Abstract

• Le tecniche di riproduzione assistita sono tecniche in vitro ampiamente utilizzate in molte specie, dove hanno importanza sia sanitaria che economica.

• Negli ultimi decenni, ci sono stati grandi miglioramenti in tali tecniche, tra cui la manipolazione dei gameti, la crioconservazione, la fecondazione in vitro e la produzione di embrioni in vitro; tuttavia, l’efficacia di queste tecniche è lontana dall’essere ottimale rispetto alla situazione in vivo.

• Siccome la maturazione finale dei gameti, la fecondazione e la prima scissione embrionale in vivo avvengono nell’ovidotto, si propone che una più ampia conoscenza dell’ambiente oviduttale aiuterebbe ad aumentare l’efficienza delle tecniche di riproduzione assistita traducendo le condizioni naturali in laboratorio.

Introduzione

La fecondazione in un gran numero di animali avviene in una regione specifica del tratto genitale femminile chiamata ovidotto (tuba uterina o tube di Falloppio), che confina con l’utero e si trova vicino all’ovaio (Figure 1 e 2). L’ovidotto è un complesso condotto fibromuscolare con diversi strati che comprendono la mucosa, lo strato muscolare e una sierosa connettiva. La dimensione di questi diversi strati dipende dalla regione anatomica dell’ovidotto osservata. Nell’ampolla, dove avviene la fecondazione, è stata osservata una mucosa molto ripiegata; tuttavia, la dimensione e il numero delle pieghe sono ridotti nella regione dell’istmo e ancor più nella giunzione tubarica uterina (Figura 2c). La regione dell’istmo è comunemente associata al deposito di sperma prima dell’ovulazione. Eventi molto importanti per la fecondazione avvengono nell’ovidotto. Per esempio, l’ambiente oviduttale è responsabile della maturazione finale dei gameti femminili e maschili, della fecondazione e del primo sviluppo embrionale. È importante prendere in considerazione che i primi embrioni passano diversi giorni nell’ovidotto prima di raggiungere l’utero, dove avviene l’impianto. Di conseguenza, l’ovidotto è un organo dinamico adattato a diverse situazioni che sono principalmente regolate dai diversi livelli ormonali nel sangue. La comprensione delle secrezioni oviduttali in cui sono temporaneamente collocati gameti ed embrioni è in continuo aumento. Tuttavia, è relativamente scarsa, e maggiori informazioni sulle attività biologiche del liquido oviduttale saranno molto utili per motivi domestici, economici e di fertilità. È stato osservato che la fertilità negli animali domestici è ridotta a causa della selezione genetica (ad esempio, le vacche da latte) (Diskin e Morris, 2008). Per questo motivo, prevediamo che la ricerca sui componenti del fluido oviduttale migliorerà la fertilità e l’efficienza delle diverse tecniche di riproduzione assistita (ART) per animali domestici e domestici. Questi aspetti saranno affrontati più in dettaglio in seguito.

Interazioni tra gamete e ovidotto

La fecondazione avviene in una regione specializzata dell’ovidotto chiamata ampolla, dove gli spermatozoi penetrano nel rivestimento extracellulare dell’uovo (cellule del cumulo e zona pellucida). L’arrivo dell’ovocita e degli spermatozoi nell’ovidotto non è sempre un evento sincronizzato perché in alcune specie (ad esempio, il cane), l’ovocita viene rilasciato due o tre giorni prima della fecondazione mentre in altre (ad esempio, i pipistrelli), gli spermatozoi sono presenti nel tratto genitale femminile fino a sei mesi prima dell’ovulazione (Holt, 2011). Di conseguenza, l’ambiente oviduttale fornisce presumibilmente un buon ambiente per la sopravvivenza e la maturazione dei gameti.

L’ovidotto è in grado di svolgere diverse funzioni perché ha diverse regioni anatomiche (Figura 2) e un liquido oviduttale complesso che è dinamico a causa dei cambiamenti prodotti durante il ciclo estrale (Yañiz et al., 2006; Leese et al., 2008; Avilés et al., 2010). Questa complessità ha cominciato ad essere compresa recentemente grazie allo sviluppo di potenti strumenti analitici. Per esempio, diverse centinaia di proteine (spot) possono essere identificate quando il liquido oviduttale viene analizzato biochimicamente (Figura 3). L’uso dell’elettroforesi bidimensionale fornisce informazioni qualitative e quantitative sulle diverse proteine (numero e volume degli spot) presenti nel liquido oviduttale. Questo tipo di analisi rileverebbe sottili cambiamenti (per esempio, fosforilazione) nelle proteine a seconda del ciclo estrale o a causa della presenza di gameti. Risultati sorprendenti includono i cambiamenti che avvengono nel trascrittoma oviduttale a causa della presenza di gameti o embrioni (Fazeli et al., 2004; Georgiou et al., 2007; Almiñana et al., 2012). Cambiamenti ancora più specifici sono stati osservati a seconda dello stadio di sviluppo dell’embrione (embrione a quattro cellule o blastocisti), producendo una downregulation dei geni legati al sistema immunitario che interessano l’utero anche prima dell’arrivo dell’embrione in questo organo (Almiñana et al., 2012). Inoltre, i cambiamenti sono stati rilevati anche in presenza di sperma con un cromosoma X o Y (Almiñana et al., 2014). L’espressione genica (trascrittoma) e proteica (proteoma) nell’ovidotto sono condivise da diverse specie, ma non sono identiche, suggerendo che alcune funzioni sono conservate; tuttavia, sembra che alcune altre proprietà specifiche siano uniche per ogni specie (Bauersachs et al., 2003, 2004; Tone et al., 2008; Mondéjar et al., 2012). Questo dovrebbe essere preso in considerazione per lo sviluppo di diluenti e mezzi di coltura specifici per le diverse specie.

Protezione e sopravvivenza degli spermatozoi

È stato riportato che la presenza del liquido oviduttale ha un effetto positivo sulla vitalità dello sperma (Killian, 2011) e che l’ovidotto fornisce i nutrienti necessari per la sopravvivenza degli ovociti e gli enzimi con un effetto antiossidante nel liquido oviduttale (Leese et al., 2008; Avilés et al., 2010). Questi enzimi sono particolarmente importanti per gli spermatozoi poiché sono facilmente danneggiati quando sono esposti a specie reattive dell’ossigeno (ROS) che modificano la membrana plasmatica (perossidazione proteica e lipidica), il che può portare alla rottura del DNA (Aitken e Luliis, 2010). Inoltre, gli spermatozoi nel tratto genitale femminile sono considerati come cellule estranee, che influenzano la sopravvivenza degli spermatozoi a causa della sorveglianza immunologica (Kawano et al., 2014). Come questo processo sia regolato rimane da chiarire, ma ciò che è indubbio è che l’ambiente oviduttale protegge gli spermatozoi. Le prove a sostegno di ciò si trovano nel fatto che gli spermatozoi possono sopravvivere nell’ovidotto da uno o due giorni nel caso delle mucche o delle scrofe fino a 6 mo nel caso del pipistrello (Holt, 2011).

Maturazione dell’ovocita nell’ovidotto

È stato riportato che la vita dell’ovocita nell’ovidotto è di circa 24 ore nell’uomo, che è simile per la maggior parte delle specie analizzate finora. Tuttavia, il cane è speciale perché l’ovocita rilasciato dall’ovaio al momento dell’ovulazione è immaturo e ha bisogno di risiedere tra 2 e 3 d nell’ovidotto per maturare prima della fecondazione (Tsutsui et al., 2009). In alcune specie, l’efficienza della fecondazione in vitro (FIV) è ancora bassa, principalmente a causa della standardizzazione inadeguata delle tecniche ART (Mondéjar et al., 2012). Tuttavia, due ipotesi relative alla maturazione degli ovociti nell’ovidotto possono essere considerate per spiegare le differenze tra l’efficienza della fecondazione in vivo e in vitro: (i) Gli eventi che avvengono nell’ovidotto non sono fondamentali ma, dato che non si verificano durante le procedure in vitro, solo gli ovociti di migliore qualità sopravvivono. Questa sarebbe la ragione della ridotta percentuale di successo in ART rispetto agli eventi in vivo. (ii) Gli ovociti utilizzati per le procedure in vitro sono di qualità inferiore rispetto a quelli fisiologicamente ovulati e fecondati nell’ovidotto, con il risultato di embrioni con alterazioni in caratteristiche non vitali ma importanti per la loro salute in età adulta, come i segni epigenetici (El Hajj e Haaf, 2013). Diverse proteine nel fluido oviduttale possono legarsi al rivestimento extracellulare dell’ovocita chiamato zona pellucida (ZP), modificando sia la sua composizione proteica che quella dei carboidrati. Così, è stato dimostrato che la glicoproteina specifica dell’ovidotto (OVGP1), l’osteopontina, la prostaglandina D sintasi di tipo lipocalinico e la lattoferrina si associano alla ZP di diverse specie (Goncalves, et al., 2008). OVGP1 è la proteina associata alla ZP più studiata, ed è stato dimostrato il suo ruolo nell’indurimento della ZP pre-fertilizzazione che riduce la polispermia nel maiale (Coy et al., 2008).

Diversi meccanismi che partecipano al legame sperma-ZP e al processo generale di fertilizzazione (regolando la possibilità di polispermia) sono modulati dall’ovidutto. Nel caso dell’indurimento dello ZP pre-fertilizzazione, una serie di esperimenti con ovociti di nove specie e fluidi oviduttali di cinque specie ha indicato che la breve incubazione dell’ovocita con il liquido oviduttale produce un chiaro cambiamento nella resistenza dello ZP alla digestione enzimatica (Mondéjar et al., 2013). Tuttavia, i risultati ottenuti non erano identici, indicando un grado di specificità che potrebbe essere dovuto (i) alle diverse composizioni proteiche del fluido oviduttale o anche a una diversa sequenza proteica codificata dal gene ortologo, come dimostrato per OVGP1 (Avilés et al., 2010) o (ii) una diversa composizione dello ZP (proteine e carboidrati; Stetson et al., 2012). Alcune delle differenze tra le specie potrebbero anche derivare dall’assenza di proteine, come nel caso di OVGP1 nel cavallo e nel ratto. Inoltre, nel cavallo, lo sperma non è in grado di fecondare l’ovocita in vitro; tuttavia, quando l’ovocita viene incubato con liquido oviduttale suino o con la proteina oviduttale DMBT1, il tasso di fecondazione aumenta notevolmente (Ambruosi et al, 2013), dimostrando la rilevanza dell’ovidutto in questa specie.

Gli spermatozoi nell’ovidutto

Gli spermatozoi aderiscono all’epitelio oviduttale nella regione dell’istmo. Questo legame è responsabile della formazione di una riserva di sperma in attesa del momento dell’ovulazione. Questo legame è importante non solo per mantenere la vitalità degli spermatozoi, ma anche per bloccare la capacitazione prematura, che comprometterebbe o addirittura impedirebbe la fecondazione. Il rilascio degli spermatozoi da questo serbatoio sembra essere mediato da diversi fattori tra cui segnali mediati dal complesso cumulo-oocita (COC), componenti oviduttali che modificano il legame degli spermatozoi e anche cambiamenti nei livelli di progesterone ed estradiolo e iperattivazione della motilità dello sperma (Suarez, 2006, 2008; Kölle et al, 2009; Talevi e Gualtieri, 2010; Coy et al., 2012).

Gli spermatozoi rilasciati al momento dell’eiaculazione non sono in grado di fecondare l’ovocita e devono risiedere nel tratto riproduttivo femminile prima di acquisire la capacità di completare il processo di fertilizzazione. I diversi cambiamenti biologici che gli spermatozoi subiscono nel tratto genitale femminile sono noti come capacitazione, un processo scoperto indipendentemente da Austin (1951) e Chang (1951) usando il coniglio come modello animale. Il meccanismo molecolare dettagliato coinvolto in questo processo non è ancora noto, principalmente a causa della difficoltà di accertare ciò che sta realmente accadendo all’interno dell’ovidotto. I cambiamenti osservati nello sperma possono essere prodotti dalla ridistribuzione o dal rilascio di proteine, sebbene anche altri fattori possano essere coinvolti (Yanagimachi, 1994; Florman e Ducibella, 2006). È stato riportato che lo sperma è modificato dal legame di diverse proteine oviduttali (osteopontina e OVGP1), che in generale, aumentano la vitalità dello sperma, la motilità e la capacitazione in diverse specie (Kan et al., 2006; Killian, 2011). Quindi, OVGP1 non solo è in grado di legare lo ZP e lo sperma, ma è anche in grado di aumentare la fosforilazione della proteina nello sperma che è legata alla capacitazione dello sperma (Kan et al., 2006). Altri meccanismi coinvolti nella capacitazione dello sperma bovino e suino sono legati alla presenza di diverse glicosidasi nel liquido oviduttale (Carrasco et al., 2008) e negli epiteli oviduttali (Ma et al., 2012). Inoltre, il rilascio di sialidasi dalla membrana plasmatica dello sperma durante la capacitazione è stato recentemente descritto (Ma et al., 2012). Queste glicosidasi possono modulare il legame degli spermatozoi all’epitelio oviduttale e di conseguenza il loro rilascio dal serbatoio dello sperma. Molto recentemente è stata descritta per la prima volta l’esistenza di un nuovo meccanismo responsabile dei cambiamenti specifici mediati da piccole vescicole (esosomi) durante il transito dello sperma attraverso l’ovidotto (Al-Dossary et al., 2013). Studi recenti che hanno utilizzato topi geneticamente modificati hanno fornito una forte evidenza della rilevanza del tratto genitale femminile nella fertilità dello sperma (Kawano et al., 2010; Turunen et al., 2012). Tali topi modificati sono subfertili o non sono in grado di fecondare l’ovocita utilizzando tecniche di FIVET. Tuttavia, questi topi maschi geneticamente modificati sono fertili in vivo. Si è scoperto che i loro spermatozoi sono in grado di fecondare l’ovocita con tecniche di fecondazione assistita quando vengono incubati con secrezioni uterine, un processo che potrebbe essere mediato dagli esosomi, come descritto sopra (Kawano et al., 2010). Le secrezioni del tratto genitale femminile potrebbero essere utilizzate per migliorare la capacità di fecondazione degli spermatozoi in vitro nel caso di maschi con un importante valore genetico ma altrimenti di scarsa fertilità.

Trasporto di gameti ed embrioni nell’ovidotto

Gameti ed embrioni devono essere nel posto giusto al momento giusto; di conseguenza, l’ovidotto dà un contributo importante a questo processo. Gli spermatozoi devono raggiungere l’ampolla oviduttale per fecondare l’ovocita. Dopo la fecondazione, lo zigote e i primi embrioni devono essere trasportati all’utero per permettere l’impianto della blastocisti nell’endometrio (mucosa uterina). Tuttavia, il meccanismo coinvolto non è così semplice come ci si aspetta.

Trasporto di ovociti ed embrioni

Gli ovociti e gli embrioni sono immotili. Gli ovociti sono circondati da un gran numero di cellule (cellule del cumulo) al momento dell’ovulazione quando formano una struttura chiamata ooforo del cumulo, che è catturato dall’infundibolo (Figura 2). Non hanno la capacità di muoversi come gli spermatozoi, e devono essere trasportati passivamente. È stato riportato che lievi cambiamenti nel livello di espansione del cumulo influenzano l’adesione iniziale dei complessi cumulo-oocita all’epitelio nell’infundibolo, ostacolando il loro ulteriore trasporto (Suarez, 2006). Due componenti essenziali sono coinvolti nel trasporto dell’ovocita al sito di fecondazione: le contrazioni coordinate delle cellule muscolari lisce (miosalpinx o strato muscolare) lungo la lunghezza dell’ovidotto e il battito ciliare delle cellule epiteliali (Figura 4). Se le contrazioni oviduttali sono alterate, l’ovocita non raggiungerà il sito di fecondazione nei topi (Dixon et al., 2009). Gli embrioni e gli ovociti sono trasportati con velocità diverse nell’ovidotto della cavalla e del ratto (Suarez, 2006). Quindi, la prostaglandina E2 prodotta dagli embrioni è coinvolta in questo processo. Recentemente, è stato riportato che gli embrioni inducono un cambiamento nell’espressione genica oviduttale e di conseguenza possono modulare il proprio ambiente (Almiñana et al., 2012).

Trasporto dello sperma

Nonostante il gran numero di spermatozoi rilasciati durante l’eiaculazione (più di 40 milioni e 37. 5 miliardi per l’uomo e il cinghiale, il numero di spermatozoi è molto alto.5 miliardi per l’uomo e il cinghiale, rispettivamente), solo pochi spermatozoi riescono a raggiungere l’ampolla (100-1000 e 5000 per l’uomo e il cinghiale, rispettivamente) e un gran numero viene scartato (Harper, 1994; Hunter, 2012a; Suarez, 2006). La presenza di un numero ridotto di spermatozoi nel sito di fecondazione significa che il rapporto ovociti:spermatozoi è vicino a 1:1. Questo è importante perché numerosi spermatozoi aumenterebbero la polispermia, che è letale per gli embrioni dei mammiferi (Hunter, 2012a). Il meccanismo con cui gli spermatozoi trovano gli ovociti è ancora sconosciuto. Studi recenti suggeriscono che gli spermatozoi raggiungono il sito di fecondazione a causa di un meccanismo di chemiotassi e/o termotassi (Eisenbach e Giojalas, 2006; Hunter, 2012b), processi che sarebbero responsabili di dirigere gli spermatozoi verso la parte superiore dell’ovidotto. È stato suggerito che sia coinvolto un gradiente chimico mediato dal progesterone prodotto dalle cellule del cumulo (Eisenbach e Giojalas, 2006; Coy et al., 2012; Guidobaldi et al., 2012). I topi che producono ovociti oviduttali denudati non sono fecondati in vivo; tuttavia, questi ovociti possono essere fecondati in vitro, suggerendo la rilevanza di questa struttura per la situazione in vivo (Zhuo et al., 2001). Questi studi sottolineano la rilevanza del cumulo ooforo e ci ricordano che i dati ottenuti utilizzando modelli in vitro richiedono un’attenta interpretazione; inoltre, evidenziano la necessità di modelli in vitro più accurati che imitino più da vicino l’ambiente in vivo. Ad oggi, i progressi su questo fronte sono stati lenti. Ci si aspetterebbe che l’ingresso degli spermatozoi nell’ovidotto fosse un processo relativamente semplice che dipende dalla contrazione muscolare dell’utero e dalla motilità dello sperma diretta dalla chemiotassi o dalla termotassi. Tuttavia, è stato dimostrato che gli spermatozoi non sono in grado di attraversare la giunzione tubarica uterina quando una delle proteine dello sperma (ad esempio, ADAM3) è modificata (Okabe, 2013). Resta da scoprire quale specifica interazione molecolare esiste tra lo sperma e l’ovidotto che permette l’ingresso dello sperma nell’ovidotto.

Effetto dell’ambiente oviduttale sullo sviluppo dell’embrione

Il fatto che gli embrioni possono essere ottenuti in vitro e che le donatrici senza i propri embrioni nell’utero possono stabilire una gravidanza dopo il trasferimento dell’embrione mina il ruolo dell’ovidutto. Tuttavia, è stato dimostrato in diverse specie che la qualità della blastocisti ottenuta dopo che gli embrioni sono stati coltivati nell’ovidotto è migliore rispetto agli embrioni prodotti in vitro, almeno in termini di morfologia, espressione genica, criotolleranza e tasso di gravidanza dopo il trasferimento (Rizos et al., 2007; 2010a; Mondéjar et al., 2012; Van Soom et al., 2014). Questo dimostra che l’ovidotto non è un organo per il semplice trasporto dello zigote/ embrione precoce attraverso l’utero, ma che esiste una comunicazione tra loro. Le prime fasi dello sviluppo embrionale si verificano nell’ovidotto dove l’embrione trascorre circa 4-5 d indipendentemente dalla grande differenza nella lunghezza dell’ovidotto osservata in diverse specie (confrontare le figure 1 e 2b; Suarez, 2006; Wang e Dey, 2006). In questo periodo, diversi eventi importanti hanno luogo, il primo è il processo di scissione e il passaggio dal genoma materno al genoma embrionale. Qualsiasi modifica dell’ambiente di coltura che colpisce uno qualsiasi di questi processi potrebbe avere un effetto profondo sulla qualità della blastocisti (Lonergan et al., 2003a). Recentemente, è stato riportato che cambiare le condizioni di coltura da in vivo a in vitro, o il contrario, in un punto specifico dello sviluppo embrionale precoce, sia prima che dopo l’attivazione del genoma embrionale, influenza criticamente i modelli di espressione genica delle blastocisti risultanti (Gad et al., 2012). Inoltre, è stato inizialmente osservato che la scissione embrionale (divisioni cellulari) è bloccata (stadio a due cellule nei topi e stadio a otto cellule nella mucca) quando le condizioni di coltura in vitro non sono ottimali. Nei topi, il blocco dello sviluppo embrionale è stato superato dopo l’aggiunta della proteina oviduttale OVGP1 al mezzo di coltura (Yong et al., 2002). Diversi studi sperimentali hanno dimostrato che l’ovidotto di diverse specie ha proprietà biologiche simili, il che è coerente con profili trascrittomici e proteomici simili (Mondéjar et al., 2012). Così, l’ovidotto di una particolare specie può essere utilizzato per migliorare lo sviluppo embrionale di una specie diversa, in un processo noto come saggio etorologico. Gli ovidotti di bovini, topi, conigli e pecore sono stati utilizzati per la coltura embrionale in ovidotti in situ eterologhi o omologhi per produrre embrioni di migliore qualità da molte specie (Rizos et al., 2002a, 2010a; Lazzari et al., 2010). Qualsiasi comunicazione tra l’ovidotto e l’embrione è finemente regolata; per esempio, nei bovini, solo un embrione si sviluppa in vivo mentre in vitro, la coltura di embrioni in gruppi è necessaria per un più alto tasso di sviluppo delle blastocisti (Goovaerts et al., 2009).

Prospettive future: La scienza di base migliorerà l’efficienza delle tecniche di riproduzione assistita

Si può supporre che l’efficacia delle ART migliorerà tanto più velocemente quanto più aumenta la nostra conoscenza del processo in vivo. La nostra conoscenza degli ambienti in vitro è in gran parte basata su prove ed errori piuttosto che su una conoscenza precisa delle esigenze dei gameti e degli embrioni; quindi, la ART fornirà inevitabilmente un ambiente subottimale, con il risultato di un repertorio discordante di segnali biochimici. La conoscenza dei componenti secretori dell’ovidotto fornirà informazioni utili per il miglioramento delle diverse tecniche ART con importanti conseguenze economiche e sanitarie. Così, alcuni dei protocolli di conservazione delle specie che coprono l’infertilità e la conservazione genetica saranno inevitabilmente migliorati. Lo sviluppo della ART si è verificato in diversi gradi in diverse specie, dimostrando che il processo di fecondazione è simile ma non identico in tutte le specie (Mondéjar et al., 2012; Van Soom et al., 2014), per cui si raccomanda la ricerca futura in diversi modelli animali. L’ovidotto è estremamente importante per gli ovociti, lo sperma e gli embrioni. In vivo, l’ovidotto contribuisce alla protezione e alla maturazione dello sperma. La conoscenza di come questo processo è regolato permetterà di estrapolare questi risultati al miglioramento di diversi diluenti seminali (noti come estensori) che migliorano la vitalità e la qualità degli spermatozoi durante lo stoccaggio dello sperma, la crioconservazione, l’inseminazione artificiale, la FIVET e il sex-sorting. Studi precedenti hanno dimostrato che l’aggiunta di proteine oviduttali ai diluenti spermatici migliora la capacità di fecondazione e la sopravvivenza degli spermatozoi separati per sesso (Klinc e Rath, 2007; Lloyd et al., 2012). Lo studio dettagliato della biologia oviduttale contribuirà alla nostra comprensione della maturazione ovocitaria oviduttale, fornendo nuovi strumenti per migliorare la sopravvivenza e la competenza della meiosi, il controllo della polispermia e la penetrazione dello sperma. Infine, forniamo la prova della rilevanza dell’ovidotto per lo sviluppo di migliori mezzi di coltura per lo sviluppo embrionale e la sopravvivenza dopo la crioconservazione. In conclusione, decenni di studi scientifici di base relativi alla fisiologia dell’ovidutto hanno fornito importanti informazioni sulla fecondazione in vivo e hanno aiutato a raggiungere obiettivi che pochi avrebbero potuto immaginare. Siamo convinti che nel prossimo futuro, le nuove conoscenze generate sull’effetto prodotto dall’ovidotto nei gameti e negli embrioni miglioreranno l’efficienza della ART, con evidenti benefici sanitari ed economici.

Vorremmo scusarci per non aver incluso tutti quegli articoli rilevanti che hanno contribuito allo sviluppo di questo campo a causa dei limiti di spazio. Vorremmo ringraziare tutti i membri dei nostri laboratori per i loro contributi scientifici durante questi anni. Gli autori ringraziano il Dr. Alejandro Torrecillas e Omar Salvador Acuña per la preparazione delle figure 3 e 4, rispettivamente. Il Ministero spagnolo dell’economia e della competitività e la Commissione europea (FEDER/ERDF) hanno sostenuto la ricerca di D. Rizos (AGL2012-37510), P. Coy (AGL2012-40180-C03-01), e M. Avilés (AGL2012-40180-C03-02). M. Avilés è anche sostenuto dalla Fundación Séneca de la Región de Murcia (0452/GERM/06).

Manuel Avilés è professore associato nel dipartimento di biologia cellulare e istologia presso la facoltà di medicina e infermieristica dell’Università di Murcia (Spagna). Ha ottenuto il suo dottorato nel 1997 a Murcia lavorando sul rivestimento extracellulare dell’ovocita chiamato zona pellucida e sui suoi cambiamenti dopo la fecondazione. Ha sviluppato attività di ricerca presso la Queen’s University (Kingston, Canada), la Emory University (Atlanta, USA) e la Lehigh University (Bethlehem, USA). I suoi principali interessi di ricerca si concentrano sui meccanismi molecolari coinvolti nella specificità del riconoscimento tra lo sperma e l’ovocita e su come l’ovidotto contribuisce alla maturazione dei gameti.

Dimitrios Rizos ha ricevuto il suo dottorato nel 2002 dallo University College di Dublino (Irlanda) e successivamente ha lavorato come post-doc. Nel 2004, ha ottenuto una posizione di ricerca di 5 anni presso il Dipartimento di Riproduzione Animale (INIA, Madrid, Spagna), e dal 2006, è un ricercatore senior e capo del laboratorio di Embriologia Preimpianto. Si concentra sullo sviluppo embrionale precoce in vivo e in vitro nei mammiferi e sulla qualità degli embrioni; sui meccanismi che controllano le interazioni materno-embrionali; sui fattori responsabili dell’infertilità nelle vacche da latte e sulle strategie per ridurre le perdite embrionali e aumentare le gravidanze. Ha pubblicato più di 70 articoli ad alto impatto, più di 100 abstract, diversi progetti di ricerca e ha realizzato collaborazioni internazionali.

Pilar Coy è professoressa di fisiologia riproduttiva alla facoltà di veterinaria dell’Università di Murcia, Spagna. Ha ottenuto il suo dottorato nel 1990 con una tesi sulla fecondazione in vitro nei maiali all’Università di Murcia. Ha sviluppato attività di ricerca pre- e post-dottorato presso l’Università di Bologna (Italia), l’Università della California-Davis (USA), il Babraham Institute di Cambridge (UK), l’Università del Tennessee (USA), e l’Istituto di Zoologia (Londra, UK). I suoi principali obiettivi di ricerca si concentrano sullo studio dell’ambiente fisiologico nell’ovidotto durante la fecondazione e sull’identificazione dei fattori oviduttali che influenzano l’interazione dei gameti.

Letteratura citata

.