Opisano zasadnicze wymagania dotyczące oznaczeń enzymatycznych oraz omówiono często występujące błędy i pułapki, jak również sposoby ich unikania. Główne czynniki, które muszą być brane pod uwagę przy oznaczaniu enzymów, to temperatura, pH, siła jonowa i odpowiednie stężenia podstawowych składników, takich jak substraty i enzymy. Pożądana byłaby standaryzacja tych parametrów, ale różnorodność cech różnych enzymów uniemożliwia ujednolicenie warunków oznaczania. Niemniej jednak, wiele enzymów, szczególnie tych pochodzących od ssaków, posiada optimum pH zbliżone do fizjologicznego pH 7,5, a temperatura ciała około 37 °C może służyć jako temperatura analizy, chociaż ze względów doświadczalnych często preferowana jest temperatura 25 °C. Jednak w wielu przypadkach szczególne cechy poszczególnych enzymów dyktują specjalne warunki analizy, które mogą znacznie odbiegać od zalecanych warunków.

Dodatkowo, nie można podać dokładnych wartości stężeń składników analizy, takich jak substraty i enzymy, chyba że można podać ogólne zasady zależne od względnego stopnia nasycenia. Omówiono zasady przeprowadzania analizy enzymatycznej, odpowiednie postępowanie, aspekty metodyczne, przygotowanie mieszanin testowych i ślepych prób, wybór czasu analizy, a także podano sugestie dotyczące unikania częstych i trywialnych błędów. Rozważane są szczególne cechy bardziej złożonych testów enzymatycznych, włączając reakcje odwracalne i testy sprzężone.

Ostatnio opisano obróbkę danych doświadczalnych w celu oszacowania aktywności enzymu. Przedstawiono procedurę określania początkowej prędkości enzymu i jej transformacji na zdefiniowane jednostki enzymatyczne, jak również sugestie dotyczące dokumentacji wyników.

.