tego badania wskazują, że olejki pochodzenia roślinnego mogą znaleźć zastosowanie jako potencjalne środki anty-Candida.
1 Wstęp
Amfoterycyna B i flukonazol są dwoma ważnymi środkami stosowanymi w chemioterapii przeciwgrzybiczej przeciwko grzybom chorobotwórczym człowieka . Amfoterycyna B jest stosowana jako lek z wyboru u nieuleczalnie chorych pacjentów. Lek azolowy, Flukonazol jest szeroko przepisywany przeciwko różnym infekcjom Candida albicans. Nawet jeśli bardzo powszechnie uznany za ich skuteczność , leki te są znane, aby mieć skutki uboczne . Flukonazol jest lekiem o działaniu fungistatycznym i istnieją doniesienia o pojawieniu się oporności na flukonazol wśród klinicznych izolatów C. albicans. Dlatego też istnieje zapotrzebowanie na lepsze, nowe środki przeciwgrzybicze przeciwko infekcjom wywołanym przez C. albicans, które są skuteczne i mają mniej skutków ubocznych.
Wiele naturalnych środków, takich jak produkty roślinne, w tym ekstrakty, oleje, itp. są tradycyjnie stosowane przeciwko różnym dolegliwościom. Niektóre z produktów roślinnych są skuteczne przeciwko infekcjom grzybiczym i bakteryjnym. Olejki eteryczne, takie jak olejek z drzewa herbacianego, olejek z trawy cytrynowej, olejek Citronella, olejek Palmarosha i niektóre z ich składników zostały przetestowane przeciwko wzrostowi in vitro C. albicans.
Sprawdziliśmy skuteczność in vitro 38 olejków roślinnych przeciwko czterem izolatom C. albicans. Podano minimalne stężenia hamujące (MIC) i minimalne stężenia grzybobójcze (MFC) skutecznych olejków. W oparciu o ich skuteczność (MFC), olejki podzielono na trzy kategorie.
2 Materiały i metody
2.1 Substancje chemiczne i szczepy
W badaniach wykorzystano szczep standardowy, szczep typu ATCC10231 (MTCC 227/CA IV), szczep referencyjny sugerowany do oznaczania amfoterycyny B, oraz trzy izolaty kliniczne C. albicans. Trzy kliniczne izolaty C. albicans, viz. SRTCC I (CA I), SRTCC II (CA II), SRTCC III (CA III), zostały uzyskane z SRTCC Culture Collection Center, School of Life Sciences, SRTM University, Nanded (MS). Indie. Szczep standardowy został zakupiony z The Institute of Microbial Technology (IMTECH), Chandigarh, India.
W badaniach wykorzystano 38 olejów roślinnych. Niektóre z olejów zostały uprzejmie dostarczone przez Central Institute of Medicinal and Aromatic Plants (CIMAP), Lucknow, Indie, a pozostałe oleje i leki przeciwgrzybicze, Amfoterycyna B i Flukonazol zostały zakupione na lokalnym rynku.
2.2 Przygotowanie inokuli
Wszystkie szczepy C. albicans użyte w tym badaniu hodowano w temperaturze 30 °C przez 24 h w inkubatorze z wytrząsaniem, używając podłoża Yeast Extract Peptone i podłoża Sabourauda Dextrose. Komórki zbierano przez odwirowanie, zawieszano w sterylnej wodzie destylowanej i natychmiast używano. Liczbę komórek określano przy użyciu hemocytometru i dostosowywano do 5 × 106 cfu ml-1.
2.3 Badanie olejków roślinnych pod kątem aktywności anty-Candida metodą dyfuzyjną
Aktywność anty-Candida 38 olejków roślinnych badano standardową metodą dyfuzyjną. Przygotowano płytki Sabouraud Dextrose Agar i posiano na nich 5 × 106 cfu ml-1 używając inokul szczepów Candida przygotowanych jak wyżej. Aseptycznie, 5 μl olejków roślinnych nanoszono punktowo na krążki bibuły filtracyjnej o średnicy 5 mm (Whatman nr 1). Krążki te następnie przeniesiono na środek posianych płytek. Do każdego stężenia użyto trzech płytek i inkubowano w temperaturze 30 ± 2 °C. Średnicę strefy zahamowania mierzono po 48-godzinnej inkubacji.
2.4 Określanie minimalnego stężenia hamującego (MIC) olejków roślinnych metodą rozcieńczeń agarowych
Minimalne stężenia hamujące (MIC) olejków roślinnych określano metodą rozcieńczeń agarowych (23) Płytki agarowe przygotowywano, dodając agar YPD zawierający różne stężenia olejków roślinnych (tj. 0,03-3% v/v). Tween 20 0,5% (v/v) dodawano w celu zwiększenia rozpuszczalności olejków. Płytki inokulowano 103 jtk, używając inokul szczepów Candida przygotowanych jak wyżej. Płytki przechowywano w trzech egzemplarzach dla każdego stężenia. Jako kontrolę wykorzystano płytki z Tween 20, ale bez oleju roślinnego. Wszystkie te płytki inkubowano w temperaturze 30 ± 2 °C. Płytki obserwowano i liczono liczbę kolonii po 48 h inkubacji. Wartości MIC określono jako najniższe stężenie olejku uniemożliwiające widoczny wzrost szczepów Candida .
2.5 Określenie minimalnego stężenia grzybobójczego (MFC) olejków roślinnych metodą makrorozcieńczeń w bulionie
Minimalne stężenie grzybobójcze (MFC) olejków roślinnych określono metodą makrorozcieńczeń w bulionie (NCCLS M27-A, metoda referencyjna zalecana do badania wrażliwości drożdży na leki przeciwgrzybicze). Olejek roślinny w różnych stężeniach (0,03-3% v/v) przygotowywano w kolbach na podłożu bulionowym YPD. W celu zwiększenia rozpuszczalności olejku dodano Tween 80 w końcowym stężeniu 0,001% (v/v). Do każdej kolby inokulowano 5 × 105 jtk ml-1 szczepów Candida. Jako kontrolę wykorzystano kolby zawierające Tween 20, ale pozbawione oleju roślinnego. Kolby inkubowano w temperaturze 30 ± 2 °C, w inkubatorze z wytrząsaniem orbitalnym (100 rpm) przez 48 h. Z każdej kolby 5 μl hodowli inokulowano na płytki YPD i inkubowano w temperaturze 30 ± 2 °C przez 48 h. Płytki obserwowano i określano MFC jako najniższe stężenie olejku roślinnego całkowicie hamujące wzrost szczepów Candida.
3 Wyniki
3.1 Badanie olejków roślinnych pod kątem aktywności anty-Candida
Badane izolaty C. albicans wykazywały różną wrażliwość na olejki. Jednak większość olejków okazała się skuteczna i wykazywała znaczną aktywność już przy bardzo niskich stężeniach. Dwadzieścia pięć spośród 38 badanych olejków powodowało powstanie 1-30 mm strefy zahamowania (ZOI). Siedemnaście olejków spowodowało powstanie ZOI o wielkości 10-20 mm. Sześć olejków wykazało 1-9 mm ZOI wobec wszystkich czterech badanych szczepów. Olejek jaśminowy i lawendowy nie hamowały wzrostu szczepów Candida z wyjątkiem CA IV. (Tabela 1). (13 olejków nie zdołało zahamować wzrostu szczepów C. albicans w dawkach 5μl.)
Screening of plant oils for anti-Candida activity
| Oleje roślinne | CAI | CA II | CA III | CA IV | ||
| ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | |||
| Olej z trawy cytrynowej | 30.0 (±0) | 30.0 (±0) | 27.3 (±2.51) | 30.3 (±2.51) | ||
| Olej z liści goździkowca | 27.0 (±1.0) | 30,0 (±4,35) | 22,0 (±3,0) | 20,3 (±0,57) | ||
| Olejek cynamonowy | 25.0 (±0) | 24.3 (±4.93) | 26.3 (±2.3) | 24.0 (±3.6) | ||
| Japoński olejek miętowy | 20,0 (±0) | 21,0 (±1,0) | 20,3 (±2,51) | 26.6 (±3,51) | ||
| Olej geranium | 20,0 (±0) | 20,3 (±0,57) | 18,0 (±3.0) | 19,0 (±1,73) | ||
| Olej Motiarosha | 21,3 (±0,57) | 20,3 (±3.05) | 14,0 (±2,0) | 13,6 (±2,88) | ||
| Olej pomarańczowy | 29,0 (±3,60) | 23.0 (±4,35) | 23,0 (±2,0) | 25,3 (±1,52) | ||
| Olejek ylang-ylang | 24.0 (±1.0) | 21.6 (±0.57) | 13.3 (±0.57) | 16.0 (±1.0) | ||
| Olej z trawy pomarańczowej | 20,0 (±4,35) | 25,3 (±2,51) | 18,3 (±0,57) | 16,0 (±3.60) | ||
| Olejek z mięty pieprzowej | 15,0 (±0) | 15,3 (±0,57) | 10,3 (±2.51) | 15,6 (±0,57) | ||
| Olej ośmiornikowy | 19,3 (±0,57) | 17,3 (±0.57) | 10,6 (±4,04) | 16,6 (±0,57) | ||
| Olej cytrynowy | 13,3 (±0,57) | 17.6 (±0,57) | 16,3 (±0,57) | 17,6 (±2,08) | ||
| Olejek kamforowy | 13.0 (±1.0) | 11.0 (±2.64) | 13.3 (±2.08) | 16.3 (±3.21) | ||
| Olejek rozmarynowy | 8,3 (±0,57) | 10,0 (±2,64) | 8,3 (±1,52) | 12,3 (±2.51) | ||
| Olej tulsi | 12,6 (±4,04) | 12,0 (±0) | 10,3 (±1,52) | 12.0 (±0) | ||
| Olejek bergamotowy | 16.0 (±1.0) | 22.3 (±2.51) | 17.3 (±2,08) | 19,3 (±1,52) | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 17,0 (±1,0) | 24,0 (±1.0) | 11,0 (±1,73) | 14,6 (±2,51) | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 11,6 (±0.57) | 12,0 (±1,0) | 8,3 (±2,51) | 12,3 (±0,57) | ||
| Olejek eukaliptusowy | 7.0 (±0) | 9.0 (±1.0) | 6.3 (±0.57) | 10.0 (±1.0) | ||
| Olej cytronelowy | 7,3 (±0,57) | 9,0 (±1,0) | 8,0 (±1,0) | 6.6 (±1,52) | ||
| Olej jałowcowy | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | |||
| Olejek imbirowy | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olej różany | 0 (±0) | 0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olejek jaśminowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olejek lawendowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olej chandan | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej cedrowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Olej Jyotishmati | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej jojoba | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z oliwek | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z oliwek | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z orzechów włoskich | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej migdałowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej khusa | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej neem | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z kiełków pszenicy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej chabrowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej Cade | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Oleje roślinne | CAI | CA II | CA III | CA IV | ||
| ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | |||
| Olej z trawy cytrynowej | 30.0 (±0) | 30.0 (±0) | 27.3 (±2.51) | 30.3 (±2.51) | ||
| Olej z liści goździkowca | 27.0 (±1.0) | 30,0 (±4,35) | 22,0 (±3,0) | 20,3 (±0,57) | ||
| Olejek cynamonowy | 25.0 (±0) | 24.3 (±4.93) | 26.3 (±2.3) | 24.0 (±3.6) | ||
| Japoński olejek miętowy | 20,0 (±0) | 21,0 (±1,0) | 20,3 (±2,51) | 26,6 (±3.51) | ||
| Olej geranium | 20,0 (±0) | 20,3 (±0,57) | 18,0 (±3.0) | 19,0 (±1,73) | ||
| Olej Motiarosha | 21,3 (±0,57) | 20,3 (±3.05) | 14,0 (±2,0) | 13,6 (±2,88) | ||
| Olej pomarańczowy | 29,0 (±3,60) | 23.0 (±4,35) | 23,0 (±2,0) | 25,3 (±1,52) | ||
| Olejek ylang-ylang | 24.0 (±1.0) | 21.6 (±0.57) | 13.3 (±0.57) | 16.0 (±1.0) | ||
| Olej z trawy pomarańczowej | 20,0 (±4,35) | 25,3 (±2,51) | 18,3 (±0,57) | 16,0 (±3.60) | ||
| Olejek z mięty pieprzowej | 15,0 (±0) | 15,3 (±0,57) | 10,3 (±2.51) | 15,6 (±0,57) | ||
| Olej ośmiornikowy | 19,3 (±0,57) | 17,3 (±0.57) | 10,6 (±4,04) | 16,6 (±0,57) | ||
| Olej cytrynowy | 13,3 (±0,57) | 17.6 (±0,57) | 16,3 (±0,57) | 17,6 (±2,08) | ||
| Olejek kamforowy | 13.0 (±1.0) | 11.0 (±2.64) | 13.3 (±2.08) | 16.3 (±3.21) | ||
| Olejek rozmarynowy | 8,3 (±0,57) | 10,0 (±2,64) | 8,3 (±1,52) | 12,3 (±2.51) | ||
| Olej tulsi | 12,6 (±4,04) | 12,0 (±0) | 10,3 (±1,52) | 12,0 (±0) | ||
| Olej bergamotowy | 16.0 (±1,0) | 22,3 (±2,51) | 17,3 (±2,08) | 19,3 (±1,52) | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 17,0 (±1,0) | 24.0 (±1,0) | 11,0 (±1,73) | 14,6 (±2,51) | ||
| Olejek z krokosza barwierskiego | 11,6 (±0,57) | 12,0 (±1,0) | 8.3 (±2,51) | 12,3 (±0,57) | ||
| Olejek eukaliptusowy | 7,0 (±0) | 9,0 (±1,0) | 6,3 (±0,57) | 10,0 (±1.0) | ||
| Olej cytronelowy | 7,3 (±0,57) | 9,0 (±1,0) | 8,0 (±1,0) | 6,6 (±1,52) | ||
| Olej jałowcowy | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | ||
| Olej imbirowy | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olej różany | 0 (±0) | 0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olejek jaśminowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olejek lawendowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olej chandanowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej cedrowy | 0 (±0) | 0. (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej jojotishmati | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej jojoba olej | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Oliwa z oliwek | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej rzepakowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej z orzechów włoskich | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej migdałowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej khusa | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej neem | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Olej z kiełków pszenicy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Olej haulmoogra | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej kadeitowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
ZOI: strefa zahamowania. Wartości w nawiasach wskazują odchylenie standardowe.
Badanie olejów roślinnych pod kątem aktywności przeciwCandida activity
| Oleje roślinne | CAI | CA II | CA III | CA IV | ||
| ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | |||
| Olej z trawy cytrynowej | 30.0 (±0) | 30.0 (±0) | 27.3 (±2.51) | 30.3 (±2.51) | ||
| Olej z liści goździkowca | 27.0 (±1,0) | 30,0 (±4,35) | 22,0 (±3,0) | 20,3 (±0,57) | ||
| Olejek cynamonowy | 25.0 (±0) | 24,3 (±4,93) | 26,3 (±2,3) | 24,0 (±3,6) | ||
| Olejek z mięty japońskiej | 20,0 (±0) | 21,0 (±1.0) | 20,3 (±2,51) | 26,6 (±3,51) | ||
| Olejek geraniowy | 20,0 (±0) | 20,3 (±0,57) | 18,0 (±3,0) | 19.0 (±1,73) | ||
| Motiarosha oil | 21,3 (±0,57) | 20,3 (±3,05) | 14,0 (±2,0) | 13,6 (±2.88) | ||
| Olejek pomarańczowy | 29,0 (±3,60) | 23,0 (±4,35) | 23,0 (±2,0) | 25,3 (±1,52) | ||
| Olejek ylang-ylang | 24.0 (±1,0) | 21,6 (±0,57) | 13,3 (±0,57) | 16,0 (±1,0) | ||
| Olejek z trawy pomarańczowej | 20,0 (±4,35) | 25.3 (±2,51) | 18,3 (±0,57) | 16,0 (±3,60) | ||
| Olejek z mięty pieprzowej | 15,0 (±0) | 15,3 (±0,57) | 10,3 (±2.51) | 15,6 (±0,57) | ||
| Olej ośmiornikowy | 19,3 (±0,57) | 17,3 (±0,57) | 10,6 (±4,04) | 16,6 (±0.57) | ||
| Olejek cytrynowy | 13,3 (±0,57) | 17,6 (±0,57) | 16,3 (±0,57) | 17,6 (±2,08) | ||
| Olejek kamforowy | 13.0 (±1,0) | 11,0 (±2,64) | 13,3 (±2,08) | 16,3 (±3,21) | ||
| Olejek rozmarynowy | 8,3 (±0,57) | 10,0 (±2.64) | 8,3 (±1,52) | 12,3 (±2,51) | ||
| Olej tulsi | 12,6 (±4,04) | 12,0 (±0) | 10,3 (±1,52) | 12.0 (±0) | ||
| Olejek bergamotowy | 16.0 (±1.0) | 22.3 (±2.51) | 17.3 (±2.08) | 19.3 (±1.52) | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 17,0 (±1,0) | 24,0 (±1,0) | 11,0 (±1,73) | 14,6 (±2,51) | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 11.6 (±0.57) | 12.0 (±1.0) | 8.3 (±2.51) | 12.3 (±0.57) | ||
| Olejek eukaliptusowy | 7,0 (±0) | 9,0 (±1,0) | 6,3 (±0,57) | 10,0 (±1.0) | ||
| Olej cytronelowy | 7,3 (±0,57) | 9,0 (±1,0) | 8,0 (±1,0) | 6.6 (±1,52) | ||
| Olej jałowcowy | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | |||
| Olejek imbirowy | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olej różany | 0 (±0) | 0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olejek jaśminowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olejek lawendowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olej chandan | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej cedrowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Olej Jyotishmati | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej jojoba | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z oliwek | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z oliwek | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z orzechów włoskich | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej migdałowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej khusa | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej neem | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej z kiełków pszenicy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej chabrowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej Cade | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Oleje roślinne | CAI | CA II | CA III | CA IV | ||
| ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | ZOI (mm) | |||
| Olej z trawy cytrynowej | 30.0 (±0) | 30.0 (±0) | 27.3 (±2.51) | 30.3 (±2.51) | ||
| Olej z liści goździkowca | 27.0 (±1.0) | 30,0 (±4,35) | 22,0 (±3,0) | 20,3 (±0,57) | ||
| Olejek cynamonowy | 25,0 (±0) | 24.3 (±4,93) | 26,3 (±2,3) | 24,0 (±3,6) | ||
| Olejek z mięty japońskiej | 20,0 (±0) | 21,0 (±1.0) | 20,3 (±2,51) | 26,6 (±3,51) | ||
| Olejek geraniowy | 20,0 (±0) | 20,3 (±0,57) | 18.0 (±3,0) | 19,0 (±1,73) | ||
| Olej Motiarosha | 21,3 (±0,57) | 20,3 (±3,05) | 14,0 (±2.0) | 13,6 (±2,88) | ||
| Olej pomarańczowy | 29,0 (±3,60) | 23,0 (±4,35) | 23,0 (±2,0) | 25.3 (±1,52) | ||
| Olejek ylang-ylang | 24,0 (±1,0) | 21,6 (±0,57) | 13,3 (±0,57) | 16.0 (±1,0) | ||
| Olej z trawy pomarańczowej | 20,0 (±4,35) | 25,3 (±2,51) | 18,3 (±0,57) | 16,0 (±3.60) | ||
| Olejek z mięty pieprzowej | 15,0 (±0) | 15,3 (±0,57) | 10,3 (±2,51) | 15,6 (±0.57) | ||
| Olej imbirowy | 19,3 (±0,57) | 17,3 (±0,57) | 10,6 (±4,04) | 16,6 (±0,57) | ||
| Olej cytrynowy | 13.3 (±0,57) | 17,6 (±0,57) | 16,3 (±0,57) | 17,6 (±2,08) | ||
| Olejek kamforowy | 13.0 (±1,0) | 11,0 (±2,64) | 13,3 (±2,08) | 16,3 (±3,21) | ||
| Olejek rozmarynowy | 8,3 (±0.57) | 10,0 (±2,64) | 8,3 (±1,52) | 12,3 (±2,51) | ||
| Olejek tulsi | 12,6 (±4,04) | 12.0 (±0) | 10,3 (±1,52) | 12,0 (±0) | ||
| Olejek bergamotowy | 16,0 (±1,0) | 22,3 (±2,51) | 17.3 (±2,08) | 19,3 (±1,52) | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 17,0 (±1,0) | 24,0 (±1,0) | 11,0 (±1.73) | 14,6 (±2,51) | ||
| Olej chloroformowy | 11,6 (±0,57) | 12,0 (±1,0) | 8,3 (±2,51) | 12,3 (±0.57) | ||
| Olejek eukaliptusowy | 7,0 (±0) | 9,0 (±1,0) | 6,3 (±0.57) | 10,0 (±1,0) | ||
| Olejek cytronelowy | 7,3 (±0,57) | 9,0 (±1.0) | 8,0 (±1,0) | 6,6 (±1,52) | ||
| Olejek jałowcowy | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | 5.0 (±0) | ||
| Olej imbirowy | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olejek różany | 0 (±0) | 0 (±0) | 2.0 (±0) | 2.0 (±0) | ||
| Olejek jaśminowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olejek lawendowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 1.0 (±0) | ||
| Olej chandanowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej cedrowy | 0 (±0) | 0. (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej jojotishmati | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej jojoba oil | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olive oil | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej rzepakowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej z orzechów włoskich | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej migdałowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej khusa | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | ||
| Olej neem | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Olej z kiełków pszenicy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
| Olej haulmoogra | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | |
| Olej kadeitowy | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) | 0 (±0) |
ZOI: strefa zahamowania. Wartości w nawiasach oznaczają odchylenie standardowe.
3.2 Określenie MIC olejków roślinnych przeciwko C. albicans
W stosunku do czterech izolatów C. albicans określono MIC 23 skutecznych olejków oraz dwóch powszechnie przepisywanych leków, flukonazolu i amfoterycyny B. Olejki wykazywały zależne od stężenia zahamowanie wzrostu. W kilku przypadkach badane szczepy wykazywały różną wrażliwość, ale nie było istotnych różnic w MIC (tab. 2).
MIC i MFC olejków roślinnych wobec czterech izolatów Candida albicans
| Oleje roślinne/leki | CA I | CA II | CA III | CA IV | ||||||
| MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MFC (%) | |
| Olej z trawy cytrynowej | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 | 0.06 | 0.12 | ||
| Olejek z liści goździków | 0,12 | 0,12 | 0,12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | ||
| Olej japoński | 0.06 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 | ||
| Olej geranium | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | ||
| Olej cynamonowy | 0,01 | 0,03 | 0,01 | 0,03 | 0,01 | 0.03 | 0,01 | 0,03 | ||
| Olej Motiarosha | 0,06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.09 | 0.12 | ||
| Olej pomarańczowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 1.0 | ||
| Olejek ylang-ylang | 0.5 | 1.0 | 0.25 | 1.0 | 0.25 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | ||
| Olej z trawy pomarańczowej | 0,12 | 0,12 | 0,15 | 0.15 | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,12 | ||
| Olejek z mięty pieprzowej | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.30 | 0.30 | 0.25 | 0,25 | ||
| Olej imbirowy | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | ||
| Olejek cytrynowy | 0.5 | 1.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 0.5 | 1.0 | ||
| Olej kamforowy | 0,5 | 1,0 | 0,5 | 1,0 | 0.5 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | ||
| Olejek rozmarynowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 2.0 | ||
| Olej tulsi | 0,25 | 0,5 | 0,25 | 0,5 | 0.25 | 0,5 | 0,25 | 0,25 | ||
| Olejek bergamotowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | ||
| Olej z drzewa herbacianego | 0,12 | 0,25 | 0,25 | 0.5 | 0,25 | 0,5 | 0,12 | 0,25 | ||
| Olej klarowany | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | ||
| Olejek eukaliptusowy | 1,5 | 2,5 | 1,5 | 2.5 | 1,5 | 2,5 | 1,5 | 2,5 | ||
| Olejek cytronelowy | 1.0 | 2.0 | 0.8 | 2.0 | 0.5 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | ||
| Olej jałowcowy | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | ||
| Olej imbirowy | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | ||
| Olej różany | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 1,0 | 3,0 | ||
| Fluconazolea | 5,0 | 5,5 | 5,0 | 5.5 | 2.0 | 2,5 | 3000 | >3000 | ||
| Amfoterycyna Ba | 2,5 | 2.5 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 2.5 | 2.5 | ||
| Oleje roślinne/leki | CA I | CA II | CA III | CA IV | |||||||
| MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MIC (%) | MFC (%) | |
| Olej z trawy cytrynowej | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 | 0.06 | 0.12 | |||
| Olejek z liści goździkowca | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | ||||
| Olej japoński | 0.06 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 | |||
| Olej geranium | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | |||
| Olejek cynamonowy | 0.01 | 0.03 | 0.01 | 0.03 | 0.01 | 0.03 | 0,01 | 0,03 | |||
| Olej Motiarosha | 0,06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.09 | 0.12 | |||
| Olej pomarańczowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 1.0 | |||
| Olejek ylang-ylang | 0.5 | 1.0 | 0.25 | 1.0 | 0.25 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | |||
| Olej z trawy pomarańczowej | 0,12 | 0,12 | 0,15 | 0,15 | 0.15 | 0,15 | 0,15 | 0,12 | |||
| Olejek z mięty pieprzowej | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.30 | 0.30 | 0.25 | 0.25 | |||
| Olej ośmiornicowy | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | |||
| Olejek cytrynowy | 0.5 | 1.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 0.5 | 1.0 | |||
| Olej kamforowy | 0,5 | 1,0 | 0,5 | 1,0 | 0.5 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | |||
| Olejek rozmarynowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 2.0 | |||
| Olej tulsi | 0,25 | 0,5 | 0,25 | 0,5 | 0.25 | 0,5 | 0,25 | 0,25 | |||
| Olejek bergamotowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | |||
| Olej z drzewa herbacianego | 0,12 | 0,25 | 0,25 | 0.5 | 0,25 | 0,5 | 0,12 | 0,25 | |||
| Olej klarowany | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | |||
| Olejek eukaliptusowy | 1.5 | 2.5 | 1.5 | 2.5 | 1,5 | 2,5 | 1,5 | 2,5 | |||
| Olejek cytronelowy | 1.0 | 2,0 | 0,8 | 2,0 | 0,5 | 2,0 | 1,0 | 2,0 | |||
| Olej jałowcowy | 3,0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | |||
| Olej imbirowy | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | |||
| Olej różany | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | |||
| Fluconazolea | 5.0 | 5.5 | 5.0 | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 3000 | >3000 | |||
| Amfoterycyna Ba | 2.5 | 2,5 | 3,0 | 3,0 | 3,0 | 3,0 | 2,5 | 2,5 | |||
Wartości w μg ml-1.
MIC i MFC olejów roślinnych wobec czterech izolatów Candida albicans
.
| Oleje roślinne/leki | CA I | CA II | CA III | CA IV | ||||||
| MIC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MFC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MIC (%) | MFC (%) | |
| Olej z trawy cytrynowej | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 | 0.06 | 0.12 | ||
| Olejek z liści goździkowca | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | ||
| Olej japoński | 0,06 | 0,12 | 0,12 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 | ||
| Oleje geranium | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | ||
| Olejek cynamonowy | 0,01 | 0,03 | 0,01 | 0,03 | 0.01 | 0.03 | 0.01 | 0.03 | ||
| Olej Motiarosha | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.09 | 0.12 | ||
| Olej pomarańczowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 1.0 | ||
| Olejek ylang-ylang | 0.5 | 1.0 | 0.25 | 1.0 | 0.25 | 1.0 | 0,5 | 1,0 | ||
| Olej z trawy pomarańczowej | 0,12 | 0.12 | 0.15 | 0.15 | 0.15 | 0.15 | 0.15 | 0.12 | ||
| Olejek z mięty pieprzowej | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0.25 | 0,30 | 0,30 | 0,25 | 0,25 | ||
| Olej z ośmiornicy | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | ||
| Olej cytrynowy | 0,5 | 1,0 | 1,0 | 2,0 | 1.0 | 2.0 | 0.5 | 1.0 | ||
| Olej kamforowy | 0.5 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | 0.5 | 1.0 | ||
| Olejek rozmarynowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 2.0 | ||
| Olej tulsi | 0.25 | 0.5 | 0.25 | 0.5 | 0.25 | 0.5 | 0.25 | 0.25 | ||
| Olejek bergamotowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 0.12 | 0.25 | 0.25 | 0.5 | 0.25 | 0.5 | 0.12 | 0.25 | ||
| Olej chloroformowy | 2,0 | 3,0 | 2,0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | ||
| Olejek eukaliptusowy | 1.5 | 2.5 | 1.5 | 2.5 | 1.5 | 2.5 | 1.5 | 2.5 | ||
| Olej cytronelowy | 1,0 | 2,0 | 0,8 | 2.0 | 0,5 | 2,0 | 1,0 | 2,0 | ||
| Olej jałowcowy | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | ||
| Olej imbirowy | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | ||
| Olej różany | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | ||
| Fluconazolea | 5.0 | 5.5 | 5,0 | 5,5 | 2,0 | 2,5 | 3000 | >3000 | ||
| Amfoterycyna Ba | 2.5 | 2.5 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 2.5 | 2.5 | ||
| Oleje roślinne/leki | CA I | CA II | CA III | CA IV | ||||
| MIC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MFC (%) | MIC (%) | MFC (%) | |
| Olej z trawy cytrynowej | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 | 0.06 | 0.12 |
| Olejek z liści goździkowca | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 |
| Olej japoński | 0.06 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.06 |
| Olej geranowy | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 | 0.12 |
| Olejek cynamonowy | 0.01 | 0.03 | 0.01 | 0.03 | 0.01 | 0.03 | 0.01 | 0.03 |
| Olej Motiarosha | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.12 | 0.09 | 0.12 |
| Olej pomarańczowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 1,0 |
| Olejek ylang-ylang | 0,5 | 1,0 | 0,25 | 1,0 | 0.25 | 1,0 | 0,5 | 1,0 |
| Olej z trawy pomarańczowej | 0,12 | 0,12 | 0.15 | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,15 | 0,12 |
| Olejek z mięty pieprzowej | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.30 | 0.30 | 0.25 | 0.25 |
| Olej imbirowy | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
| Olejek cytrynowy | 0,5 | 1.0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 | 0.5 | 1.0 |
| Olej kamforowy | 0.5 | 1.0 | 0,5 | 1.0 | 0,5 | 1.0 | 0,5 | 1.0 |
| Olejek rozmarynowy | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 2.0 |
| Olej tulsi | 0,25 | 0,5 | 0,25 | 0,5 | 0,25 | 0,5 | 0.25 | 0,25 |
| Olejek bergamotowy | 1,0 | 2,0 | 1,0 | 2,0 | 1.0 | 2.0 | 1.0 | 2.0 |
| Olejek z drzewa herbacianego | 0.12 | 0.25 | 0.25 | 0,5 | 0,25 | 0,5 | 0,12 | 0,25 |
| Olejek z krokosza barwierskiego | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 |
| Olejek eukaliptusowy | 1,5 | 2,5 | 1,5 | 2,5 | 1,5 | 2,5 | 1.5 | 2,5 |
| Olejek cytronelowy | 1,0 | 2,0 | 0,8 | 2,0 | 0.5 | 2.0 | 1.0 | 2.0 |
| Olej jałowcowy | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 |
| Olej imbirowy | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 | 3.0 | >3.0 |
| Olej różany | 1.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 | 2.0 | 3.0 | 1.0 | 3.0 |
| Fluconazolea | 5.0 | 5.5 | 5.0 | 5,5 | 2,0 | 2,5 | 3000 | >3000 |
| Amfoterycyna Ba | 2.5 | 2.5 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 2.5 | 2.5 |
Wartości w μg ml-1.
Wszystkie cztery izolaty okazały się wrażliwe na Amfoterycynę B. Stężenie 2,5 μg ml-1 Amfoterycyny B było wystarczające do całkowitego zahamowania wzrostu szczepu CAI i szczepu CA IV (ATCC10231). Szczepy CA II i CA III wymagały 3 μg ml-1 Amfoterycyny B do całkowitego zahamowania wzrostu (Tabela 2).
Odpowiedź na flukonazol okazała się rozbieżna. Szczep Ca III był najbardziej wrażliwy i tylko 2 μg ml-1 stężenia flukonazolu wystarczyło do całkowitego zahamowania wzrostu. Szczepy CA I i CA II wymagały 5 μg ml-1 flukonazolu () do całkowitego zahamowania wzrostu (tab. 2). Szczep CA IV był wysoce oporny na flukonazol: 3000 μg ml-1, tj. 1500-krotnie więcej niż MIC szczepu CA III, było wymagane do częściowego zahamowania wzrostu. Całkowite zahamowanie wzrostu tego szczepu nie było możliwe nawet przy bardzo wysokim stężeniu.
Stężenie 0,01% olejku cynamonowego wystarczyło do całkowitego zahamowania wzrostu wszystkich czterech izolatów. Olejki jaśminowy i lawendowy powodowały jedynie niewielkie zahamowanie wzrostu i nie zdołały go całkowicie zahamować. Siedem olejków całkowicie hamowało wzrost szczepów C. albicans w zakresie stężeń 0,03-0,15%. Dla 11 olejków MIC wahało się od 0,16% do 1,0% Pięć olejków wymagało stężenia powyżej 1,0% (tab. 2 i 3).
Klasyfikacja olejków roślinnych na podstawie Minimalnego Stężenia Grzybobójczego
| Grupa | Olejki | MFC | MIC | ZOI | ||
| Najbardziej skuteczne (0.01-0,15%) | Olejek cynamonowy | 0,03 | 0,01 | 24,0 (±3,60) | ||
| Olejek z trawy cytrynowej | 0,12 | 0,16 | 30.3 (±2,50) | |||
| Olej goździkowy | 0,12 | 0,12 | 20,3 (±0.50) | |||
| Olej z mięty japońskiej | 0,06 | 0,06 | 26,6 (±3,50) | |||
| Olej geraniowy | 0.12 | 0,12 | 19,0 (±1,73) | |||
| Olej Motiarosha | 0,12 | 0.09 | 13,6 (±2,88) | |||
| Olej z trawy imbirowej | 0,12 | 0,15 | 16,0 (±3.50) | |||
| Umiarkowanie skuteczny (0,16-1,0%) | Olejek z mięty pieprzowej | 0,25 | 0.25 | 15,6 (±0,50) | ||
| Olej tulsi | 0,25 | 0,25 | 12,0 (±0.00) | |||
| Olejek z drzewa herbacianego | 0,25 | 0,12 | 14,6 (±2,50) | |||
| Olejek kamforowy | 1.0 | 0.5 | 16.3 (±0.50) | |||
| Olej z orzeszków ziemnych | 1.0 | 1.0 | 16.6 (±0,50) | |||
| Olejek cytrynowy | 1,0 | 0,5 | 17,6 (±2.08) | |||
| Olejek ylang-ylang | 1.0 | 0.5 | 16.0 (±1.00) | |||
| Olejek pomarańczowy | 1.0 | 1,0 | 25,3 (±1,52) | |||
| Mało skuteczny (>1,0%) | Olejek bergamotowy | 2.0 | 1,0 | 19,3 (±1,52) | ||
| Olejek rozmarynowy | 2,0 | 1,0 | 12,3 (±2.51) | |||
| Olejek eukaliptusowy | 3,0 | 2,0 | 10,0 (±1,00) | |||
| Olejek cytronelalowy | 2.0 | 1.0 | 06.1 (±1.50) | |||
| Olejek różany | 3.0 | 1.0 | 02.0 (±0.00) | |||
| Olej chałwowy | 3,0 | 2,0 | 12,3 (±0,50) | |||
| Olej jałowcowy | >3.0 | 3,0 | 05,0 (±0,00) | |||
| Olej imbirowy | >3,0 | 3,0 | 02,0 (±0.00) | |||
| Nieefektywny | Olejek chandanowy | – | – | 00 | ||
| Olejek z drzewa cedrowego | – | – | 00 | |||
| Olejek Jyotishmati | – | – | 00 | |||
| Olej jojoba | – | – | 00 | |||
| Olej z oliwek | – | – | 00 | |||
| Olejek jaśminowy | – | – | 00 | |||
| Olejek lawendowy | – | – | 00 | |||
| . | Olej rzepakowy | – | – | 00 | ||
| Olej z orzechów włoskich | – | – | 00 | |||
| Olej migdałowy | – | – | 00 | |||
| Olej khusa | – | – | 00 | |||
| Olej neem | – | – | 00 | |||
| Olej z kiełków pszenicy | -. | – | 00 | |||
| Olej chałmograficzny | – | – | 00 | |||
| Olej cade | – | – | – | 00 |
| Grupa | Oleje | MFC | MIC | ZOI | |
| Najbardziej skuteczne (0.01-0,15%) | Olejek cynamonowy | 0,03 | 0,01 | 24,0 (±3,60) | |
| Olejek z trawy cytrynowej | 0.12 | 0,16 | 30,3 (±2,50) | ||
| Olej goździkowy | 0.12 | 0.12 | 20.3 (±0.50) | ||
| Olejek z mięty japońskiej | 0.06 | 0.06 | 26,6 (±3,50) | ||
| Olejek geraniowy | 0,12 | 0,12 | 19,0 (±1.73) | ||
| Olej Motiarosha | 0,12 | 0,09 | 13,6 (±2.88) | ||
| Olejek z trawy imbirowej | 0,12 | 0,15 | 16,0 (±3,50) | ||
| Umiarkowanie skuteczny (0,16-1.0%) | Olejek z mięty pieprzowej | 0,25 | 0,25 | 15,6 (±0,50) | |
| Olejek tulsi | 0.25 | 0,25 | 12,0 (±0,00) | ||
| Olejek z drzewa herbacianego | 0,25 | 0,12 | 14.6 (±2,50) | ||
| Olejek kamforowy | 1,0 | 0,5 | 16,3 (±0.50) | ||
| Olejek ociosowy | 1.0 | 1.0 | 16.6 (±0.50) | ||
| Olejek cytrynowy | 1.0 | 0.5 | 17.6 (±2.08) | ||
| Olejek ylang-ylang | 1.0 | 0.5 | 16,0 (±1,00) | ||
| Olejek pomarańczowy | 1,0 | 1,0 | 25,3 (±1.52) | ||
| Mało skuteczny (>1,0%) | Olejek bergamotowy | 2,0 | 1,0 | 19,3 (±1.52) | |
| Olejek rozmarynowy | 2.0 | 1.0 | 12.3 (±2.51) | ||
| Olejek eukaliptusowy | 3.0 | 2,0 | 10,0 (±1,00) | ||
| Olejek cytronelalowy | 2,0 | 1.0 | 06.1 (±1.50) | ||
| Olejek różany | 3.0 | 1.0 | 02.0 (±0.00) | ||
| Olej chałwowy | 3,0 | 2,0 | 12,3 (±0,50) | ||
| Olej jałowcowy | >3.0 | 3,0 | 05,0 (±0,00) | ||
| Olej imbirowy | >3,0 | 3,0 | 02,0 (±0.00) | ||
| Brak skuteczności | Olejek chandanowy | – | – | 00 | |
| Olejek z drzewa cedrowego | – | – | – | 00 | |
| Olejek jojoba | – | – | – | ||
| Olejek jojoba | – | – | 00 | ||
| Oliwa z oliwek | – | – | – | 00 | |
| Olej jaśminowy | -. | – | 00 | ||
| Olejek lawendowy | – | – | – | 00 | |
| Olejek orkiszowy | -. | – | 00 | ||
| Olej z orzechów włoskich | – | – | – | ||
| Olej migdałowy | -. | – | 00 | ||
| Olej Khus | – | – | – | 00 | |
| Olej Neem | -. | – | 00 | ||
| Olej z kiełków pszenicy | – | – | – | 00 | |
| Olej chałwowy | – | – | 00 | ||
| Olej kadeitowy | – | – | 00 |
-, oznacza brak skuteczności.
Klasyfikacja olejów roślinnych na podstawie minimalnego stężenia grzybobójczego
| Grupa | Olejki | MFC | MIC | ZOI | ||
| Najbardziej skuteczne (0.01-0,15%) | Olejek cynamonowy | 0,03 | 0,01 | 24,0 (±3.60) | ||
| Olejek z trawy cytrynowej | 0,12 | 0,16 | 30,3 (±2,50) | |||
| Olejek goździkowy | 0.12 | 0.12 | 20.3 (±0.50) | |||
| Olejek mięty japońskiej | 0.06 | 0,06 | 26,6 (±3,50) | |||
| Olejek geraniowy | 0.12 | 0,12 | 19,0 (±1,73) | |||
| Olej moczarski | 0.12 | 0,09 | 13,6 (±2,88) | |||
| Olej z trawy imbirowej | 0,12 | 0.15 | 16,0 (±3,50) | |||
| Umiarkowanie skuteczny (0,16-1,0%) | Olejek z mięty pieprzowej | 0.25 | 0,25 | 15,6 (±0,50) | ||
| Olejek tulsi | 0,25 | 0.25 | 12,0 (±0,00) | |||
| Olej z drzewa herbacianego | 0,25 | 0,12 | 14,6 (±2.50) | |||
| Olejek kamforowy | 1,0 | 0,5 | 16,3 (±0.50) | |||
| Olejek ociosowy | 1.0 | 1.0 | 16.6 (±0.50) | |||
| Olejek cytrynowy | 1.0 | 0.5 | 17.6 (±2.08) | |||
| Olejek ylang-ylang | 1.0 | 0.5 | 16,0 (±1,00) | |||
| Olejek pomarańczowy | 1,0 | 1,0 | 25,3 (±1.52) | |||
| Mało skuteczny (>1,0%) | Olejek bergamotowy | 2,0 | 1,0 | 19.3 (±1,52) | ||
| Olejek rozmarynowy | 2,0 | 1,0 | 12,3 (±2.51) | |||
| Olejek eukaliptusowy | 3.0 | 2.0 | 10.0 (±1.00) | |||
| Olejek cytronelalowy | 2.0 | 1.0 | 06.1 (±1.50) | |||
| Olejek różany | 3.0 | 1.0 | 02,0 (±0,00) | |||
| Olejek chlorokauczukowy | 3,0 | 2.0 | 12,3 (±0,50) | |||
| Olej jałowcowy | >3.0 | 3,0 | 05,0 (±0,00) | |||
| Olej imbirowy | >3,0 | 3,0 | 02,0 (±0.00) | |||
| Nieefektywny | Olejek chandanowy | – | – | 00 | ||
| Olejek z drzewa cedrowego | – | – | 00 | |||
| Olejek Jyotishmati | – | – | 00 | |||
| Olej jojoba | – | – | 00 | |||
| Olej z oliwek | – | – | 00 | |||
| Olejek jaśminowy | – | – | 00 | |||
| Olejek lawendowy | – | – | 00 | |||
| . | Olej rzepakowy | – | – | 00 | ||
| Olej z orzechów włoskich | – | – | 00 | |||
| Olej migdałowy | – | – | 00 | |||
| Olej khusa | – | – | 00 | |||
| Olej neem | – | – | 00 | |||
| Olej z kiełków pszenicy | -. | – | 00 | |||
| Olej chałmograficzny | – | – | 00 | |||
| Olej cade | – | – | – | 00 |
| Grupa | Oleje | MFC | MIC | ZOI | |
| Najbardziej skuteczne (0.01-0,15%) | Olejek cynamonowy | 0,03 | 0,01 | 24,0 (±3.60) | |
| Olejek z trawy cytrynowej | 0,12 | 0,16 | 30,3 (±2,50) | ||
| Olejek goździkowy | 0.12 | 0.12 | 20.3 (±0.50) | ||
| Olejek mięty japońskiej | 0.06 | 0.06 | 26.6 (±3.50) | ||
| Olejek geraniowy | 0.12 | 0,12 | 19,0 (±1,73) | ||
| Olej moczarski | 0.12 | 0,09 | 13,6 (±2,88) | ||
| Olej z trawy imbirowej | 0,12 | 0.15 | 16,0 (±3,50) | ||
| Umiarkowanie skuteczny (0,16-1,0%) | Olejek z mięty pieprzowej | 0.25 | 0,25 | 15,6 (±0,50) | |
| Olejek tulsi | 0,25 | 0.25 | 12,0 (±0,00) | ||
| Olej z drzewa herbacianego | 0,25 | 0,12 | 14,6 (±2.50) | ||
| Olejek kamforowy | 1,0 | 0,5 | 16,3 (±0.50) | ||
| Olejek ociosowy | 1.0 | 1.0 | 16.6 (±0.50) | ||
| Olejek cytrynowy | 1.0 | 0.5 | 17.6 (±2.08) | ||
| Olejek ylang-ylang | 1.0 | 0.5 | 16,0 (±1,00) | ||
| Olejek pomarańczowy | 1,0 | 1,0 | 25,3 (±1.52) | ||
| Mało skuteczny (>1,0%) | Olejek bergamotowy | 2,0 | 1,0 | 19.3 (±1,52) | |
| Olejek rozmarynowy | 2,0 | 1,0 | 12,3 (±2.51) | ||
| Olejek eukaliptusowy | 3.0 | 2.0 | 10.0 (±1.00) | ||
| Olejek cytronelalowy | 2.0 | 1.0 | 06.1 (±1.50) | ||
| Olejek różany | 3.0 | 1.0 | 02,0 (±0,00) | ||
| Olejek chlorokauczukowy | 3,0 | 2.0 | 12,3 (±0,50) | ||
| Olej jałowcowy | >3.0 | 3,0 | 05,0 (±0,00) | ||
| Olej imbirowy | >3,0 | 3,0 | 02,0 (±0.00) | ||
| Brak skuteczności | Olejek chandanowy | – | – | 00 | |
| Olejek z drzewa cedrowego | – | – | – | 00 | |
| Olejek jojoba | – | – | – | ||
| Olejek jojoba | – | – | 00 | ||
| Oliwa z oliwek | – | – | – | 00 | |
| Olej jaśminowy | -. | – | 00 | ||
| Olejek lawendowy | – | – | – | 00 | |
| Olejek orkiszowy | -. | – | 00 | ||
| Olej z orzechów włoskich | – | – | – | 00 | |
| Olej migdałowy | -. | – | 00 | ||
| Olej Khus | – | – | – | 00 | |
| Olej Neem | -. | – | 00 | ||
| Olej z kiełków pszenicy | – | – | – | 00 | |
| Olej chałwowy | – | – | 00 | ||
| Olej kadeitowy | – | – | 00 |
-, oznacza brak skuteczności.
3.3 Określenie MFC olejków roślinnych wobec C. albicans
Minimalne stężenie grzybobójcze (MFC) definiuje się jako najniższe stężenie olejku powodujące śmierć 99,9% inokulum. Wszystkie olejki hamujące wzrost wykazywały aktywność grzybobójczą z wyjątkiem olejku jaśminowego i lawendowego. Ogólnie zaobserwowano, że stężenie grzybobójcze było wyższe niż MIC, z wyjątkiem kilku przypadków, takich jak olejki z mięty pieprzowej, geranium, ocimum, goździka i trawy cytrynowej, które powodowały śmierć 99,9% inokulum przy MIC. Na podstawie ich MFC wobec ATCC10231, skuteczne olejki można było podzielić na trzy klasy. Za najbardziej efektywne (ME) uznano te olejki, które wywoływały efekt grzybobójczy w stężeniu 0,03-0,15%. Oleje wymagające stężenia 0,15-1,0% zaliczono do grupy umiarkowanie skutecznych (MoE). Za mniej skuteczne (LE) uznano te, których działanie grzybobójcze stwierdzono przy stężeniu powyżej 1,0%.
Za najbardziej skuteczne (ME) uznano siedem olejków (tab. 2 i 3). Najlepszy okazał się olejek cynamonowy, który działał grzybobójczo już przy stężeniu 0,03% na wszystkie cztery izolaty C. albicans. Olejek goździkowy był grzybobójczy w stężeniu 0,12% i nie było różnicy między MIC i MFC. W przypadku większości olejków ME do uzyskania efektu grzybobójczego wymagana była 2-4-krotna wartość MIC. Odpowiedź izolatów Candida na niektóre olejki z tej grupy była rozbieżna, tj. szczepu CA II w przypadku olejku z mięty japońskiej i olejku z trawy cytrynowej, CA III w przypadku olejku z trawy cytrynowej i CA IV w przypadku olejku z trawy imbirowej (tab. 2).
Olejek z mięty pieprzowej i olejek z drzewa herbacianego były najlepsze spośród grupy siedmiu olejków ME, wywołując efekt grzybobójczy w stężeniu 0,25% (tab. 3). Olejek Tulsi działał grzybobójczo w stężeniu 0,5%, 1% wynosił MFC olejków: kamforowego, cytrynowego, Ocimum i Ylang-ylang. Stwierdzono również różnice w czułości dla kilku przedstawicieli tej grupy. Dwukrotna wartość MIC była wymagana dla tych olejków z wyjątkiem olejku z mięty pieprzowej i Ocimum (tab. 2).
Dziewięć olejków okazało się mniej skutecznych (tab. 3). Olejki te wymagały więcej niż 1,0% do wywierania działania grzybobójczego. MFC tych olejków wahało się od 1,0% do 3%, z wyjątkiem olejku jaśminowego, imbirowego i jałowcowego, które nie działały grzybobójczo do stężenia 3%. CA II i CA III wykazywały różną wrażliwość (tabele 2 i 3).
4 Dyskusja
Anty-Kandida aktywność niektórych olejków eterycznych, takich jak olejek z drzewa herbacianego, jest dobrze znana. Wiele preparatów stosowanych przeciwko kandydozie pochwy wywołanej przez C. albicans zawiera olejek z drzewa herbacianego jako składnik aktywny. Kilka olejków pochodzenia roślinnego zostało zaproponowanych w alternatywnych lekach przeciwko infekcjom mikrobiologicznym, w tym kandydozie i zapaleniu dziąseł. Jednak azolowe środki przeciwgrzybicze i ich pochodne nadal dominują jako leki z wyboru przeciwko zakażeniom Candida, stosowane miejscowo lub doustnie. Z wyjątkiem olejku z drzewa herbacianego, który ma ponad 80-letnią historię stosowania w Australii, niewiele produktów ziołowych pojawiło się na rynku. Niektóre produkty zawierające olejek rozmarynowy są stosowane przeciwko grzybom powodującym łupież . In vitro anty-Candida aktywność olejków eterycznych, takich jak drzewo herbaciane, trawa cytrynowa, Citronella, mięta pieprzowa i Palmarosa zostały zgłoszone . Zbadaliśmy skuteczność 38 olejków pochodzenia roślinnego w zakresie aktywności przeciwgrzybiczej in vitro wobec czterech izolatów C. albicans (tabele 1 i 2). Co najmniej 23 z badanych olejków wykazały obiecującą skuteczność. Olejki te można sklasyfikować w zależności od ich skuteczności (Tabela 3). Jeden z izolatów, który okazał się oporny na flukonazol, został zahamowany przy bardzo niskim stężeniu wszystkich skutecznych olejków pochodzenia roślinnego badanych w tym badaniu (Tabela 2).
Test dyfuzyjny jest standardową metodą szeroko stosowaną do szybkiego badania produktów naturalnych pod kątem aktywności przeciwgrzybiczej. Przeprowadziliśmy badania olejów roślinnych przy użyciu tej bardzo wygodnej metody. Badania te wskazują, że należy zachować ostrożność, ponieważ różne olejki mogą mieć różne tempo dyfuzji na płytkach agarowych, co może przyczynić się do zróżnicowania stref zahamowania wzrostu, prowadząc do błędnych wniosków dotyczących ich aktywności przeciwgrzybiczej. Na przykład, niektóre z olejków, które wykazywały mniejsze strefy zahamowania w porównaniu z innymi, były bardzo skuteczne wobec szczepów Candida w teście rozcieńczeń bulionowych NCCLS, który nie obejmuje dyfuzji. Na przykład olejek cynamonowy wykazał ZOI 24 mm w teście dyfuzyjnym, podczas gdy olejek z trawy cytrynowej wykazał 30 mm. Jednak w teście MFC olejek cynamonowy (0,01%) okazał się lepszy niż olejek z trawy cytrynowej (0,06%). Aktywność grzybobójcza jest uważana za pożądaną cechę środków przeciwgrzybiczych, ponieważ może ona całkowicie wyeliminować grzyby z tkanek. Amfoterycyna B ma działanie grzybobójcze, jest znana jako bardzo skuteczna wobec grzybów chorobotwórczych u ludzi i jest stosowana jako lek z wyboru w układowych zakażeniach grzybiczych, pomimo jej poważnych skutków ubocznych. Flukonazol, powszechnie przepisywany środek przeciwgrzybiczy przeciwko infekcjom Candida, ma charakter fungistatyczny i może wymagać przedłużonego stosowania
Zachęcający jest fakt, że większość olejków stosowanych w tym badaniu miała właściwości grzybobójcze przy niskich stężeniach. Niewiele informacji jest dostępnych na temat sposobu działania produktów naturalnych hamujących wzrost Candida. W przyszłych badaniach należy uwzględnić więcej szczepów opornych na flukonazol/azol. Olejki roślinne mogłyby znaleźć zastosowanie jako środki anty-Candida przeciwko szczepom opornym na azole. Większość olejków użytych w tym badaniu ma długą historię stosowania w żywności, wyrobach cukierniczych i jako składniki perfum. Jednakże, jeśli mają one być rozważane w preparatach miejscowych, należy podjąć staranne badania ich prawdopodobnego działania drażniącego i innych niepożądanych efektów u ludzi.
Podziękowania
Autorzy są wdzięczni Dr. S.A. Suryawanshi, Hon’ble Vice Chancellor, SRTM University, Nanded (MS) India, za zachętę.
(
)
In: (
Eds.), pp.
–
.
,
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
(
),
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
(
),
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
(
),
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
(
),
–
.
(
)
In:
(
Eds.), Vol. 12, pp.
–
.
,
.
(
)
.
(
).
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
.
(
)
.
(
),
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
, vol. 17 (9), pp.
–
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.
,
–
.
(
)
.In:
, pp.
–
.
,
.
(
) In:
(
, Ed.).
,
.