Potencial de los aceites vegetales como inhibidores del crecimiento de Candida albicans

Abstract

Se determinaron las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) y las concentraciones fungicidas mínimas (CFM) de 38 aceites de origen vegetal contra Candida albicans. En este estudio se utilizaron cuatro cepas, incluida una cepa estándar. Los agentes antifúngicos Fluconazol y Anfotericina B se utilizaron como controles positivos. La cepa estándar (ATCC10231) utilizada en este estudio resultó ser altamente resistente al Fluconazol: Se necesitaron 3000 μg ml-1 de Fluconazol para inhibir parcialmente el crecimiento de esta cepa, y no se pudo conseguir una inhibición completa. Otras cepas de Candida fueron sensibles a 5 μg ml-1 de Fluconazol. Todas las cepas utilizadas fueron sensibles a la Anfotericina B. De los 38 aceites probados, 23 resultaron eficaces y quince ineficaces. Basándose en sus MFC, los aceites eficaces se clasificaron en tres categorías. Siete aceites, que ejercían un efecto fungicida con una concentración de aceites inferior al 0,15%, se agruparon en la clase más eficaz. Los aceites que presentaban MFC en el rango de concentración de 0,16-1,5% se consideraron moderadamente eficaces. Nueve aceites, que requerían una concentración superior al 1,5%, se consideraron menos eficaces. La cepa resistente al fluconazol (MTCC 227) fue sensible al menos a 23 de los aceites vegetales. Los resultados de este estudio indican que los aceites de origen vegetal pueden ser utilizados como potenciales agentes anti-Candida.

1 Introducción

La Anfotericina B y el Fluconazol son dos importantes agentes utilizados en la quimioterapia antifúngica contra los hongos patógenos humanos. La anfotericina B se utiliza como fármaco de elección en pacientes terminales . El azol, el fluconazol, se prescribe ampliamente contra diversas infecciones por Candida albicans. A pesar de ser muy aclamados por su eficacia, se sabe que estos fármacos tienen efectos secundarios. El fluconazol es fungistático por naturaleza y hay informes sobre la aparición de resistencia al fluconazol entre los aislados clínicos de C. albicans. Por lo tanto, se necesitan nuevos y mejores agentes antifúngicos contra las infecciones causadas por C. albicans que sean eficaces y tengan menos efectos secundarios.

Muchos agentes naturales como los productos vegetales, incluidos los extractos, los aceites, etc., se utilizan tradicionalmente contra diversas dolencias. Algunos de los productos vegetales son eficaces contra las infecciones fúngicas y bacterianas. Los aceites esenciales como el aceite del árbol del té, el aceite de hierba de limón, el aceite de citronela, el aceite de palmarosha y algunos de sus componentes se han probado contra el crecimiento in vitro de C. albicans.

Hemos probado la eficacia in vitro de 38 aceites vegetales contra cuatro aislados de C. albicans. Se han comunicado las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) y las concentraciones fungicidas mínimas (CFM) de los aceites eficaces. En función de su eficacia (MFC), los aceites se clasifican en tres categorías.

2 Materiales y métodos

2.1 Productos químicos y cepas

En este estudio se utilizó una cepa estándar, la cepa tipo ATCC10231 (MTCC 227/CA IV), una cepa de referencia sugerida para el ensayo con anfotericina B, y tres cepas clínicas de C. albicans. Los tres aislados clínicos de C. albicans, a saber, SRTCC I (CA I), SRTCC II (CA II), SRTCC III (CA III), se obtuvieron del Centro de Colección de Cultivos SRTCC, Escuela de Ciencias de la Vida, Universidad SRTM, Nanded (MS). India. La cepa estándar se adquirió en el Instituto de Tecnología Microbiana (IMTECH), Chandigarh, India.

En este estudio se utilizaron 38 aceites vegetales. Algunos de los aceites fueron proporcionados amablemente por el Instituto Central de Plantas Medicinales y Aromáticas (CIMAP), Lucknow, India, y los aceites restantes y los fármacos antifúngicos, Anfotericina B y Fluconazol, se compraron en el mercado local.

2.2 Preparación de los inóculos

Todas las cepas de C. albicans utilizadas en este estudio se cultivaron a 30 °C durante 24 horas en una incubadora con agitación utilizando un medio de Peptonas de Extracto de Levadura y un medio de Dextrosa de Sabouraud. Las células se cosecharon por centrifugación, se suspendieron en agua destilada estéril y se utilizaron inmediatamente. El número de células se determinó utilizando un hemocitómetro y se ajustó a 5 × 106 ufc ml-1.

2.3 Examen de la actividad anticandida de los aceites vegetales mediante un ensayo de difusión en disco

La actividad anticandida de 38 aceites vegetales se probó mediante un ensayo estándar de difusión en disco. Se prepararon las placas de agar de dextrosa Sabouraud y se sembraron con 5 × 106 ufc ml-1 utilizando los inóculos de las cepas de Candida preparadas como anteriormente. Asépticamente, se colocaron 5 μl de aceites vegetales en discos de papel de filtro de 5 mm (Whatman nº 1). Estos discos se transfirieron al centro de las placas sembradas. Se utilizaron tres placas para cada concentración y se incubaron a 30 ± 2 °C. Se midió el diámetro de la zona de inhibición después de 48 horas de incubación.

2.4 Determinación de la concentración inhibitoria mínima (CIM) de los aceites vegetales por el método de dilución en agar

Las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) de los aceites vegetales se determinaron mediante el ensayo de dilución en agar (23) Las placas de agar se prepararon añadiendo agar YPD que contenía varias concentraciones de aceites vegetales (es decir, 0,03-3% v/v). Se añadió Tween 20 al 0,5% (v/v) para mejorar la solubilidad del aceite. Estas placas se inocularon con 103 ufc, utilizando los inóculos de las cepas de Candida preparados como se ha indicado anteriormente. Las placas se mantuvieron por triplicado para cada concentración. Como control se utilizaron placas con Tween 20 pero sin ningún aceite vegetal. Todas estas placas se incubaron a 30 ± 2 °C. Se observaron las placas y se contó el número de colonias después de 48 horas de incubación. Los valores de CIM se determinaron como la menor concentración de aceite que impedía el crecimiento visible de las cepas de Candida.

2.5 Determinación de la concentración fungicida mínima (CFM) de los aceites vegetales mediante el método de macrodilución en caldo

La concentración fungicida mínima (CFM) de los aceites vegetales se determinó mediante el ensayo de macrodilución en caldo (NCCLS M27-A, método de referencia recomendado para las pruebas de susceptibilidad antifúngica de las levaduras). Se preparó un rango de concentraciones (0,03-3% v/v) de aceite vegetal en medio de caldo YPD en frascos. Se incluyó Tween 80 a una concentración final del 0,001% (v/v) para mejorar la solubilidad del aceite. Cada matraz se inoculó con 5 × 105 ufc ml-1 de las cepas de Candida. Como control se utilizaron frascos que contenían Tween 20 pero que carecían de aceite vegetal. Los matraces se incubaron a 30 ± 2 °C, en una incubadora con agitación orbital (100 rpm) durante 48 h. De cada matraz se inocularon 5 μl de cultivo en placas YPD y se incubaron a 30 ± 2 °C durante 48 h. Se observaron las placas y se determinaron los MFC como la concentración más baja del aceite vegetal que inhibe completamente el crecimiento de las cepas de Candida.

3 Resultados

3.1 Examen de la actividad anti-Candida de los aceites vegetales

Los aislados de C. albicans analizados mostraron diferente sensibilidad a los aceites. Sin embargo, la mayoría de los aceites resultaron eficaces y mostraron una actividad considerable a concentraciones muy bajas. Veinticinco de los 38 aceites probados causaron una zona de inhibición (ZOI) de 1 a 30 mm. Diecisiete aceites causaron una ZOI de 10-20 mm. Seis aceites mostraron una ZOI de 1-9 mm contra las cuatro cepas probadas. El aceite de jazmín y el de lavanda no lograron inhibir el crecimiento de las cepas de Candida, excepto CA IV. (Tabla 1). (13 aceites no lograron inhibir el crecimiento de las cepas de C. albicans a dosis de 5-μl.)

1

Examen de los aceites vegetales para la actividad antiCandida activity

Aceites vegetales CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Aceite de hierba de limón 30.0 (±0) 30.0 (±0) 27,3 (±2,51) 30,3 (±2,51)
Aceite de hoja de clavo 27,0 (±1.0) 30,0 (±4,35) 22,0 (±3,0) 20,3 (±0,57)
Aceite de canela 25.0 (±0) 24.3 (±4.93) 26.3 (±2.3) 24.0 (±3.6)
Aceite de menta japonés 20,0 (±0) 21,0 (±1,0) 20,3 (±2,51) 26.6 (±3,51)
Aceite de geranio 20,0 (±0) 20,3 (±0,57) 18,0 (±3.0) 19,0 (±1,73)
Aceite de Motiarosha 21,3 (±0,57) 20,3 (±3.05) 14,0 (±2,0) 13,6 (±2,88)
Aceite de naranja 29,0 (±3,60) 23.0 (±4,35) 23,0 (±2,0) 25,3 (±1,52)
Aceite de Ylang-ylang 24.0 (±1.0) 21.6 (±0.57) 13.3 (±0.57) 16.0 (±1.0)
Aceite de jengibre 20,0 (±4,35) 25,3 (±2,51) 18,3 (±0,57) 16,0 (±3.60)
Aceite de menta 15,0 (±0) 15,3 (±0,57) 10,3 (±2.51) 15,6 (±0,57)
Aceite de ocimum 19,3 (±0,57) 17,3 (±0.57) 10,6 (±4,04) 16,6 (±0,57)
Aceite de limón 13,3 (±0,57) 17.6 (±0,57) 16,3 (±0,57) 17,6 (±2,08)
Aceite de alcanfor 13.0 (±1.0) 11.0 (±2.64) 13.3 (±2.08) 16.3 (±3.21)
Aceite de romero 8,3 (±0,57) 10,0 (±2,64) 8,3 (±1,52) 12,3 (±2.51)
Aceite de Tulsi 12,6 (±4,04) 12,0 (±0) 10,3 (±1,52) 12.0 (±0)
Aceite de bergamota 16,0 (±1,0) 22,3 (±2,51) 17.3 (±2,08) 19,3 (±1,52)
Aceite de árbol de té 17,0 (±1,0) 24,0 (±1.0) 11,0 (±1,73) 14,6 (±2,51)
Aceite de salvia 11,6 (±0.57) 12,0 (±1,0) 8,3 (±2,51) 12,3 (±0,57)
Aceite de eucalipto 7.0 (±0) 9.0 (±1.0) 6.3 (±0.57) 10.0 (±1.0)
Aceite de citronela 7,3 (±0,57) 9,0 (±1,0) 8,0 (±1,0) 6.6 (±1,52)
Aceite de enebro 5,0 (±0) 5,0 (±0) 5,0 (±0) 5.0 (±0)
Aceite de jengibre 2,0 (±0) 2,0 (±0) 2,0 (±0) 2.0 (±0)
Aceite de rosa 0 (±0) 0 (±0) 2,0 (±0) 2.0 (±0)
Aceite de jazmín 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de lavanda 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de Chandan 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cedro 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite Jyotishmati 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de jojoba 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de oliva 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de oruga 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de nuez 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de almendras 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de khus 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de némesis 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de germen de trigo 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de colza 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cadera 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceites vegetales CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Aceite de hierba de limón 30.0 (±0) 30.0 (±0) 27,3 (±2,51) 30,3 (±2,51)
Aceite de hojas de clavo 27,0 (±1.0) 30,0 (±4,35) 22,0 (±3,0) 20,3 (±0,57)
Aceite de canela 25.0 (±0) 24.3 (±4.93) 26.3 (±2.3) 24.0 (±3.6)
Aceite de menta japonés 20,0 (±0) 21,0 (±1,0) 20,3 (±2,51) 26,6 (±3.51)
Aceite de geranio 20,0 (±0) 20,3 (±0,57) 18,0 (±3.0) 19,0 (±1,73)
Aceite de Motiarosha 21,3 (±0,57) 20,3 (±3.05) 14,0 (±2,0) 13,6 (±2,88)
Aceite de naranja 29,0 (±3,60) 23.0 (±4,35) 23,0 (±2,0) 25,3 (±1,52)
Aceite de Ylang-ylang 24.0 (±1.0) 21.6 (±0.57) 13.3 (±0.57) 16.0 (±1.0)
Aceite de hierba de jengibre 20,0 (±4,35) 25,3 (±2,51) 18,3 (±0,57) 16,0 (±3.60)
Aceite de menta 15,0 (±0) 15,3 (±0,57) 10,3 (±2.51) 15,6 (±0,57)
Aceite de ocimum 19,3 (±0,57) 17,3 (±0.57) 10,6 (±4,04) 16,6 (±0,57)
Aceite de limón 13,3 (±0,57) 17.6 (±0,57) 16,3 (±0,57) 17,6 (±2,08)
Aceite de alcanfor 13.0 (±1.0) 11.0 (±2.64) 13.3 (±2.08) 16.3 (±3.21)
Aceite de romero 8,3 (±0,57) 10,0 (±2,64) 8,3 (±1,52) 12,3 (±2.51)
Aceite de tulsi 12,6 (±4,04) 12,0 (±0) 10,3 (±1,52) 12,0 (±0)
Aceite de bergamota 16.0 (±1,0) 22,3 (±2,51) 17,3 (±2,08) 19,3 (±1,52)
Aceite de árbol de té 17,0 (±1,0) 24.0 (±1,0) 11,0 (±1,73) 14,6 (±2,51)
Aceite de salvia 11,6 (±0,57) 12,0 (±1,0) 8.3 (±2,51) 12,3 (±0,57)
Aceite de eucalipto 7,0 (±0) 9,0 (±1,0) 6,3 (±0,57) 10,0 (±1.0)
Aceite de citronela 7,3 (±0,57) 9,0 (±1,0) 8,0 (±1,0) 6,6 (±1,52)
Aceite de enebro 5.0 (±0) 5,0 (±0) 5,0 (±0) 5,0 (±0)
Aceite de jengibre 2,0 (±0) 2,0 (±0) 2.0 (±0) 2,0 (±0)
Aceite de rosa 0 (±0) 0 (±0) 2,0 (±0) 2.0 (±0)
Aceite de jazmín 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de lavanda 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de Chandan 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cedro 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite Jyotishmati 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jojoba 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de oliva 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de orujo 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de nuez 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de almendras 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de khus 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de Neem 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de germen de trigo 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de caucho 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cadera 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)

ZOI: Zona de inhibición. Los valores entre paréntesis indican la desviación estándar.

1

Control de los aceites vegetales para la actividad antiCandida activity

Aceites vegetales CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Aceite de hierba de limón 30.0 (±0) 30,0 (±0) 27,3 (±2,51) 30,3 (±2,51)
Aceite de hojas de clavo 27.0 (±1,0) 30,0 (±4,35) 22,0 (±3,0) 20,3 (±0,57)
Aceite de canela 25.0 (±0) 24,3 (±4,93) 26,3 (±2,3) 24,0 (±3,6)
Aceite de menta japonés 20,0 (±0) 21,0 (±1.0) 20,3 (±2,51) 26,6 (±3,51)
Aceite de geranio 20,0 (±0) 20,3 (±0,57) 18,0 (±3,0) 19.0 (±1,73)
Aceite Motiarosha 21,3 (±0,57) 20,3 (±3,05) 14,0 (±2,0) 13,6 (±2.88)
Aceite de naranja 29,0 (±3,60) 23,0 (±4,35) 23,0 (±2,0) 25,3 (±1,52)
Aceite de ylang-ylang 24.0 (±1,0) 21,6 (±0,57) 13,3 (±0,57) 16,0 (±1,0)
Aceite de jengibre 20,0 (±4,35) 25.3 (±2,51) 18,3 (±0,57) 16,0 (±3,60)
Aceite de menta 15,0 (±0) 15,3 (±0,57) 10,3 (±2.51) 15,6 (±0,57)
Aceite de ocimum 19,3 (±0,57) 17,3 (±0,57) 10,6 (±4,04) 16,6 (±0.57)
Aceite de limón 13,3 (±0,57) 17,6 (±0,57) 16,3 (±0,57) 17,6 (±2,08)
Aceite de alcanfor 13.0 (±1,0) 11,0 (±2,64) 13,3 (±2,08) 16,3 (±3,21)
Aceite de romero 8,3 (±0,57) 10,0 (±2.64) 8,3 (±1,52) 12,3 (±2,51)
Aceite de tulsi 12,6 (±4,04) 12,0 (±0) 10,3 (±1,52) 12.0 (±0)
Aceite de bergamota 16,0 (±1,0) 22,3 (±2,51) 17,3 (±2,08) 19,3 (±1.52)
Aceite de árbol de té 17,0 (±1,0) 24,0 (±1,0) 11,0 (±1,73) 14,6 (±2,51)
Aceite de salvia 11.6 (±0.57) 12.0 (±1.0) 8.3 (±2.51) 12.3 (±0.57)
Aceite de eucalipto 7,0 (±0) 9,0 (±1,0) 6,3 (±0,57) 10,0 (±1.0)
Aceite de citronela 7,3 (±0,57) 9,0 (±1,0) 8,0 (±1,0) 6.6 (±1,52)
Aceite de enebro 5,0 (±0) 5,0 (±0) 5,0 (±0) 5.0 (±0)
Aceite de jengibre 2,0 (±0) 2,0 (±0) 2,0 (±0) 2.0 (±0)
Aceite de rosa 0 (±0) 0 (±0) 2,0 (±0) 2.0 (±0)
Aceite de jazmín 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de lavanda 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de Chandan 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cedro 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite Jyotishmati 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de jojoba 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de oliva 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de oruga 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de nuez 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de almendras 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de khus 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de némesis 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de germen de trigo 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de colza 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cadera 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceites vegetales CAI CA II CA III CA IV
ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm) ZOI (mm)
Aceite de hierba de limón 30.0 (±0) 30,0 (±0) 27,3 (±2,51) 30,3 (±2,51)
Aceite de hojas de clavo 27,0 (±1.0) 30,0 (±4,35) 22,0 (±3,0) 20,3 (±0,57)
Aceite de canela 25,0 (±0) 24.3 (±4,93) 26,3 (±2,3) 24,0 (±3,6)
Aceite de menta japonesa 20,0 (±0) 21,0 (±1.0) 20,3 (±2,51) 26,6 (±3,51)
Aceite de geranio 20,0 (±0) 20,3 (±0,57) 18.0 (±3,0) 19,0 (±1,73)
Aceite Motiarosha 21,3 (±0,57) 20,3 (±3,05) 14,0 (±2.0) 13,6 (±2,88)
Aceite de naranja 29,0 (±3,60) 23,0 (±4,35) 23,0 (±2,0) 25.3 (±1,52)
Aceite de ylang-ylang 24,0 (±1,0) 21,6 (±0,57) 13,3 (±0,57) 16.0 (±1,0)
Aceite de jengibre 20,0 (±4,35) 25,3 (±2,51) 18,3 (±0,57) 16,0 (±3.60)
Aceite de menta 15,0 (±0) 15,3 (±0,57) 10,3 (±2,51) 15,6 (±0.57)
Aceite de ocimum 19,3 (±0,57) 17,3 (±0,57) 10,6 (±4,04) 16,6 (±0,57)
Aceite de limón 13.3 (±0,57) 17,6 (±0,57) 16,3 (±0,57) 17,6 (±2,08)
Aceite de alcanfor 13.0 (±1,0) 11,0 (±2,64) 13,3 (±2,08) 16,3 (±3,21)
Aceite de romero 8,3 (±0.57) 10,0 (±2,64) 8,3 (±1,52) 12,3 (±2,51)
Aceite de tulsi 12,6 (±4,04) 12.0 (±0) 10,3 (±1,52) 12,0 (±0)
Aceite de bergamota 16,0 (±1,0) 22,3 (±2,51) 17.3 (±2,08) 19,3 (±1,52)
Aceite de árbol de té 17,0 (±1,0) 24,0 (±1,0) 11,0 (±1.73) 14,6 (±2,51)
Aceite de clarión 11,6 (±0,57) 12,0 (±1,0) 8,3 (±2,51) 12,3 (±0.57)
Aceite de eucalipto 7,0 (±0) 9,0 (±1,0) 6,3 (±0.57) 10,0 (±1,0)
Aceite de citronela 7,3 (±0,57) 9,0 (±1.0) 8,0 (±1,0) 6,6 (±1,52)
Aceite de enebro 5.0 (±0) 5,0 (±0) 5,0 (±0) 5,0 (±0)
Aceite de jengibre 2.0 (±0) 2,0 (±0) 2,0 (±0) 2,0 (±0)
Aceite de rosa 0 (±0) 0 (±0) 2,0 (±0) 2.0 (±0)
Aceite de jazmín 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de lavanda 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 1.0 (±0)
Aceite de Chandan 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cedro 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite Jyotishmati 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Jojoba 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de oliva 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de oruga 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de nuez 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de almendras 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de khus 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de Neem 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de germen de trigo 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de caucho 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)
Aceite de cadera 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0) 0 (±0)

ZOI: Zona de inhibición. Los valores entre paréntesis indican la desviación estándar.

3.2 Determinación de la CIM de los aceites vegetales contra C. albicans

Se determinaron las CIM de los 23 aceites eficaces y de dos fármacos ampliamente prescritos, Fluconazol y Anfotericina B, contra los cuatro aislados de C. albicans. Los aceites mostraron una inhibición del crecimiento dependiente de la concentración. En algunos casos, las cepas probadas mostraron una sensibilidad diferente, pero no hubo una diferencia considerable en la CIM (Tabla 2).

2

MICs y MFCs de aceites vegetales contra cuatro aislados de Candida albicans

Aceites vegetales/fármacos CA I CA II CA III CA IV
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%)
Aceite de hierba de limón 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0.12
Aceite de hojas de clavo 0,12 0,12 0,12 0.12 0,12 0,12 0,12 0,12
Aceite japonés 0.06 0.12 0.12 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06
Aceite de geranio 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Aceite de canela 0,01 0,03 0,01 0,03 0,01 0.03 0,01 0,03
Aceite de Motiarosha 0,06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0.12
Aceite de naranja 1,0 2,0 1,0 2,0 1.0 2,0 1,0 1,0
Aceite de Ylang-ylang 0.5 1.0 0.25 1.0 0.25 1.0 0.5 1.0
Aceite de jengibre 0,12 0,12 0,15 0.15 0,15 0,15 0,15 0,12
Aceite de menta 0.25 0.25 0.25 0.25 0.30 0.30 0.25 0,25
Aceite de ocimum 1,0 1,0 1,0 1.0 1,0 1,0 1,0 1,0
Aceite de limón 0.5 1.0 1.0 2.0 1.0 2.0 0.5 1.0
Aceite de alcanfor 0,5 1,0 0,5 1,0 0.5 1,0 0,5 1,0
Aceite de romero 1.0 2.0 1.0 3.0 1.0 3.0 1.0 2.0
Aceite de Tulsi 0,25 0,5 0,25 0,5 0.25 0,5 0,25 0,25
Aceite de bergamota 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0
Aceite de árbol de té 0,12 0,25 0,25 0.5 0,25 0,5 0,12 0,25
Aceite de clarión 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0
Aceite de eucalipto 1,5 2,5 1,5 2.5 1,5 2,5 1,5 2,5
Aceite de citronela 1.0 2.0 0.8 2.0 0.5 2.0 1.0 2,0
Aceite de enebro 3,0 >3,0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Aceite de jengibre 3,0 >3,0 3,0 >3.0 3,0 >3,0 3,0 >3,0
Aceite de rosa 1.0 3.0 1.0 3.0 2.0 3.0 1.0 3.0
Fluconazola 5,0 5,5 5,0 5,5 2.0 2,5 3000 >3000
Amfotericina Ba 2,5 2.5 3.0 3.0 3.0 3.0 2.5 2.5
Aceites vegetales/drogas CA I CA II CA III CA IV
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%)
Aceite de hierba de limón 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0,12
Aceite de hojas de clavo 0,12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Aceite japonés 0.06 0.12 0.12 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06
Aceite de geranio 0.12 0.12 0.12 0.1212 0,12 0,12 0,12 0,12
Aceite de canela 0.01 0.03 0.01 0.03 0.01 0.03 0,01 0,03
Aceite de Motiarosha 0,06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0.12
Aceite de naranja 1,0 2,0 1,0 2,0 1.0 2,0 1,0 1,0
Aceite de ylang-ylang 0,5 1.0 0.25 1.0 0.25 1.0 0.5 1.0
Aceite de jengibre 0,12 0,12 0,15 0,15 0.15 0,15 0,15 0,12
Aceite de menta 0.25 0.25 0.25 0.25 0.30 0.30 0.25 0.25
Aceite de ocimum 1,0 1,0 1,0 1.0 1,0 1,0 1,0 1,0
Aceite de limón 0.5 1.0 1.0 2.0 1.0 2.0 0.5 1.0
Aceite de alcanfor 0,5 1,0 0,5 1,0 0.5 1,0 0,5 1,0
Aceite de romero 1.0 2.0 1.0 3.0 1.0 3.0 1.0 2.0
Aceite de Tulsi 0,25 0,5 0,25 0,5 0.25 0,5 0,25 0,25
Aceite de bergamota 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0
Aceite de árbol de té 0,12 0,25 0,25 0.5 0,25 0,5 0,12 0,25
Aceite de clarión 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3,0
Aceite de eucalipto 1,5 2,5 1,5 2.5 1,5 2,5 1,5 2,5
Aceite de citronela 1.0 2,0 0,8 2,0 0,5 2,0 1,0 2,0
Aceite de enebro 3,0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Aceite de jengibre 3,0 >3,0 3,0 >3.0 3,0 >3,0 3,0 >3,0
Aceite de rosa 1.0 3.0 1.0 3.0 2.0 3.0 1,0 3,0
Fluconazola 5,0 5,5 5,0 5.5 2,0 2,5 3000 >3000
Amfotericina Ba 2.5 2,5 3,0 3,0 3,0 3,0 2,5 2,5
a

Valores en μg ml-1.

2

MICs y MFCs de aceites vegetales contra cuatro aislados de Candida albicans

.

Aceites vegetales/fármacos CA I CA II CA III CA IV
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%)
Aceite de hierba de limón 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0,12
Aceite de hojas de clavo 0,12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Aceite japonés 0,06 0,12 0,12 0,1212 0,06 0,12 0,06 0,06
Aceite de geranio 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12
Aceite de canela 0,01 0,03 0,01 0,03 0.01 0,03 0,01 0,03
Aceite de Motiarosha 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0,12
Aceite de naranja 1,0 2,0 1.0 2,0 1,0 2,0 1,0 1,0
Aceite de ylang-ylang 0.5 1.0 0.25 1.0 0.25 1.0 0,5 1,0
Aceite de hierba de jengibre 0,12 0.12 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.12
Aceite de menta 0,25 0,25 0,25 0.25 0,30 0,30 0,25 0,25
Aceite de ocimum 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Aceite de limón 0,5 1,0 1,0 2,0 1.0 2,0 0,5 1,0
Aceite de alcanfor 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0 0.5 1.0
Aceite de romero 1,0 2,0 1,0 3.0 1,0 3,0 1,0 2,0
Aceite de Tulsi 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.5 0.25 0.25
Aceite de bergamota 1,0 2,0 1,0 2,0 1.0 2,0 1,0 2,0
Aceite de árbol de té 0.12 0.25 0.25 0.5 0.25 0.5 0.12 0.25
Aceite de clarión 2,0 3,0 2,0 3.0 2,0 3,0 2,0 3,0
Aceite de eucalipto 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5 1.5 2.5
Aceite de citronela 1,0 2,0 0,8 2.0 0,5 2,0 1,0 2,0
Aceite de enebro 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3,0
Aceite de jengibre 3,0 >3,0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Aceite de rosa 1,0 3,0 1,0 3,0 2.0 3.0 1.0 3.0
Fluconazolea 5.0 5.5 5,0 5,5 2,0 2,5 3000 >3000
Amfotericina Ba 2.5 2.5 3.0 3.0 3.0 3.0 2.5 2.5
Aceites vegetales/drogas CA I CA II CA III CA IV
MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%) MIC (%) MFC (%)
Aceite de hierba de limón 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06 0.06 0,12
Aceite de hojas de clavo 0,12 0,12 0.12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12
Aceite japonés 0.06 0.12 0.12 0.12 0.06 0.12 0.06 0.06
Aceite de geranio 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0.12 0,12 0,12
Aceite de canela 0,01 0,03 0,01 0.03 0,01 0,03 0,01 0,03
Aceite de Motiarosha 0.06 0.12 0.06 0.12 0.06 0.12 0.09 0.12
Aceite de naranja 1,0 2,0 1,0 2,0 1,0 2,0 1.0 1,0
Aceite de Ylang-ylang 0,5 1,0 0,25 1,0 0.25 1,0 0,5 1,0
Aceite de jengibre 0,12 0,12 0.15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,12
Aceite de menta 0.25 0.25 0.25 0.25 0.30 0.30 0.25 0.25
Aceite de ocimum 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1.0 1,0 1,0
Aceite de limón 0,5 1,0 1,0 2.0 1,0 2,0 0,5 1,0
Aceite de alcanfor 0,5 1.0 0,5 1,0 0,5 1,0 0,5 1,0
Aceite de romero 1.0 2.0 1.0 3.0 1.0 3.0 1.0 2.0
Aceite de Tulsi 0,25 0,5 0,25 0,5 0,25 0,5 0.25 0,25
Aceite de bergamota 1,0 2,0 1,0 2,0 1.0 2,0 1,0 2,0
Aceite de árbol de té 0,12 0,25 0.25 0,5 0,25 0,5 0,12 0,25
Aceite de salvia 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0 2.0 3.0
Aceite de eucalipto 1,5 2,5 1,5 2,5 1,5 2,5 1.5 2,5
Aceite de citronela 1,0 2,0 0,8 2,0 0.5 2,0 1,0 2,0
Aceite de enebro 3,0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0 3.0 >3.0
Aceite de jengibre 3,0 >3,0 3,0 >3,0 3,0 >3,0 3.0 >3,0
Aceite de rosa 1,0 3,0 1,0 3,0 2.0 3,0 1,0 3,0
Fluconazolea 5,0 5,5 5.0 5,5 2,0 2,5 3000 >3000
Amfotericina Ba 2.5 2.5 3.0 3.0 3.0 3.0 2.5 2.5
a

Valores en μg ml-1.

Los cuatro aislados resultaron sensibles a la Anfotericina B. Una concentración de 2,5 μg ml-1 de Anfotericina B fue suficiente para inhibir completamente el crecimiento de la cepa CAI y la cepa CA IV (ATCC10231). Las cepas CA II y CA III necesitaron 3 μg ml-1 de Anfotericina B para la inhibición total del crecimiento (Tabla 2).

La respuesta al Fluconazol resultó ser divergente. La cepa Ca III fue la más sensible y sólo una concentración de 2 μg ml-1 de Fluconazol fue suficiente para la inhibición completa del crecimiento. Las cepas CA I y CA II necesitaron 5 μg ml-1 de Fluconazol () para la inhibición completa del crecimiento (Tabla 2). La cepa CA IV fue altamente resistente al Fluconazol: Se necesitaron 3000 μg ml-1, es decir, 1500 veces la CIM de la cepa CA III, para una inhibición parcial del crecimiento. La inhibición completa del crecimiento no pudo lograrse en esta cepa ni siquiera a una concentración muy alta.

Una concentración del 0,01% de aceite de canela fue suficiente para inhibir completamente el crecimiento de los cuatro aislados. Los aceites de jazmín y lavanda sólo causaron una ligera inhibición del crecimiento y no lograron inhibirlo por completo. Siete aceites inhibieron completamente el crecimiento de las cepas de C. albicans, en el rango de concentración de 0,03-0,15%. Para 11 aceites la CMI osciló entre el 0,16% y el 1,0%. Cinco aceites requirieron una concentración superior al 1,0% (Tablas 2 y 3).

3

Clasificación de los aceites vegetales en función de la Concentración Fungicida Mínima

Aceite de khus

Grupo Aceites MFC MIC ZOI
Más eficaces (0.01-0,15%) Aceite de canela 0,03 0,01 24,0 (±3,60)
Aceite de hierba de limón 0,12 0,16 30.3 (±2,50)
Aceite de clavo 0,12 0,12 20,3 (±0.50)
Aceite de menta japonés 0,06 0,06 26,6 (±3,50)
Aceite de geranio 0.12 0,12 19,0 (±1,73)
Aceite de Motiarosha 0,12 0.09 13,6 (±2,88)
Aceite de hierba de jengibre 0,12 0,15 16,0 (±3.50)
Moderadamente eficaz (0,16-1,0%) Aceite de menta 0,25 0.25 15,6 (±0,50)
Aceite de Tulsi 0,25 0,25 12,0 (±0.00)
Aceite de árbol de té 0,25 0,12 14,6 (±2,50)
Aceite de alcanfor 1.0 0,5 16,3 (±0,50)
Aceite de ocimum 1,0 1,0 16.6 (±0,50)
Aceite de limón 1,0 0,5 17,6 (±2.08)
Aceite de ylang-ylang 1,0 0,5 16,0 (±1,00)
Aceite de naranja 1.0 1,0 25,3 (±1,52)
Menos eficaz (>1,0%) Aceite de bergamota 2.0 1,0 19,3 (±1,52)
Aceite de romero 2,0 1,0 12,3 (±2.51)
Aceite de eucalipto 3,0 2,0 10,0 (±1,00)
Aceite de citronelal 2.0 1,0 06,1 (±1,50)
Aceite de rosa 3,0 1,0 02,0 (±0.00)
Aceite de salvia 3,0 2,0 12,3 (±0,50)
Aceite de enebro >3.0 3,0 05,0 (±0,00)
Aceite de jengibre >3,0 3,0 02,0 (±0.00)
Sin efecto Aceite de Chandan 00
Aceite de madera de cedro 00
Aceite de Jyotishmati 00
Aceite de jojoba 00
Aceite de oliva 00
Aceite de jazmín 00
Aceite de lavanda 00
Aceite de oruga 00
Aceite de nuez 00
Aceite de almendra 00
00
Aceite de Neem 00
Aceite de germen de trigo 00
Aceite de caucho 00
Aceite de cadera 00
Grupo Aceites MFC MIC ZOI
Más eficaz (0.01-0,15%) Aceite de canela 0,03 0,01 24,0 (±3,60)
Aceite de hierba de limón 0.12 0,16 30,3 (±2,50)
Aceite de clavo 0.12 0,12 20,3 (±0,50)
Aceite de menta japonés 0,06 0.06 26,6 (±3,50)
Aceite de geranio 0,12 0,12 19,0 (±1.73)
Aceite de Motiarosha 0,12 0,09 13,6 (±2.88)
Aceite de hierba de jengibre 0,12 0,15 16,0 (±3,50)
Moderadamente eficaz (0,16-1.0%) Aceite de menta 0,25 0,25 15,6 (±0,50)
Aceite de Tulsi 0.25 0,25 12,0 (±0,00)
Aceite de árbol de té 0,25 0,12 14.6 (±2,50)
Aceite de alcanfor 1,0 0,5 16,3 (±0.50)
Aceite de ocimum 1,0 1,0 16,6 (±0,50)
Aceite de limón 1.0 0,5 17,6 (±2,08)
Aceite de Ylang-ylang 1,0 0.5 16,0 (±1,00)
Aceite de naranja 1,0 1,0 25,3 (±1.52)
Menos eficaz (>1,0%) Aceite de bergamota 2,0 1,0 19,3 (±1.52)
Aceite de romero 2,0 1,0 12,3 (±2,51)
Aceite de eucalipto 3.0 2,0 10,0 (±1,00)
Aceite de citronelal 2,0 1.0 06,1 (±1,50)
Aceite de rosa 3,0 1,0 02,0 (±0.00)
Aceite de salvia 3,0 2,0 12,3 (±0,50)
Aceite de enebro >3.0 3,0 05,0 (±0,00)
Aceite de jengibre >3,0 3,0 02,0 (±0.00)
Sin efecto Aceite de Chandan 00
Aceite de madera de cedro 00
Aceite de Jyotishmati 00
Aceite de Jojoba 00
Aceite de oliva 00
Aceite de jazmín 00
Aceite de lavanda 00
Aceite de oruga 00
Aceite de nuez 00
Aceite de almendra 00
Aceite de khus 00
Aceite de neem 00
Aceite de germen de trigo 00
Aceite de colza 00
Aceite de Cade 00

-, indica que no es efectivo.

3

Clasificación de los aceites vegetales basada en la Concentración Fungicida Mínima

Aceite de khus

Grupo Aceites MFC MIC ZOI
Más eficaces (0.01-0,15%) Aceite de canela 0,03 0,01 24,0 (±3.60)
Aceite de hierba de limón 0,12 0,16 30,3 (±2,50)
Aceite de clavo 0.12 0,12 20,3 (±0,50)
Aceite de menta japonés 0.06 0,06 26,6 (±3,50)
Aceite de geranio 0.12 0,12 19,0 (±1,73)
Aceite de Motiarosha 0.12 0,09 13,6 (±2,88)
Aceite de hierba de jengibre 0,12 0.15 16,0 (±3,50)
Moderadamente eficaz (0,16-1,0%) Aceite de menta 0.25 0,25 15,6 (±0,50)
Aceite de Tulsi 0,25 0.25 12,0 (±0,00)
Aceite de árbol de té 0,25 0,12 14,6 (±2.50)
Aceite de alcanfor 1,0 0,5 16,3 (±0.50)
Aceite de ocimum 1,0 1,0 16,6 (±0,50)
Aceite de limón 1.0 0,5 17,6 (±2,08)
Aceite de Ylang-ylang 1,0 0.5 16,0 (±1,00)
Aceite de naranja 1,0 1,0 25,3 (±1.52)
Menos eficaz (>1,0%) Aceite de bergamota 2,0 1,0 19.3 (±1,52)
Aceite de romero 2,0 1,0 12,3 (±2.51)
Aceite de eucalipto 3,0 2,0 10,0 (±1,00)
Aceite de citronelal 2.0 1,0 06,1 (±1,50)
Aceite de rosa 3,0 1.0 02,0 (±0,00)
Aceite de salvia 3,0 2.0 12,3 (±0,50)
Aceite de enebro >3.0 3,0 05,0 (±0,00)
Aceite de jengibre >3,0 3,0 02,0 (±0.00)
Sin efecto Aceite de Chandan 00
Aceite de madera de cedro 00
Aceite de Jyotishmati 00
Aceite de jojoba 00
Aceite de oliva 00
Aceite de jazmín 00
Aceite de lavanda 00
Aceite de oruga 00
Aceite de nuez 00
Aceite de almendra 00
00
Aceite de Neem 00
Aceite de germen de trigo 00
Aceite de caucho 00
Aceite de cadera 00
Grupo Aceites MFC MIC ZOI
Más eficaz (0.01-0,15%) Aceite de canela 0,03 0,01 24,0 (±3.60)
Aceite de hierba de limón 0,12 0,16 30,3 (±2,50)
Aceite de clavo 0.12 0,12 20,3 (±0,50)
Aceite de menta japonés 0.06 0,06 26,6 (±3,50)
Aceite de geranio 0.12 0,12 19,0 (±1,73)
Aceite de Motiarosha 0.12 0,09 13,6 (±2,88)
Aceite de hierba de jengibre 0,12 0.15 16,0 (±3,50)
Moderadamente eficaz (0,16-1,0%) Aceite de menta 0.25 0,25 15,6 (±0,50)
Aceite de Tulsi 0,25 0.25 12,0 (±0,00)
Aceite de árbol de té 0,25 0,12 14,6 (±2.50)
Aceite de alcanfor 1,0 0,5 16,3 (±0.50)
Aceite de ocimum 1,0 1,0 16,6 (±0,50)
Aceite de limón 1.0 0,5 17,6 (±2,08)
Aceite de Ylang-ylang 1,0 0.5 16,0 (±1,00)
Aceite de naranja 1,0 1,0 25,3 (±1.52)
Menos eficaz (>1,0%) Aceite de bergamota 2,0 1,0 19.3 (±1,52)
Aceite de romero 2,0 1,0 12,3 (±2.51)
Aceite de eucalipto 3,0 2,0 10,0 (±1,00)
Aceite de citronelal 2.0 1,0 06,1 (±1,50)
Aceite de rosa 3,0 1.0 02,0 (±0,00)
Aceite de salvia 3,0 2.0 12,3 (±0,50)
Aceite de enebro >3.0 3,0 05,0 (±0,00)
Aceite de jengibre >3,0 3,0 02,0 (±0.00)
Sin efecto Aceite de Chandan 00
Aceite de madera de cedro 00
Aceite de Jyotishmati 00
Aceite de Jojoba 00
Aceite de oliva 00
Aceite de jazmín 00
Aceite de lavanda 00
Aceite de oruga 00
Aceite de nuez 00
Aceite de almendra 00
Aceite de khus 00
Aceite de neem 00
Aceite de germen de trigo 00
Aceite de colza 00
Aceite de Cade 00

-, indica que no es efectivo.

3.3 Determinación de la MFC de los aceites vegetales contra C. albicans

La concentración fungicida mínima (MFC) se define como la menor concentración de aceite que provoca la muerte del 99,9% del inóculo. Todos los aceites que inhibieron el crecimiento mostraron actividad fungicida, excepto los aceites de jazmín y lavanda. En general, se observó que la concentración fungicida era superior a la CMI, excepto en unos pocos casos como los aceites de Menta, Geranio, Ocimum, Clavo y Hierba de jengibre, que provocaron la muerte del 99,9% del inóculo en la CMI. De acuerdo con su MFC contra el ATCC10231, los aceites eficaces podían clasificarse en tres clases. Los aceites que causaron un efecto fungicida a una concentración de 0,03-0,15% se consideran los más eficaces (ME). Los aceites que requieren una concentración del 0,15-1,0% se incluyen en el grupo de los moderadamente eficaces (ME). Los que resultan fungicidas a una concentración superior al 1,0% se consideran menos eficaces (LE).

Se encontró que siete aceites eran los más eficaces (ME) (Tablas 2 y 3). El aceite de canela fue el mejor, teniendo un efecto fungicida a una concentración del 0,03% en los cuatro aislados de C. albicans. El aceite de clavo fue fungicida a una concentración del 0,12% y no hubo diferencias entre el MIC y el MFC. En la mayoría de los aceites ME, se requirió una concentración de 2 a 4 veces la MIC para el efecto fungicida. La respuesta de los aislados de Candida a algunos miembros de este grupo fue divergente, es decir, de la cepa CA II en el caso del aceite de menta japonesa y del aceite de hierba de jengibre, CA III en el caso del aceite de hierba de limón y CA IV en el caso del aceite de hierba de jengibre (Tabla 2).

Los aceites de menta y de árbol de té fueron los mejores entre el grupo de siete miembros de ME, causando un efecto fungicida a una concentración del 0,25% (Tabla 3). El aceite de Tulsi fue fungicida a una concentración del 0,5%, mientras que el MFC de los aceites de alcanfor, limón, ocimum e Ylang-ylang fue del 1%. También se encontraron diferencias de sensibilidad para algunos miembros de este grupo. Se requirió el doble de la CMI para estos aceites, excepto para el aceite de Menta y Ocimum (Tabla 2).

Nueve aceites resultaron ser menos eficaces (Tabla 3). Estos aceites requerían más del 1,0% para ejercer un efecto fungicida. La MFC de estos aceites osciló entre el 1,0% y el 3%, excepto en el caso de los aceites de jazmín, jengibre y enebro, que no fueron fungicidas hasta la concentración del 3%. CA II y CA III mostraron una sensibilidad diferente (Tablas 2 y 3).

4 Discusión

La actividad anticandida de algunos de los aceites esenciales como el aceite del árbol del té es bien conocida. Muchos de los preparados utilizados contra la candidiasis vaginal causada por C. albicans contienen aceite del árbol del té como componente activo . Se han sugerido varios aceites de origen vegetal en las medicinas alternativas contra las infecciones microbianas, incluyendo la candidiasis y la gingivitis . Sin embargo, los antifúngicos azólicos y sus derivados siguen dominando como fármacos de elección contra las infecciones por Candida, como aplicaciones tópicas o como fármacos orales . A excepción del aceite del árbol del té, que tiene una historia de más de 80 años de uso en Australia, no hay muchos productos a base de plantas que hayan entrado en el mercado . Algunos productos que contienen aceite de romero se utilizan contra los hongos causantes de la caspa . Se ha informado de la actividad in vitro contra la cándida de aceites esenciales como el del árbol del té, la hierba de limón, la citronela, la menta y la palmarosa. Hemos examinado la eficacia de 38 aceites de origen vegetal para la actividad anti-Candida in vitro contra cuatro aislados de C. albicans (Tablas 1 y 2). Al menos 23 de los aceites probados se mostraron prometedores como agentes eficaces. Estos aceites pudieron clasificarse según su eficacia (Tabla 3). Uno de los aislados que resultó ser resistente al fluconazol fue inhibido a una concentración muy baja de todos los aceites eficaces de origen vegetal probados en este estudio (Tabla 2).

El ensayo de difusión en disco es un método estándar ampliamente utilizado para el cribado rápido de la actividad antifúngica de los productos naturales. Hemos analizado los aceites vegetales utilizando este método de ensayo tan conveniente. Este estudio indica que es necesario tener precaución, ya que diferentes aceites pueden tener diferentes velocidades de difusión en las placas de agar y esto puede contribuir a la variación de las zonas inhibitorias, lo que lleva a conclusiones erróneas con respecto a su actividad antifúngica. Por ejemplo, algunos de los aceites que mostraron zonas de inhibición más pequeñas en comparación con otros fueron muy eficaces contra las cepas de Candida en el ensayo de dilución en caldo NCCLS que no implica difusión. Por ejemplo, el aceite de canela mostró una ZOI de 24 mm en el ensayo de difusión en disco, mientras que el aceite de hierba de limón mostró 30 mm. Pero en el ensayo MFC, el aceite de canela (0,01%) fue mejor que el aceite de hierba de limón (0,06%). La actividad fungicida se considera una cualidad deseable para los agentes antifúngicos, ya que podría eliminar totalmente el hongo de los tejidos. La anfotericina B es fungicida, se sabe que es muy eficaz contra los hongos patógenos humanos y se utiliza como fármaco de elección en las infecciones fúngicas sistémicas, a pesar de sus graves efectos secundarios. El fluconazol, el agente antifúngico ampliamente prescrito contra las infecciones por Candida, es fungistático por naturaleza y puede requerir un uso prolongado.

Es alentador observar que la mayoría de los aceites utilizados en este estudio eran fungicidas a bajas concentraciones. No se dispone de mucha información sobre el modo de acción de los productos naturales que inhiben el crecimiento de la Candida. Es necesario incluir más cepas resistentes al fluconazol/azol en futuros estudios. Los aceites vegetales podrían ser utilizados como agentes anti-Candida contra las cepas resistentes a los azoles. La mayoría de los aceites utilizados en este estudio tienen un largo historial de uso en alimentos, confitería y como componentes de perfumes . Sin embargo, si se van a tener en cuenta en las preparaciones tópicas, es necesario llevar a cabo una cuidadosa exploración de sus probables efectos irritantes y otros indeseables en los seres humanos.

Agradecimientos

Los autores agradecen al Dr. S.A. Suryawanshi, Honorable Vicerrector de la Universidad SRTM, Nanded (MS) India, por su estímulo.

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