De grundläggande kraven för enzymanalyser beskrivs och ofta förekommande fel och fallgropar samt hur de kan undvikas diskuteras. De viktigaste faktorerna som måste beaktas vid testning av enzymer är temperatur, pH, jonstyrka och korrekta koncentrationer av de väsentliga komponenterna, t.ex. substrat och enzymer. Det vore önskvärt med en standardisering av dessa parametrar, men de olika enzymernas olika egenskaper förhindrar en förenhetligning av testförhållandena. Många enzymer, särskilt de från däggdjur, har dock ett optimalt pH-värde nära det fysiologiska pH-värdet 7,5, och kroppstemperaturen på cirka 37 °C kan användas som testtemperatur, även om 25 °C ofta är att föredra av experimentella skäl. Men i många fall dikterar det enskilda enzymets särskilda egenskaper speciella testförhållanden, som kan avvika avsevärt från de rekommenderade förhållandena.

Det är dessutom inte möjligt att ange exakta värden för koncentrationerna av testkomponenter som substrat och enzymer, såvida inte allmänna regler beroende på den relativa mättnadsgraden kan anges. Regler för att utföra enzymanalysen, lämplig hantering, metodiska aspekter, beredning av analysblandningar och blankprov, val av analystid diskuteras och förslag för att undvika frekventa och triviala fel ges. Särskilda egenskaper hos mer komplexa enzymanalyser, inklusive reversibla reaktioner och kopplade tester, beaktas.

Slutligt beskrivs behandlingen av experimentella data för att uppskatta enzymaktiviteten. Förfarandet för att bestämma den initiala enzymhastigheten och dess omvandling till definierade enzymenheter samt förslag till dokumentation av resultaten presenteras.